RIPA裂解液的原理是什么-技术文章

RIPA裂解液的原理是什么

RIPA裂解液(RIPA Lysis Buffer)对动物细胞胞膜、胞浆、胞核成分均有较强裂解作用,RIPA裂解液裂解得到的蛋白样品可以用于常规的Western、IP等。

RIPA裂解液的原理如下:

RIPA主要是从动物组织和动物细胞中抽取的可溶性蛋白。RIPA 组织/细胞裂解液是利用表面活性剂等来裂解细胞膜(包括核膜)。

上海金畔生物科技有限公司高效RIPA裂解液的使用方法

如发现RIPA有沉淀,请放室温半小时或者常温水浴使沉淀溶解。

根据使用量,取每1ml RIPA 加入10ul PMSF,使PMSF的最终浓度为1mM。混匀备用 (PMSF现用现加)。 

1、样品前处理: 

a)对于贴壁细胞:去除培养液,用 PBS、生理盐水或无血清培养液洗一遍。按照 6 孔板每孔细胞量加入150-250 ul裂解液的比例加入裂解液。用枪吹打数下,使裂解液和细胞充分接触。

b)对于悬浮细胞:离心收集细胞,用手指把细胞用力弹散。按照 6 孔板每孔细胞量加入 150-250 ul 裂解液的比例加入裂解液,再用手指轻弹以充分裂解细胞。充分裂解后应没有明显的细胞沉淀。如果细胞量较多,必需分装成50-100万细胞/管,然后再裂解。

c)对于组织样品: 把组织剪切成细小的碎片。按照每20mg组织加入150-250 ul裂解液的比例加入裂解液。 (如果裂解不充分可以适当添加更多的裂解液,如果需要高浓度的蛋白样品,可以适当减少裂解液的用量)。用玻璃匀浆器匀浆,直至充分裂解。

2、后处理:

将裂解后的样品10000-14000g离心3-5分钟,取上清,即可进行后续的PAGE、Western和免疫沉淀等操作。

注意事项 :

强烈型裂解液,可以提取核蛋白,但在提取核蛋白的同时,也会将基因组一并释放出来,造成细胞裂解液粘稠,此时可以直接加入蛋白上样缓冲液,煮沸再离心,离心后直接上样电泳;若想测定浓度,可入加少量 SDS(1%),煮沸后离心测浓度。本系列蛋白提取试剂所提取的白由于含有去污剂,所以不适合使用Bradford蛋白浓度测定试剂盒,请选择BCA法或者Lowry法检测蛋白浓度。

