SMARTer RNA Unique Dual Index Kit酶试剂盒Takara Clontech

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SMARTer RNA Unique Dual Index Kit
品牌 Code No. 产品名称 包装量 价格(元) 说明书 数量
Clontech 634451 SMARTer® RNA Unique Dual Index Kit – 24U 96 Rxns ¥7,589 SMARTer RNA Unique Dual Index Kit SMARTer RNA Unique Dual Index Kit SMARTer RNA Unique Dual Index Kit
Clontech 634452 SMARTer® RNA Unique Dual Index Kit – 96U Set A 384 Rxns ¥23,503 SMARTer RNA Unique Dual Index Kit SMARTer RNA Unique Dual Index Kit SMARTer RNA Unique Dual Index Kit
Clontech 634457 SMARTer® RNA Unique Dual Index Kit – 96U Set B 384 Rxns ¥23,503 SMARTer RNA Unique Dual Index Kit SMARTer RNA Unique Dual Index Kit SMARTer RNA Unique Dual Index Kit
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SMARTer RNA unique dual index kits
– 提供兼容Illumina NGS文库的index
– 最多可用于96个DNA-seq文库
– 尽可能的减少index的交叉污染和扩增造成误差
 
SMARTer RNA unique dual index kits含有PCR引物,可与SMARTer NGS RNA-Seq kits文库制备试剂盒搭配使用,用以构建Illumina测序文库的index引物试剂盒。这些试剂盒包含“IDT for Illumina UD”对应的index引物,用于样本混合测序时的区分。
 
本产品兼容:
· SMARTer Stranded RNA-Seq Kit(Code No. 634836~634839)
· SMARTer Stranded RNA-Seq Kit HT(Code No. 634862)
· SMARTer Stranded Total RNA Sample Prep Kit-Low Input Mammalian(Code No. 634861)
· SMARTer Stranded Total RNA-Seq Kit-Pico Input Mammalian(Code No. 635005~635007)
· SMARTer Stranded Total RNA-Seq Kit v2-Pico Input Mammalian(Code No. 634411~634414)
· SMART-Seq Stranded Kit(Code No. 634442~634444)
· SMARTer smRNA-Seq Kit for Illumina(Code No. 635029~635031)
 
 
 
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基因敲入用长单链DNA制备 v2酶试剂盒Takara Clontech

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基因敲入用长单链DNA制备 v2
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Clontech 632666 Guide-it Long ssDNA Production System v2 50 Rxns ¥6,647 基因敲入用长单链DNA制备 v2 基因敲入用长单链DNA制备 v2 基因敲入用长单链DNA制备 v2
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Guide-it Long ssDNA Production System v2可以让您根据需求,制备长至5,000 nt的长单链DNA(ssDNA),作为修复模板用于多种基因组编辑技术的基因敲入实验。该试剂盒提供了一种简单且快速的方法,通过选择性消化正义链(sense strand)或者反义链(antisense strand),可以将任何序列的dsDNA PCR产物转化成为ssDNA。每个试剂盒可制备50条ssDNA模板。
尽管在利用同源定向修复(HDR)进行准确基因组编辑的应用中,单链DNA(ssDNA)修复模板展示出了优于双链DNA(dsDNA)模板的众多优势(Roth et al., 2018)。但由于制备难度和制备成本的原因,长单链DNA(long ssDNA)的应用受到了限制。Guide-it Long ssDNA Production System v2提供了一种高效经济的方法,可以根据自己的实验需求制备ssDNA,让所有研究人员都可以体验ssDNA模板的优势。
 
与dsDNA相比,使用ssDNA作为模板的优势:
· 显著减少了随机整合和脱靶整合,从而提高了基因编辑效率,降低了出现实验伪像的可能性
· 细胞毒性更低,让您收获到更多的编辑细胞
· 由于来自非整合模板的转基因表达微乎其微,因此更容易识别出正确编辑克隆
 
