AEC底物显色试剂盒的原理及使用方法介绍-技术文章

AEC底物显色试剂盒的原理及使用方法介绍

AEC底物显色试剂是一种旨在通过过氧化物酶的催化,底物3-氨基-9-乙基咔唑氧化形成红色不溶性产物,以此鉴定过氧化物酶活性,进而确定目标分子表达的权威而经典的技术方法。其适用于辣根过氧化酶标记蛋白的免疫学检测包括蛋白质西方杂交和免疫化学,以及原位杂交染色等。

AEC底物显色试剂盒原理:

3-氨基-9-乙基咔唑 (3-amino-9-ethylcarbazole,AEC) 是过氧化物酶 (Peroxidase) 的生色底物,在过氧化物酶的催化下,过氧化氢氧化AEC形成稳定的红色沉淀产物。该红色产物不溶于水,但溶于有机溶剂。

AEC底物显色试剂盒使用方法:(仅供参考)

1.工作液配制:

取850ul无菌双蒸水,依次加入50ul溶液A、50 ul溶液B、50ul溶液C、混合均匀,即配成AEC工作液。如需要更大体积工作液,可按相应比例放大。此溶液必须现用现配,配好后避光保存,半小时内使用,过期后请将剩余的液体废弃。

2.显色:

1)蛋白质印迹膜显色:将配制好的工作液滴加在印迹膜上(或将印迹膜浸入AEC工作液中),显色时间一般为10-30min。显色完毕后,将膜浸入蒸馏水中,终止反应。

2)组织切片染色:向组织切片上加入适量AEC工作液,确保能充分覆盖样品。室温孵育10-30 min,避免光照,直至显色至预期深浅。可在显微镜下观察控制显色时间。显色后用蒸馏水洗涤即可终止显色反应。

 3)对于组织切片或细胞样品,显色反应终止后,可对其进行其他染料复染。对于膜,显色反应终止后,可以室温晾干避光保存。

AEC底物显色试剂盒注意事项:

1.由于AEC生成的颜色产物为脂溶性,因此用于IHC显色后不适合梯度酒精脱水,二甲苯透明,中性树胶封片,须用水性封片剂封片。

2.根据情况自行优化实验条件,调整显色时间,获得最佳显色效果。

3.AEC有一定毒性,操作时请采取必要的防护措施。

上海金畔生物科技有限公司为生化试剂供应商,专业生产销售生化试剂、生物试剂、细胞培养、试剂盒、仪器耗材等产品。AEC显色试剂盒为索拉报常备货产品,其货号为A2010。该AEC底物显色试剂盒加入了增强显色试剂,敏感度大大提高。产品操作便捷,显色清晰,重复性好,适用于HRP系统的 IHC 和 Western Blot实验的酶促显色。

nunc

Alpha淀粉酶[苔藓杆菌] Alpha-Amylase (B.licheniformis) 货号:E-BLAAM-100ML Megazyme中国代理商

Alpha淀粉酶[苔藓杆菌]

英文名:Alpha-Amylase (B.licheniformis)

货号:E-BLAAM-100ML

规格:100mL – 3000 units/mL

High purity alpha-Amylase (B. licheniformis) for use in research, biochemical enzyme assays and in vitro diagnostic analysis.

EC 3.2.1.1
CAZy Family: GH13

Alpha-Amylase. From Bacillus licheniformis. Highly purified. For use in Megazyme Total Starch and Dietary Fiber methods. Stabilised solution.

Specific activity: 55 U/mg (40oC, pH 6.0, Ceralpha reagent as substrate).

Stable at 4oC for > 4 years.

Data booklets for each pack size are located in the Technical Resources tab.