RIPA裂解液的原理是什么-技术文章

nunc

气相色谱用衍生体化试剂


产品编号 产品名称 产品规格 产品等级 产品价格
022-18512 N,N-Bis(trimethylsilyl)methylamine 25 mL for Gas Chromatography
024-18511 N,N-Bis(trimethylsilyl) methylamine 100 mL
022-18291 1-(t-Butyldimethylsilyl) imidazole 1 g
028-18293 1-(t-Butyldimethylsilyl) imidazole 5 g
025-18281 N-(t-Butyldimethylsilyl)-N- methyltrifluoroacetamide 5 mL
023-18282 N-(t-Butyldimethylsilyl)-N- methyltrifluoroacetamide 25 mL
037-23291 Chlorodimethyl (pentafluorophenyl)silane 1 g
033-23293 Chlorodimethyl (pentafluorophenyl)silane 5 g
137-17911 N-Methyl-N- trimethylsilylacetamide 5 mL
135-17912 N-Methyl-N- trimethylsilylacetamide 25 mL
130-18121 N-Methyl-N-trimethylsilylhepta- fluorobutyramide 1 mL
136-18123 N-Methyl-N-trimethylsilylhepta- fluorobutyramide 5 mL
130-17881 N-Methyl-N- trimethylsilyltrifluoroacetamide 5 mL
138-17882 N-Methyl-N- trimethylsilyltrifluoroacetamide 25 mL
169-26301 2,3,4,5,6-Pentafluorobenzoic Anhydride 1 g
165-26303 2,3,4,5,6-Pentafluorobenzoic Anhydride 5 g
168-26391 1-(2,2,3,3,3-Pentafluoro-1- oxopropyl)-1H-imidazole 1 mL
164-26373 1-(2,2,3,3,3-Pentafluoro-1- oxopropyl)-1H-imidazole 5 mL
205-19721 2,2,6,6-Tetramethyl-3,5- heptanedione 5 g
203-19722 2,2,6,6-Tetramethyl-3,5- heptanedione 25 g
049-33201 N,N-Dimethylformamide Dipropyl   Acetal 5 mL
047-33202 N,N-Dimethylformamide Dipropyl   Acetal 25 mL
136-18081 N-Methylbis(heptafluorobutyramide) 1 mL
132-18083 N-Methylbis(heptafluorobutyramide) 5 mL
139-18071 O-Methylhydroxylammonium Chloride 5 g
137-18072 O-Methylhydroxylammonium Chloride 25 g
133-17991 1-Methyl-3-p-tolyltriazene 1 g
139-17993 1-Methyl-3-p-tolyltriazene 5 g
131-17992 1-Methyl-3-p-tolyltriazene 25 g
020-18231 Butylboronic Acid 1 g
026-18233 Butylboronic Acid 5 g
060-06221 Ferroceneboronic   Acid 100 mg
066-06223 Ferroceneboronic   Acid 1 g
161-26241 Pentafluorobenzyl p-Toluenesulfonate 5 g
022-18671 Bornyl Acetate Standard 1 g
123-06341 Liquiritigenin Standard 10 mg
169-26781 Phillyrin Standard 10 mg
197-17691 Sarsasapogenin   Standard 10 mg
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气相色谱用衍生体化试剂


  使用气相色谱/质量分析仪(GC/MS)进行高效分析前需要将样品进行衍生物化。和光有甲硅烷基化剂、酰基化剂、烷烃化剂、酯化剂等衍生体化试剂产品。

 


甲硅烷基化剂

产品编号

产品名称

规格

包装

CAS   NO.

022-18512

N,N-Bis(trimethylsilyl)

methylamine

气相色谱用

25 mL

920-68-3

024-18511

100 mL

920-68-3

022-18291

1-(t-Butyldimethylsilyl)

imidazole

气相色谱用

1 g

54925-64-3

028-18293

5 g

54925-64-3

025-18281

N-(t-Butyldimethylsilyl)-N-

methyltrifluoroacetamide

气相色谱用

5 mL

77377-52-7

023-18282

25 mL

77377-52-7

037-23291

Chlorodimethyl

(pentafluorophenyl)silane

气相色谱用

1 g

20082-71-7

033-23293

5 g

20082-71-7

137-17911

N-Methyl-N-

trimethylsilylacetamide

气相色谱用

5 mL

7449-74-3

135-17912

25 mL

7449-74-3

130-18121

N-Methyl-N-trimethylsilylhepta-

fluorobutyramide

气相色谱用

1 mL

53296-64-3

136-18123

5 mL

53296-64-3

130-17881

N-Methyl-N-

trimethylsilyltrifluoroacetamide

气相色谱用

5 mL

24589-78-4

138-17882

25 mL

24589-78-4

 

 

酰基化剂

产品编号

产品名称

规格

包装

CAS NO.

169-26301

2,3,4,5,6-Pentafluorobenzoic

Anhydride

气相色谱用

1 g

15989-99-8

165-26303

5 g

15989-99-8

168-26391

1-(2,2,3,3,3-Pentafluoro-1-

oxopropyl)-1H-imidazole

气相色谱用

1 mL

71735-32-5

164-26373

5 mL

71735-32-5

205-19721

2,2,6,6-Tetramethyl-3,5-

heptanedione

气相色谱用

5 g

1118-71-4

203-19722

25 g

1118-71-4

 

 

烷烃化剂/酯化剂

产品编号

产品名称

规格

包装

CAS NO.