与原版本产品Guide-it Long ssDNA Production System(Code No. 632644)相比,优化了反应体系,进一步提高了链消化酶(Strandase)处理效率,即便是以往制备困难具有挑战性的dsDNA模板,也可以高效制备ssDNA。
 
■ 产品特点
· 根据需求制备500–5,000 nt ssDNA供体模板,用于基因敲入实验
· 操作流程简单快速,只需几个小时即可完成
· 与dsDNA模板相比,脱靶整合显著降低
· 细胞毒性更低,编辑后的细胞群细胞活力更高
 
■ 实验操作流程图
基因敲入用长单链DNA制备 v2
图1. 用于基因敲入实验的长单链DNA(long ssDNA)供体模板制备流程。首先,使用克隆、融合PCR或者其它方法制备dsDNA模板,dsDNA模板除了包含目的基因之外,还需要包含长度为300-600 bp的同源臂,该同源臂与目的插入位点左右两侧的相邻序列相同源。接着,只在一端使用磷酸化引物进行PCR扩增,制备两种不同的dsDNA PCR产物(分别作为正义链ssDNA和反义链ssDNA制备模板)。添加链消化酶A(Strandase Mix A),开始消化降解正义链或反义链。由于链消化酶A只消化降解5’端被磷酸化的DNA链,所以可以有选择性地降解正义链或反义链。然后,添加链消化酶B(Strandase Mix B)完成消化反应获得ssDNA。最后,纯化反应液,准备适用于后续基因敲入实验的ssDNA供体。请注意,如果正向引物被磷酸化,则生成的ssDNA将是反义链;反之,如果反向引物被磷酸化,最终产物将是正义链。建议制备正义链和反义链两种ssDNA,分别进行基因敲入实验。
 
■ 实验例
基因敲入用长单链DNA制备 v2
图2. Guide-it Long ssDNA Production System v2提升了挑战性模板的处理能力和长至5,000 nt单链DNA的制备能力。Guide-it Long ssDNA Production System v2可成功制备长度为500 nt至5,000 nt的ssDNA。凝胶图显示了不同长度的dsDNA底物(泳道1),经过酶消化和纯化后相对应的正义(SS)和反义(AS)ssDNA产物(泳道2)。每个ssDNA HDR模板均设计为靶向CCR5基因。
 
基因敲入用长单链DNA制备 v2
图3. Guide-it Long ssDNA Production System v2优化了ssDNA制备效率,可更有效处理具有挑战性的dsDNA模板。凝胶图显示了几种HDR模板的dsDNA起始材料(Lane 1)和正义(SS)或反义(AS)ssDNA产物,这些ssDNA分别使用了Guide-it Long ssDNA Production System原版本产品(v1)或升级版本产品(v2)进行制备( Lane 2和Lane 3)。对于v1 Guide-it试剂盒,本实验例所包含的dsDNA模板,已被鉴定为具有挑战性的ssDNA制备底物,很难制备出高纯度ssDNA。以溴化乙锭为染色剂,采用琼脂糖凝胶电泳法分析dsDNA和ssDNA。ssDNA产物的分子量要比相应dsDNA底物的分子量小。在所有情况下,Guide-it Long ssDNA Production System v2制备的ssDNA条带比v1版本更清晰,表明消化更完全、更均匀。
 
■ 产品组份
Guide-it Long ssDNA Production System v2(Code No. 632666)
· Guide-it Long ssDNA Strandase Kit v2(Code No. 632667)*
  PrimeSTAR Max Premix (2X) 625 μl × 4
  Strandase Mix A 250 μl
  Strandase A/B Buffer (10X) 250 μl
  Strandase Mix B 50 μl
  Digestion Enhancer (5X) 500 μl
  RNase Free Water 1 ml × 5
  2-kb Control Template (2 ng/μl) 50 μl
  Control Primer Mix (16 μM) 50 μl
· NucleoSpin Gel and PCR Clean-Up kit (Code No. 740609.50) 50次 × 2
· Buffer NTC(Code No. 740654.100) 125 ml
 