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有机试剂氧化剂日本和光Wako有机试剂用于醇类氧化的超高活性有机催化剂norAZADO-一般化学试剂

日本和光Wako有机试剂-用于醇类氧化的超高活性有机催化剂nor-AZADO
9-Azanoradamantane N-oxyl (nor-AZADO)是一种稳定的硝酰自由基型催化剂,用于高效氧化醇,Z初是由东北大学(日本)的lwabuchi教授开发的。与TEMPO相比,它的硝酰自由基具有较小的空间位阻,从而提高了反应活性。

日本和光Wako有机试剂-用于醇类氧化的超高活性有机催化剂nor-AZADO

 

有机试剂氧化剂日本和光Wako有机试剂用于醇类氧化的超高活性有机催化剂norAZADO-一般化学试剂

 

  9-Azanoradamantane N-oxyl (nor-AZADO)是一种稳定的硝酰自由基型催化剂,用于高效氧化醇,zui初是由东北大学(日本)的lwabuchi教授开发的。与TEMPO相比,它的硝酰自由基具有较小的空间位阻,从而提高了反应活性。Nor-AZADO是合成天然产物及医药中间体的有效工具。

◆特点

  ● zui低添加量:小于0.003 mol%

  ● 具有空间位阻的二级醇羟基的氧化反应中,催化效果良好

  ● 用于醇类氧化的高活性有机催化剂

  ● 用于醇类的有氧氧化反应

  ● 大量供货

有机试剂氧化剂日本和光Wako有机试剂用于醇类氧化的超高活性有机催化剂norAZADO-一般化学试剂

 

◆反应例

参考文献

  Hayashi, M., Sasano, Y., Nagasawa, S., Shibuya, M. and Iwabuchi, Y.: Chem. Pharm. Bull. 59, 1570 (2011).

参考文献

  [a]  lwabuchi.Y:Chem.Pharm.Bull.61.1197(2013).

  [b]  岩润好治:Wako Organic Square.29.2(2009).

  [c]  岩润好治:Wako Organic Square.45.2(2013).

  [d]  shibuya,M.Sasano.Y.,Tomizawa.M.Hamada.T.,Kozawa.M.Nagahama.N.and twabuchi,Y.:Synthesis.3418(2011).

  [e]  Hayshi,M,Sasano,Y.,Nagasawa,S,Shibuya,M.and lwabuchi, Y,:Chem.Pharm.Bull.59.1570(2011).

  [f]  Fujiwara,H,Kourogl,T.,Okano,K,and Tokuyama,H,:Angew,Chem,Int,Ed,,51.13062(2012).

◆有氧反应中催化剂活性的比较

 

有机试剂氧化剂日本和光Wako有机试剂用于醇类氧化的超高活性有机催化剂norAZADO-一般化学试剂

 

 

◆催化剂用量的比较

 

有机试剂氧化剂日本和光Wako有机试剂用于醇类氧化的超高活性有机催化剂norAZADO-一般化学试剂

参考文献

  1.    Iwabuchi, Y., et al.: Chem. Pharm. Bull., 59, 1570 (2011).

  2.    Iwabuchi. Y., et al.: Synthesis, 3418 (2011).

  3.    Iwabuchi, Y.,: Chem. Pharm. Bull., 61, 1197 (2013).

 

 

◆AZADO催化剂

 

氧化剂

基质

产物

特征

醛/酮

羧酸

有机试剂氧化剂日本和光Wako有机试剂用于醇类氧化的超高活性有机催化剂norAZADO-一般化学试剂

一级醇

1.不能氧化二级醇;