049-33201

N,N-Dimethylformamide

Dipropyl Acetal

气相色谱用

5 mL

6006-65-1

047-33202

25 mL

6006-65-1

136-18081

N-Methylbis

(heptafluorobutyramide)

气相色谱用

1 mL

73980-71-9

132-18083

5 mL

73980-71-9

139-18071

O-Methylhydroxylammonium

Chloride

气相色谱用

g

593-56-6

137-18072

25 g

593-56-6

133-17991

1-Methyl-3-p-tolyltriazene

气相色谱用

1 g

21124-13-0

139-17993

5 g

21124-13-0

131-17992

25 g

21124-13-0

 

其他

产品编号

产品名称

规格

包装

CAS NO.

020-18231

Butylboronic Acid

气相色谱用

1 g

4426-47-5

026-18233

5 g

4426-47-5

060-06221

Ferroceneboronic   Acid

气相色谱用

100 mg

12152-94-2

066-06223

1 g

12152-94-2

161-26241

Pentafluorobenzyl

p-Toluenesulfonate

气相色谱用

5 g

32974-36-0

 

 

◆产品追加


生药实验用标准品

和光有80种按照日本药局规格的生药实验用标准品,50种自主规格的高纯度生药实验用标准品,总共130种产品,接下来会依次追加产品。和光有生药标准品的介绍手册,如有需要可向和光营业部或代理公司索取。

 

醋酸冰片酯标准品

纯度(cGC):95.0%以上

外观:白色~浅黄色,块状,溶解时会变色无色~淡黄色澄清透明液体

备注:含缩砂等成分

 

气相色谱用衍生体化试剂

 

甘草素标准品

纯度(HPLC):98.0%以上

外观:白色~淡黄色、结晶型粉末~粉末

备注:含甘草成分

 

 

气相色谱用衍生体化试剂

 

 

连翘甙标准品

纯度(HPLC):98.0以上

外观:白色粉末

备注:含连翘成分

 

气相色谱用衍生体化试剂

 

 

洋菝葜皂甙元标准品

纯度(HPLC):98.0%以上

外观:白色~淡灰白色、粉末

备注:含知母成分

气相色谱用衍生体化试剂



 

产品编号

产品名称

规格

备注

CAS NO.

022-18671

Bornyl Acetate Standard

生药实验用

1g

5655-61-8

123-06341

Liquiritigenin Standard

生药实验用

10mg

69097-97-8

169-26781

Phillyrin Standard

生药实验用

10mg

487-41-2

197-17691

Sarsasapogenin Standard

生药实验用

10mg

126-19-2

 

 

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UFSC40001、UFSC20001默克密理博Millipore Amicon搅拌式超滤装置 400ML超滤杯

Amicon 搅拌式超滤装置对于高达 10% 大分子溶质浓度的溶液进行高流速操作。 能进行快速浓缩或脱盐,然后在同一装置中浓缩。 使用本页面上显示的等体积透析模式一般可以回收全部的产品。轻轻的磁搅拌可以控制浓差极化且极少产生剪切变性。 所有搅拌式超滤装置都可以进行高压高温灭菌。“默克密理博Millipore Amicon搅拌式超滤装置 400ML超滤杯”

默克密理博Millipore Amicon搅拌式超滤装置 400ML超滤杯

Amicon 搅拌式超滤装置对于高达 10% 大分子溶质浓度的溶液进行高流速操作。 能进行快速浓缩或脱盐,然后在同一装置中浓缩。 使用本页面上显示的等体积透析模式一般可以回收全部的产品。轻轻的磁搅拌可以控制浓差极化且极少产生剪切变性。 所有搅拌式超滤装置都可以进行高压高温灭菌。