* 本产品不单独出售。
 
■ 保存条件
Guide-it Long ssDNA Strandase Kit v2 (Code No. 632667) -20℃
NucleoSpin Gel and PCR Clean-Up (Code No. 740690.50) 室温
Buffer NTC(Code No. 740654.100) 室温
 
■ 关联资料
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基因敲入用长单链DNA制备 v2
 
 
 
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PrimeScript™ RT reagent Kit (Perfect Real Time)酶试剂盒Takara Clontech

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PrimeScript RT reagent Kit (Perfect Real Time)
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Takara RR037Q PrimeScript RT reagent Kit (Perfect Real Time) 20 Rxns ¥263 PrimeScript™ RT reagent Kit (Perfect Real Time) PrimeScript™ RT reagent Kit (Perfect Real Time) PrimeScript™ RT reagent Kit (Perfect Real Time)
Takara RR037A PrimeScript RT reagent Kit (Perfect Real Time) 200 Rxns ¥1,963
¥1,178
PrimeScript™ RT reagent Kit (Perfect Real Time) PrimeScript™ RT reagent Kit (Perfect Real Time) PrimeScript™ RT reagent Kit (Perfect Real Time)
Takara RR037B (A × 4) PrimeScript RT reagent Kit (Perfect Real Time) 200 Rxns × 4 ¥7,456
¥4,474
PrimeScript™ RT reagent Kit (Perfect Real Time) PrimeScript™ RT reagent Kit (Perfect Real Time) PrimeScript™ RT reagent Kit (Perfect Real Time)

*红字为促销价格,促销时间: 2022年9月1日-2022年10月31日

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PrimeScript™ RT reagent Kit (Perfect Real Time) PrimeScript™ RT reagent Kit (Perfect Real Time) PrimeScript™ RT reagent Kit (Perfect Real Time) PrimeScript™ RT reagent Kit (Perfect Real Time) PrimeScript™ RT reagent Kit (Perfect Real Time)
 
 
■ 制品内容 (Code No.: RR037A)
5X PrimeScript Buffer (for Real Time)*1 400 μl
PrimeScript RT Enzyme Mix I*2 100 μl
Oligo dT Primer (50 μM) 100 μl
Random 6 mers (100 μM) 400 μl
RNase Free dH2O 1 ml
EASY Dilution (for Real Time PCR)*3 1 ml
 
*1 含有dNTP Mixture 和 Mg2+
*2 含有RNase Inhibitor。
*3 用于制作标准曲线时梯度稀释total RNA和cDNA。EASY Dilution (for Real Time PCR) 可以将其稀释至很低浓度也能够得到准确地稀释。本制品不影响反转录和PCR反应,用其稀释后的样品可直接使用。EASY Dilution (for Real Time PCR) 也可以单独购买(Code No. 9160/9160Q)。
注意:EASY Dilution请与本公司Real Time PCR试剂组合使用,对于其他公司的同类制品的适用性本公司尚未进行确认。
 
■ 制品说明
本制品是Real Time RT-PCR用的理想反转录反应试剂。使用具有较强延伸能力的PrimeScript RTase可以在较短时间内高效合成Real Time PCR用cDNA。操作简单,适合进行高通量分析。进行2 Step Real Time RT-PCR反应时,与TB Green Premix Ex Taq II (Tli RNaseH Plus)(Code No. RR820Q/A/B)*、TB Green Fast qPCR Mix (Code No. RR430S/A/B)* , TB Green Premix Ex Taq (Tli RNaseH Plus) (Code No. RR420Q/A/B)* 、 或Probe qPCR Mix (Code No. RR391S/A/B) 试剂配合使用,能进行高性能的基因表达分析。 本制品提供了TB Green分析法和探针分析法各自适合的反应体系,可以根据分析方法选择体系。
*:Takara嵌合法Real Time PCR(qPCR)产品的名称从2017年12月下旬开始,将逐步变更为「TB Green系列」。产品Code、性能和原有产品相比没有变化,请继续放心使用。
产品名称将随新lot的产品逐步变更,产品网页或操作说明书可能会先于产品标签变更,望知悉!
 
