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T4 RNA 连接酶 2（dsRNA 连接酶） 货 号 #M0239L-NEB酶试剂 New England Biolabs

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产品资料 – RNA 试剂 – RNA 连接酶和修饰酶

T4 RNA 连接酶 2（dsRNA 连接酶）                              收藏

T4 RNA 连接酶 2（dsRNA 连接酶） 货 号 #M0239L T4 RNA 连接酶 2（dsRNA 连接酶） 货 号 #M0239L T4 RNA 连接酶 2（dsRNA 连接酶） 货 号 #M0239L T4 RNA 连接酶 2（dsRNA 连接酶） 货 号 #M0239L

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特性

 连接粘性末端接头
 连接双链 RNA 中切刻的最佳选择
 可用于 DNA/RNA 杂交链中，RNA 3´ 羟基与 DNA 5´ 磷酸基的连接 

概述

T4 RNA连接酶 2，也被称为 T4 Rnl2（gp24.1），同时具有 RNA 链分子间和分子内连接活性。与 T4 RNA 连接酶 1（NEB #M0204）不同的是， T4 RNA 连接酶 2 对双链 RNA 切刻的连接活性要明显高于对单链 RNA 的末端连接。该酶也可用于连接双链结构中 RNA 3´ 羟基和 DNA 5´ 磷酸基的切刻。
 

来源

纯化自携带 T4 RNA 连接酶 2 基因的重组 E. coli 菌株。 

反应条件

1X T4 RNA 连接酶 2 反应缓冲液[50 mM Tris-HCl (pH 7.5 @ 25℃)，2mM MgCl2，1 mM DTT，400 μM ATP]，37℃ 温育。 

质保声明

无单链和双链 DNA 核酸内切酶、外切酶、 RNase 以及磷酸酶污染
 

单位定义

1 单位指 20 μl 反应体系中， 37℃ 条件下， 30 分钟完全连接 0.4 μg 的 23-mer 和 17-mer RNA等摩尔混合物所需的酶量。单位活性检测的检测条件请登录 www.neb-china.com 或 www.neb.com。
 

浓度

10,000 units/ml。 

参考文献

有关该产品特性和应用的参考文献请联系我们。 www.neb-china.com 或  

RNA 5´ 焦磷酸水解酶（RppH） 货 号 #M0356S-NEB酶试剂 New England Biolabs

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RNA 5´ 焦磷酸水解酶（RppH）                              收藏

RNA 5´ 焦磷酸水解酶（RppH） 货 号 #M0356S RNA 5´ 焦磷酸水解酶（RppH） 货 号 #M0356S RNA 5´ 焦磷酸水解酶（RppH） 货 号 #M0356S

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特性

 将 5´ 三磷酸 RNA 转化为单磷酸 RNA
 制备用于连接的 5´ 磷酸 RNA
 分析 RNA 5´ 末端修饰 

概述

细菌 RNA 5´ 焦磷酸水解酶（RppH）能从 5´末端三磷酸化的 RNA 中去除焦磷酸盐产生 5´ 单磷酸 RNA。 RppH 蛋白又叫 NudH/YgdP，可以将二腺苷五磷酸 (diadenosine penta-phosphate) 分解成 ADP和 ATP。
 

来源

纯化自携带有 RppH 基因的 E. coli 菌株。 

反应条件

1X NEBuffer 2 [10 mM Tris-HCl，50 mM NaCl，1 mM DTT，10 mM MgCl2，( pH 7.9 @ 25℃ ) ]，37℃ 温育。 

随酶提供的试剂

10X NEBuffer 2。 

单位定义

1 单位指 37℃ 条件下，30 分钟内将 1 μg 300-mer RNA 转录产物转化成 XRN-1 可消化的 RNA 所需要的酶量。 

浓度

5,000 units/ml。 

参考文献

有关该产品特性和应用的参考文献请联系我们。  

T4 多聚核苷酸激酶（T4 PNK） 货 号 #M0201L-NEB酶试剂 New England Biolabs

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T4 多聚核苷酸激酶（T4 PNK）                              收藏

T4 多聚核苷酸激酶（T4 PNK） 货 号 #M0201L T4 多聚核苷酸激酶（T4 PNK） 货 号 #M0201L T4 多聚核苷酸激酶（T4 PNK） 货 号 #M0201L T4 多聚核苷酸激酶（T4 PNK） 货 号 #M0201L T4 多聚核苷酸激酶（T4 PNK） 货 号 #M0201L