默克密理博Millipore Amicon搅拌式超滤装置 400ML超滤杯

材料
超滤盖和
导管固定组件
尼龙
超滤器筒和滤膜支撑架 聚砜
搅拌组件 乙缩醛,
聚砜
压力导管 聚乙烯
滤过液导管 Tygon® 管

搅拌式超滤装置 型号 8003
目录编号 5125
型号 8050
目录编号UFSC05001
    8010型,5121   8200型,UFSC20001 8400型,UFSC40001
           
zui大处理量,mL 3 10 50 200 400
膜直径,mm 25 25 44.5 63.5 76
有效膜
面积,cm2
0.9 4.1 13.4 28.7 41.8
滞留量,mL 0.07 0.2 0.5 1.2 1.5
高,cm 7.7 7.7 9.8 12.8 15.5
底座,cm 6 x 6 6 x 6 7 x 7 9 x 9 11 x 11
重量,kg 0.1 0.1 0.2 0.4 0.6

SLCR025NB默克密理博MilleLCR过滤器25mm*0.45um货号SLCR025NB

默克密理博Millex-LCR过滤器25mm*0.45um货号SLCR025NB
说明: Millex-LCR 过滤器,0.45 µm,亲水性 PTFE,25 mm,非无菌
商标名: Millex
数量/包装: 250
应用: 低蛋白吸附,用于水溶液和有机溶液的澄清过滤
进口接头: 阴 Luer-Lok 接头
滤膜材质: 亲水性 PTFE
色码: 进/出口均为自然色

默克密理博Millex-LCR过滤器25mm*0.45um货号SLCR025NB

默克密理博Millex-LCR过滤器25mm*0.45um货号SLCR025NB
技术指标
     4mm Millex    25mm Millex
外壳材料    HDPE    HDPE
进口接头    阴 Luer-Lok 接头    阴 Luer-Lok 接头
出口接头    阶形阳 Luer 滑动接头    阳 luer 滑动接头
过滤面积,cm2    0.1    3.9
处理体积,mL    1    100
残留体积,µL    <10    <100
zui大进口压力,bar (psi)    14 (200)    7 (100)
zui高操作温度,° C    45    45

说明: Millex-LCR 过滤器,0.45 µm,亲水性 PTFE,25 mm,非无菌
商标名: Millex  
数量/包装: 250
应用:  低蛋白吸附,用于水溶液和有机溶液的澄清过滤
进口接头: 阴 Luer-Lok 接头   
滤膜材质: 亲水性 PTFE   
色码: 进/出口均为自然色
滤膜商标名: Hydrophilic LCR (PTFE)   
zui大进口压力,bar (psi): 7 (100)
直接病人护理,是/否: N  
出口接头: 阳 luer 滑动接头    
zui高操作温度,°C: 45   
处理体积,mL: 100
滤膜孔径,µm: 0.45   
可润湿性: 亲水  
残留体积,µL: <100   
灭菌: 无   
套筒: HDPE
直径,mm: 30  
滤膜直径,mm: 25   
高度,mm: 19.7   
产品名称: Millex-LCR 过滤器
无菌: 非无菌   
过滤面积,cm2: 3.9   
装置材质: HDPE
 订购信息:
 
低蛋白质吸附 Durapore (PVDF) 膜,用于澄清过滤水和温和有机溶液  |  低蛋白质吸附亲水性 Millipore LCR (PTFE) 膜,用于净化水和有机溶液  |  低蛋白质吸附亲水性 Millipore LCR (PTFE) 膜,用于从水和有机溶液中去除细小颗粒 |  疏水性 Fluoropore (PTFE) 膜,用于澄清过滤有机溶液,低蛋白质吸附 Durapore (PVDF) 膜,用于澄清过滤水和温和有机溶液
     目录编号    产品名称    滤膜孔径,µm    滤膜直径,mm    出口接头    数量/包装     
     SLHVR04NL    Millex-HV 过滤器    0.45    4    阶形阳 Luer 滑动接头    100     
     SLHVR04NK    Millex-HV 过滤器    0.45    4    阶形阳 Luer 滑动接头    1000     
     SLGVR04NL    Millex-GV 过滤器    0.22    4    阶形阳 Luer 滑动接头    100     
     SLGVR04NK    Millex-GV 过滤器    0.22    4    阶形阳 Luer 滑动接头    1000     
低蛋白质吸附亲水性 Millipore LCR (PTFE) 膜,用于净化水和有机溶液
 