■ 保存
-20℃
 
■ 试剂盒特长
1. 可以快速、高效合成Real Time PCR用cDNA,是进行2 Step Real Time RT-PCR反应的理想试剂。
2. 含有Oligo dT Primer和Random 6 mers两种反转录引物,可根据实际情况区别使用。反转录反应可以使用Random 6 mers或Oligo dT Primer,也可以Oligo dT Primer和Random 6 mers同时使用。只扩增一种目的基因时,也可以使用Specific Primer作为反转录引物。
3. 本制品提供了TB Green qPCR分析法和探针qPCR分析法各自适合的反应体系,可以根据分析方法选择体系。
    注意:以下是TB Green qPCR分析法和探针qPCR分析法进行反转录实验的区别
    ① 用于反转录实验RT Primer Mix添加量。
    ② 用于反转录实验total RNA的添加量。
4. Real Time RT PCR定量需要建立标准曲线,建立标准曲线的条件就是需要将总RNA和反转录cDNA稀释到较低的浓度。如果用水或TE Buffer稀释时,由于模板浓度低不稳定,因而会缩小曲线范围,结果准确度降低。本制品中附加了标准曲线制作用稀释液EASY Dilution (for Real Time PCR),将Total RNA或cDNA稀释至低浓度时也能够进行准确稀释,容易在宽广范围内获得准确定量的标准曲线。
 
■ 使用注意
1. 当同时需要进行数次反应时,应先配制各种试剂的混合液 (Master Mix;其中包括RNase Free dH2O、Buffer、酶等),然后再分装到每个反应管中。这样可使所取的试剂体积更准确,减少试剂损失,避免重复分取同一试剂。同时也可以减少实验操作或实验之间产生的误差。
2. 用PrimeScript RT Enzyme Mix I 时使用前要小心地离心收集到反应管底部。由于酶保存液中含有50%的甘油,粘度高,分取时应慢慢吸取。同时,要使用精确、量程适合的移液枪,并且不要使Tip插入液面过深,否则会因Tip壁粘着造成损失。
3. 分装试剂时务必使用新的枪头 (Tip),以防止样品间污染。
 
 
Technote:
  Fast reverse transcription from mouse blood samples using
  PrimeScript Reverse Transcriptase
   
 
  Fast synthesis of cDNA templates for real-time RT-PCR
 

Synthetic siRNA Quantitation Core Kit酶试剂盒Takara Clontech

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Synthetic siRNA Quantitation Core Kit
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Takara 6142 Synthetic siRNA Quantitation Core Kit 30 Rxns ¥4,963 Synthetic siRNA Quantitation Core Kit Synthetic siRNA Quantitation Core Kit Synthetic siRNA Quantitation Core Kit
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Synthetic siRNA Quantitation Core Kit   Synthetic siRNA Quantitation Core Kit   Synthetic siRNA Quantitation Core Kit Synthetic siRNA Quantitation Core Kit
     
Synthetic siRNA Quantitation Core Kit   Synthetic siRNA Quantitation Core Kit   Synthetic siRNA Quantitation Core Kit
 
 
■ 制品内容 (30次量)*1
1. Terminal Transferase Buffer 390 μl
2. Terminal Transferase 30 μl
3. dATP 150 μl
4. Recombinant RNase Inhibitor 30 μl
5. Oligo dT Primer*2 150 μl
6. RT Buffer 270 μl
7. RT Enzyme Mix 30 μl
8. Universal Primer (10 μM) 120 μl
9. EASY Dilution (for Real Time PCR) 1 ml
10. Control siRNA (20 nM) 10 μl
11. Control Primer (10 μM) 20 μl
*1 含 poly dA 加尾反应及反转录反应 30 次反应量、Real Time PCR用Universal Primer 120 次反应量。
*2 本制品专用Oligo dT Primer。
 