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相关产品

T4 多聚核苷酸激酶（3´ 磷酸酶活性缺失）

特性

 DNA 或 RNA 5´ 末端的磷酸化，以便进行连接反应
 DNA 或 RNA 的末端标记，用作探针和进行 DNA 测序
 用 T4 多聚核苷酸激酶（NEB #M0201）除去 3´ 磷酸基团
 T4 多聚核苷酸激酶（3´ 磷酸酶活性缺失）（NEB #M0236）将 3´ 端已经磷酸化的单核苷酸 5´磷酸化，制备pNp  底物，用于添加到 DNA 或RNA的 3´ 端
 用 T4 多聚核苷酸激酶（3´ 磷酸酶活性缺失）（NEB #M0236）对 3´ 端有磷酸基团的寡核苷酸的 5´ 端   进行标记

概述

T4 多聚核苷酸激酶能够催化 ATP 的 γ-位磷酸基团转移到寡核苷酸链（双链或单链 DNA 或 RNA）的 5´ -羟基末端以及 3´ -单磷酸核苷上。T4 多聚核苷酸激酶（NEB #M0201）还具有 3´ 磷酸酶活性，将 3´ -磷酸基团从寡核苷酸的 3´ 磷酸末端、脱氧 3´ -单磷酸核苷和脱氧 3´ -二磷酸核苷上水解掉。经修饰后的酶（NEB #M0236）具有所有激酶的活性，但是缺失了 3´ 磷酸酶活性。  

来源

重组 E. coli 菌株，克隆有 T4 多聚核苷酸激酶基因。  

反应条件

1X T4 多聚核苷酸激酶反应缓冲液
[70 mM Tris-HCl（pH 7.6 @ 25℃），10 mM MgCl2，5 mM DTT]，37℃ 温育。
热失活：65℃ 加热 20 分钟。  

注意事项

达到最佳酶活力，需要新鲜缓冲液（在旧缓冲液中，由于氧化造成的 DTT 含量减少会降低酶活力）。  

放射性标记反应：50 μl 反应体系中，用 1X T4 多聚核苷酸激酶反应缓冲液、50 pmol 的 γ-[32P] ATP 和 20 单位的酶 37℃ 温育 30 分钟可催化 1-50 pmol 的 5´ 末端磷酸化。[33P] ATP 可代替 [32P] ATP 作标记反应。

CTP、GTP、TTP、UTP、dATP 及 dTTP 均可替代 ATP 作为磷酸供体。

DNA 或 RNA 磷酸化反应（放射性和非放射性）操作流程请登陆 www.neb.com 或 www.neb-china.com。

要提高平齐末端或 5´ 凹陷末端的磷酸化效率，可在加入 T4 多聚核苷酸激酶前，先将 DNA 溶液于 70℃ 加热 5 分钟，然后冰上冷却，并加入 5%（w/v）的 PEG-8,000。

T4 多聚核苷酸激酶需要 ATP 才能发挥活性，但是为了适用于高活力的放射性标记反应，在随酶提供的反应缓冲液中不含 ATP。

一般来说，进行激酶反应之后是连接反应。在这种情况下，T4 多聚核苷酸激酶反应在连接酶反应缓冲液中 37℃ 温育 30 分钟即可。反应后的产物可直接进行连接，无需改变缓冲液和进行热失活。如果连接时需要保持其它 DNA 片段的去磷酸化状态，则需要在连接反应前热失活 T4 多聚核苷酸激酶。

 

质保声明

T4 多聚核苷酸激酶经过严格的质控检测，确保该产品具有最高的活性和纯度。详情请登陆 www.neb.com 或 www.neb-china.com。  

单位定义

1 单位即 1 个 Richardson 单位，指 37℃条件下，30 分钟内催化 1 nmol 酸不溶性 [32P] 掺入所需要的酶量（1）。单位活性检测条件请登陆 www.neb.com 或 www.neb-china.com。  