     目录编号    产品名称    滤膜孔径,µm    滤膜直径,mm    出口接头    数量/包装     
     SLLHR04NL    Millex-LH 过滤器    0.45    4    阶形阳 Luer 滑动接头    100     
     SLLHR04NK    Millex-LH 过滤器    0.45    4    阶形阳 Luer 滑动接头    1000     
     SLCR025NS    Millex-LCR 过滤器    0.45    25    阳 luer 滑动接头    50     
     SLCR025NB    Millex-LCR 过滤器    0.45    25    阳 luer 滑动接头    250    
 
     SLCR025NK    Millex-LCR 过滤器    0.45    25    阳 luer 滑动接头    1000     
低蛋白质吸附亲水性 Millipore LCR (PTFE) 膜,用于从水和有机溶液中去除细小颗粒
     目录编号    产品名称    滤膜孔径,µm    滤膜直径,mm    出口接头    数量/包装     
     SLLGR04NL    Millex-LG 过滤器    0.2    4    阶形阳 Luer 滑动接头    100     
疏水性 Fluoropore (PTFE) 膜,用于澄清过滤有机溶液
     目录编号    产品名称    滤膜孔径,µm    滤膜直径,mm    出口接头    数量/包装     
     SLFHR04NL    Millex-FH 过滤器    0.45    4    阶形阳 Luer 滑动接头    100     
     SLFH025NS    Millex-FH 过滤器    0.45    25    阳 luer 滑动接头    50     
     SLFH025NB    Millex-FH 过滤器    0.45    25    阳 luer 滑动接头    250    
 
     SLFH025NK    Millex-FH 过滤器    0.45    25    阳 luer 滑动接头    1000    
 
     SLFGR04NL    Millex-FG 过滤器    0.2    4    阶形阳 Luer 滑动接头    100    
 
     SLFG025NS    Millex-FG 过滤器    0.2    25    阳 luer 滑动接头    50    
 
     SLFG025NB    Millex-FG 过滤器    0.2    25    阳 luer 滑动接头    250    
 
     SLFG025NK    Millex-FG 过滤器    0.2    25    阳 luer 滑动接头    1000    
 

FERTIUP® 和CARD MEDIUM® 配件 FERTIUP® &CARD MEDIUM® Peripheral Products


产品编号 产品名称 产品规格 产品等级 产品价格
KYD-S020X10 Sperm Straws (10 Pieces x 10 Units) 
精子吸管(10支x10包)
10PC
KYD-S018 Freezing Canister
 冷冻筒
1UNIT
KYD-S025 Straw Connector 
吸管接头
1PC
KYD-S021 Triangular Cassette Short (10units) 
三角冻存筒(短)(10套)
10UNIT
KYD-S035 Triangular Cassette Long (10units) 
三角冻存筒(长)(10套)
10UNIT
KYD-S036 Embryo manipulation instrument set 
胚胎操作仪器套装
1SET
KYD-S037 Glass capillary 20PC 
玻璃微管20PC
1SET
PHD-APT3-EX Touch Burner APT-3 
触控燃烧器APT-3
10UNIT
NEW-OP1301-01 Ampoule Opener 
安瓿瓶开瓶器
1PC
  • 产品特性
  • 相关资料
  • Q&A
  • 参考文献