 
■ 保存
-20℃。
 
■ 制品说明
在动物或细胞中siRNA对特定基因敲除效果的验证,在医药领域被广泛应用。
本制品是对合成siRNA进行定量的试剂盒,通过Real Time PCR解析方法,对细胞、组织、血液等提取的Total RNA样品中siRNA的残余量进行测定。
siRNA化学合成时一般在3’末端带有两个脱氧胸腺嘧啶(dT)碱基。本试剂盒在3’末端(dT)加上poly(A)尾,再利用特别设计的Oligo dT Primer进行反转录反应,即使在Total RNA存在的条件下也能制备与siRNA互补的cDNA。以合成的cDNA为模板,利用TB Green® Premix Ex Taq Ⅱ (Tli RNaseH Plus)等试剂盒中的嵌合法进行Real Time PCR,对合成的siRNA进行高灵敏度的定量。
注意:1. 本试剂盒应用于3’末端带有脱氧胸腺嘧啶d(TT)的siRNA的定量。
2. 合成的siRNA 3’末端两个(dT)碱基以外带有DNA序列时,可以通过更改Oligo dT Primer序列,使用本试剂盒。
3. 合成的siRNA 3’末端没有添加(dT)碱基或者3’末端为RNA时,不能使用本试剂盒。
 
■ 实验例
小鼠血液中合成siRNA的定量模拟实验
【 方法 】
在50 μl小鼠全血(柠檬酸钠抗凝剂)中分别添加10 amol、1 fmol、100 fmol的Control siRNA后,使用RNAiso Plus(Code No.: 9108)及Dr. GenTLE Precipitation Carrier(Code No.: 9094)制备Total RNA(50 μl)。
使用本制品和TB Green Premix Ex Taq II (Perfect Real Time) 进行Real Time PCR反应,对Control siRNA进行定量检测。
【 结果 】
使用本制品,通过Real Time PCR解析方法,对于添加到小鼠血液中的siRNA进行了定量。
Synthetic siRNA Quantitation Core Kit
图. 小鼠血液样品中掺入的Control siRNA定量结果
 
 

CLEARLY Protein Ladder (Unstained)酶试剂盒Takara Clontech

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CLEARLY Protein Ladder (Unstained)
品牌 Code No. 产品名称 包装量 价格(元) 说明书 数量
Takara 3453A CLEARLY Protein Ladder (Unstained) 500 μl ¥1,090 CLEARLY Protein Ladder (Unstained) CLEARLY Protein Ladder (Unstained) CLEARLY Protein Ladder (Unstained)
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■ 制品内容 CLEARLY Protein Ladder (Unstained)
CLEARLY Protein Ladder (Unstained) 500 μl
 
■ 制品说明
CLEARLY Protein Ladder (Unstained)是由11种高纯度重组蛋白质组成的混合物。经SDS-PAGE电泳和考马斯亮蓝R-250染色检测,可以看到从10-250 kDa清晰可辨的条带。在SDS-PAGE电泳时,本制品作为准确的分子量大小衡量标准来确定目的蛋白质的分子量。30 kDa和80 kDa条带是其他条带质量的4倍,可以作为指示带。本制品已经预混了Loading Buffer,可直接上样电泳,不需要预热处理。使用SDS-PAGE minigel时,以每个泳道上样5 μl,本制品可使用100次。
 
■ 保存
-20℃
* 本制品4℃可稳定保存6个月。
* 本制品反复冻融50次稳定。
 
■ 电泳结果(12%SDS-PAGE)
 
CLEARLY Protein Ladder (Unstained)
使用LabSafe GEL Blue (Code No.: 786-35)染色