浓度

10,000 units/ml。  

参考文献

关于该酶性质和产品应用的参考文献，请登陆 www.neb.com 或 www.neb-china.com。  

T4 多聚核苷酸激酶反应


T4 多聚核苷酸激酶（T4 PNK） 货 号 #M0201L 
在 50 μl T4 多聚核苷酸激酶反应缓冲液体系中，37℃温育 30 分钟，γ-磷酸基团从 ATP 转移至 d(T)8 的 5´ 羟基末端 [ATP 与 d(T)8 比例是 1:1，量为 50 pmol]，结果显示 20 单位酶量可使超过 90% 的磷酸基团转移。

小牛肠碱性磷酸酶（CIP）(停产有替代) 货 号 #M0290L-NEB酶试剂 New England Biolabs

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小牛肠碱性磷酸酶（CIP）(停产有替代)                              收藏

小牛肠碱性磷酸酶（CIP）(停产有替代) 货 号 #M0290L 小牛肠碱性磷酸酶（CIP）(停产有替代) 货 号 #M0290L 小牛肠碱性磷酸酶（CIP）(停产有替代) 货 号 #M0290L

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#M0290L
5,000 units
2,999.00
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#M0290S
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749.00
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停产通知

 请注意：该产品已停产，库存售完为止，替代产品为M0525

特性

 DNA 和 RNA 的去磷酸化

 克隆载体去磷酸化，防止载体自连
 测序或 SNP 分析前除去 PCR 反应中dNTP 和焦磷酸盐
 T4 PNK 标记 5´ DNA 末端前的去磷酸化

概述

小牛肠碱性磷酸酶（CIP）催化 DNA 和 RNA 5´ 和 3´ 磷酸单脂的去磷酸化反应。另外，CIP 水解核糖和脱氧核糖核苷三磷酸（NTP 和 dNTP）。CIP 在分子生物学研究中应用广泛，如去除 DNA 和 RNA 末端的磷酸基团，用于后续的克隆和探针末端标记。在克隆中，对线性载体去磷酸化，防止自连。该酶可以作用于 5´ 突出端、凹陷端和平末端。CIP 也可以用来降解 PCR 反应中的游离 dNTP，用于制备测序模板和 SNP 分析。  

来源

 小牛肠粘膜。 

反应条件

1X 反应缓冲液
[50 mM KAc, 20 mM Tris-Ac, 10 mM Mg(Ac)2, 100 μg/ml BSA (pH 7.9 @ 25℃)]，37℃ 温育。  

质保声明

小牛肠碱性磷酸酶（CIP）经过严格的质控检测，确保该产品具有最高的活性和纯度。详情请登陆 www.neb.com 或 www.neb-china.com。  

单位定义

1 单位指在 1 ml 反应体系中，37℃ 条件下，1 分钟催化 1 μmol 的对硝基苯磷酸盐（PNPP）水解成对硝基苯酚所需的酶量。单位活性检测条件请登陆 www.neb.com 或 www.neb-china.com。  

浓度

10,000 units/ml。  

参考文献

关于该酶性质和产品应用的参考文献，请登陆 www.neb.com 或 www.neb-china.com。  

XRN-1 货 号 #M0338L-NEB酶试剂 New England Biolabs

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上海金畔生物科技有限公司代理New England Biolabs（NEB）酶试剂全线产品，欢迎访问官网了解更多产品信息和订购。

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XRN-1                              收藏

XRN-1 货 号 #M0338L XRN-1 货 号 #M0338L XRN-1 货 号 #M0338L

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#M0338L
100 units
4,259.00
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#M0338S
20 units
1,069.00
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特性

 从 RNA 混合物中去除含有 5´ 单磷酸的 RNA 

概述

XRN-1 在 5´ 单磷酸存在时，是一种 5´ 到 3´方向的高效核糖核酸外切酶。该酶也可以作用于ssDNA 的 5´ 单磷酸，但效率较低。
 

来源

重组 E. coli 菌株携带有表达酵母 XRN-1 基因质粒。 

反应条件

1X NEBuffer 3 [100 mM NaCl，50 mM Tris-HCl，10 mM MgCl2，1 mM DTT (pH 7.9 @ 25℃ ) ]，37℃ 温育。
热失活：70℃ 10 分钟。 

单位定义

1 单位指 37℃ 条件下，1 小时消化 1 μg 磷酸化酵母 RNA 所需要的酶量。 

浓度

1,000 units/ml。 

参考文献

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