2.氧化剂,催化剂,价格低廉

3.使用次氯酸钠,PhI(OAc)2作为二次氧化剂

二级醇

×

有机试剂氧化剂日本和光Wako有机试剂用于醇类氧化的超高活性有机催化剂norAZADO-一般化学试剂

一级醇

1.只对仲醇进行氧化

2. 比-Me-AZADO更具高活性

3. 使用次氯酸钠,PhI(OAc)2作为二次氧化剂

二级醇

×

有机试剂氧化剂日本和光Wako有机试剂用于醇类氧化的超高活性有机催化剂norAZADO-一般化学试剂

一级醇

1.具有比TEMPO催化剂高20倍的催化活性

2.与AZADOL®具有相同或稍少的活性化
3. 使用次氯酸钠,PhI(OAc)2作为二次氧化剂

二级醇

有机试剂氧化剂日本和光Wako有机试剂用于醇类氧化的超高活性有机催化剂norAZADO-一般化学试剂

一级醇

1.具有比TEMPO催化剂高20倍的催化活性  

2.可以氧化伯醇
3.使用次氯酸钠,PhI(OAc)2作为二次氧化剂
4.具有稳定性,易储存

二级醇

有机试剂氧化剂日本和光Wako有机试剂用于醇类氧化的超高活性有机催化剂norAZADO-一般化学试剂

一级醇

1.在AZADO系列中zui具活性化

2.进行乙醇的空气氧化反应

3.次氯酸钠,PhI(OAc)2,空气也作为二次氧化剂

二级醇

  AZADOL®是日产化学工业有限公司的注册商标

    进行很好的反应
    良好的反应
    中程度的反应
  ×  不怎么反应

  *这是通常情况下的反应现象,根据其基质和反应系统,其反应性也会相应发生变化。

产品编号 产品名称 产品规格 产品等级 产品价格
016-24984 nor-AZADO 亚硝酰基氧化催化剂 1g 用于有机合成
012-24986 nor-AZADO 亚硝酰基氧化催化剂 5g 用于有机合成
010-24921 AZADOL 亚硝酰基氧化催化剂(2-羟基-2-氮杂金刚烷) 100mg 用于有机合成
016-24923 AZADOL® 亚硝酰基氧化催化剂 1g 用于有机合成
014-24924 AZADOL® 亚硝酰基氧化催化剂 5g 用于有机合成
132-15261 1-Methyl-2-azaadamantane-N-oxyl 1-甲基-2-氮杂金刚烷-N-氧自由基 100mg 用于有机合成
138-15263 1-Methyl-2-azaadamantane-N-oxyl 1-甲基-2-氮杂金刚烷-N-氧自由基 500mg 用于有机合成
048-33891 DMN-AZADO 选择性氧化催化剂 100mg 用于有机合成
044-33893 DMN-AZADO 选择性氧化催化剂 500mg 用于有机合成
209-19501 TEMPO/2,2,6,6-Tetramethyl-1-piperidinyloxy, Radical 四甲基哌啶氧 5g 用于有机合成
207-19502 2,2,6,6-Tetramethyl-1-piperidinyloxy, Radical 2,2,6,6-四甲基哌啶-1-氧自由基 25g 用于有机合成
205-19503 2,2,6,6-Tetramethyl-1-piperidinyloxy, Radical 2,2,6,6-四甲基哌啶-1-氧自由基 100g 用于有机合成

解酸药成分


产品编号 产品名称 产品规格 产品等级 产品价格
131-00282 Magnesium Oxide 氧化镁 25g
133-00281 Magnesium Oxide 氧化镁 100g
135-00285 Magnesium Oxide 氧化镁 500g
195-14515 Sodium Hydrogen Carbonate 碳酸氢钠 500g 分子生物学用
193-14511 Sodium Hydrogen Carbonate 碳酸氢钠 1kg 分子生物学用
  • 产品特性
  • 相关资料
  • Q&A
  • 参考文献

解酸药成分

◆氧化镁(Magnesium   Oxide)

CAS No. 1309-48-4

MgO=40.30

纯度:98.0+%(mass/mass)(Titration)

用途(作用):有产酸作用。

 

◆碳酸氢钠(Sodium   Hydrogen Carbonate)

CAS No. 144-55-8

NaHCO3=84.01

纯度:99.5 ~ 100.3%(Titration)

可溶性溶剂:水

用途(作用):中和胃酸,使酸度降低。

相关资料详情请查看:http:///pdf/show/80.html



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