FERTIUP® 和CARD MEDIUM®  配件FERTIUP® 和CARD MEDIUM® 配件                  FERTIUP®  &CARD MEDIUM®  Peripheral Products

FERTIUP® & CARD MEDIUM® Peripheral Products

 

以下为冻存小鼠精子的全过程需要各种的实验工具。这些工具你可以选择亲自制作,也可以选择购买成品。

FERTIUP® 和CARD MEDIUM® 配件                  FERTIUP®  &CARD MEDIUM®  Peripheral Products

 


精子吸管Sperm Straws,10套,每套10只



用于存放精子。                                        
容量:0.25mL,
尺寸:10吸管×10套(EOG处理)

FERTIUP® 和CARD MEDIUM® 配件                  FERTIUP®  &CARD MEDIUM®  Peripheral Products

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冷冻桶Freezing Canister





用于冷冻精子。你也可以用以下配件来组装:
>亚克力棒 ( 5mm x 5mm x 50cm)
>50mL一次性注射器
>30mm厚泡沫塑料块
把注射器固定在亚克力棒上,加热密封该注射器的尖端。
你也可以选择购买成品:
尺寸:亚克力棒 ( 5mm×5mm×50cm)
注射器容量:50mL (加热密封)

FERTIUP® 和CARD MEDIUM® 配件                  FERTIUP®  &CARD MEDIUM®  Peripheral Products

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吸管接头Straw Connector (包括5个部分)

构成部分:

硅胶帽,塑料管,硅胶管,

三路活塞和1mL注射器

※不包括吸管接头

精子吸管Sperm Straws(目录号KYD-S020X10)

FERTIUP® 和CARD MEDIUM® 配件                  FERTIUP®  &CARD MEDIUM®  Peripheral Products

FERTIUP® 和CARD MEDIUM® 配件                  FERTIUP®  &CARD MEDIUM®  Peripheral Products

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三角冻存筒(短)Triangular Cassette Short (10套)

尺寸:17×17×17×140 mm

在液氮易于操作旋钮部分:8mm

FERTIUP® 和CARD MEDIUM® 配件                  FERTIUP®  &CARD MEDIUM®  Peripheral Products

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三角冻存筒(长)Triangular Cassette Long (10套)

 

尺寸:17×17×17×270 mm

在液氮易于操作旋钮部分:8mm

FERTIUP® 和CARD MEDIUM® 配件                  FERTIUP®  &CARD MEDIUM®  Peripheral Products

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胚胎操作套装 Embryo Manipulation Instrument Set

 

FERTIUP® 和CARD MEDIUM® 配件                  FERTIUP®  &CARD MEDIUM®  Peripheral Products


套装的构成

微管(含20支,长8-10cm)

玻璃吸管(为防污染已含棉塞)

硅胶管(60厘米)

接口管

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玻璃微管Glass capillary 20PC

 

构成部分:微管(含20支,长8-10cm)

 FERTIUP® 和CARD MEDIUM® 配件                  FERTIUP®  &CARD MEDIUM®  Peripheral Products   FERTIUP® 和CARD MEDIUM® 配件                  FERTIUP®  &CARD MEDIUM®  Peripheral Products

 

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触控燃烧器Touch Burner APT-3

 

 FERTIUP® 和CARD MEDIUM® 配件                  FERTIUP®  &CARD MEDIUM®  Peripheral Products

小巧的APT触控燃烧器不需要天然气管,按开关按钮就能燃烧。可以随意调节火焰,以便完成各种实验。

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安瓿瓶开瓶器Ampoule Opener

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为了防止玻璃碎片伤害医护人员。
安瓿瓶开瓶器采用特殊工程塑料,它可应用于多种尺寸安瓿瓶。不仅携带方便,而且容易清洗和消毒。用75%酒精擦拭开瓶器后,浸泡在2%戊二醛(CIDEX)里3-10小时,或高压灭菌(270°F或132℃/32 PSIG/4分钟)。

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