ODN 2138 (Control for ODN 1826) Endotoxin-free (sterile) 核苷酸1982(抑制核苷酸1826)无内毒素(无菌) 品牌:Innaxon


ODN 2138 (Control for ODN 1826) Endotoxin-free (sterile)

核苷酸1982(抑制核苷酸1826)无内毒素(无菌)

品牌:Innaxon
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(生产商编号)

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IAX-200-201-C100

100 µg 1,860.00


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ODN 2118 (Control for ODN 1585) Endotoxin-free (sterile) 核苷酸2118(抑制核苷酸1585)无内毒素(无菌) 品牌:Innaxon


ODN 2118 (Control for ODN 1585) Endotoxin-free (sterile)

核苷酸2118(抑制核苷酸1585)无内毒素(无菌)

品牌:Innaxon
CAS No.:
储存条件:+4°C
纯度:
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(生产商编号)

等级 规格 运输包装 零售价(RMB) 库存情况 参考值

IAX-200-203-C100

100 µg 1,860.00


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T4 多聚核苷酸激酶(T4 PNK) 货 号 #M0201L-NEB酶试剂 New England Biolabs

上海金畔生物科技有限公司代理New England Biolabs(NEB)酶试剂全线产品,欢迎访问官网了解更多产品信息和订购。

产品资料 – RNA 试剂 – RNA 连接酶和修饰酶

T4 多聚核苷酸激酶(T4 PNK)                              收藏

T4 多聚核苷酸激酶(T4 PNK)                 货   号                  #M0201L T4 多聚核苷酸激酶(T4 PNK)                 货   号                  #M0201L T4 多聚核苷酸激酶(T4 PNK)                 货   号                  #M0201L T4 多聚核苷酸激酶(T4 PNK)                 货   号                  #M0201L T4 多聚核苷酸激酶(T4 PNK)                 货   号                  #M0201L

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相关产品

T4 多聚核苷酸激酶(3´ 磷酸酶活性缺失)

特性

 DNA 或 RNA 5´ 末端的磷酸化,以便进行连接反应
 DNA 或 RNA 的末端标记,用作探针和进行 DNA 测序
 用 T4 多聚核苷酸激酶(NEB #M0201)除去 3´ 磷酸基团
 T4 多聚核苷酸激酶(3´ 磷酸酶活性缺失)(NEB #M0236)将 3´ 端已经磷酸化的单核苷酸 5´磷酸化,制备pNp  底物,用于添加到 DNA 或RNA的 3´ 端
 用 T4 多聚核苷酸激酶(3´ 磷酸酶活性缺失)(NEB #M0236)对 3´ 端有磷酸基团的寡核苷酸的 5´ 端   进行标记

概述

T4 多聚核苷酸激酶能够催化 ATP 的 γ-位磷酸基团转移到寡核苷酸链(双链或单链 DNA 或 RNA)的 5´ -羟基末端以及 3´ -单磷酸核苷上。T4 多聚核苷酸激酶(NEB #M0201)还具有 3´ 磷酸酶活性,将 3´ -磷酸基团从寡核苷酸的 3´ 磷酸末端、脱氧 3´ -单磷酸核苷和脱氧 3´ -二磷酸核苷上水解掉。经修饰后的酶(NEB #M0236)具有所有激酶的活性,但是缺失了 3´ 磷酸酶活性。  

来源

重组 E. coli 菌株,克隆有 T4 多聚核苷酸激酶基因。  

反应条件

1X T4 多聚核苷酸激酶反应缓冲液
[70 mM Tris-HCl(pH 7.6 @ 25℃),10 mM MgCl2,5 mM DTT],37℃ 温育。
热失活:65℃ 加热 20 分钟。  

注意事项

达到最佳酶活力,需要新鲜缓冲液(在旧缓冲液中,由于氧化造成的 DTT 含量减少会降低酶活力)。  

放射性标记反应:50 μl 反应体系中,用 1X T4 多聚核苷酸激酶反应缓冲液、50 pmol 的 γ-[32P] ATP 和 20 单位的酶 37℃ 温育 30 分钟可催化 1-50 pmol 的 5´ 末端磷酸化。[33P] ATP 可代替 [32P] ATP 作标记反应。

CTP、GTP、TTP、UTP、dATP 及 dTTP 均可替代 ATP 作为磷酸供体。

DNA 或 RNA 磷酸化反应(放射性和非放射性)操作流程请登陆 www.neb.com 或 www.neb-china.com。

要提高平齐末端或 5´ 凹陷末端的磷酸化效率,可在加入 T4 多聚核苷酸激酶前,先将 DNA 溶液于 70℃ 加热 5 分钟,然后冰上冷却,并加入 5%(w/v)的 PEG-8,000。

T4 多聚核苷酸激酶需要 ATP 才能发挥活性,但是为了适用于高活力的放射性标记反应,在随酶提供的反应缓冲液中不含 ATP。

一般来说,进行激酶反应之后是连接反应。在这种情况下,T4 多聚核苷酸激酶反应在连接酶反应缓冲液中 37℃ 温育 30 分钟即可。反应后的产物可直接进行连接,无需改变缓冲液和进行热失活。如果连接时需要保持其它 DNA 片段的去磷酸化状态,则需要在连接反应前热失活 T4 多聚核苷酸激酶。

 

质保声明

T4 多聚核苷酸激酶经过严格的质控检测,确保该产品具有最高的活性和纯度。详情请登陆 www.neb.com 或 www.neb-china.com。  

单位定义

1 单位即 1 个 Richardson 单位,指 37℃条件下,30 分钟内催化 1 nmol 酸不溶性 [32P] 掺入所需要的酶量(1)。单位活性检测条件请登陆 www.neb.com 或 www.neb-china.com。  

浓度

10,000 units/ml。  

参考文献

关于该酶性质和产品应用的参考文献,请登陆 www.neb.com 或 www.neb-china.com。  

T4 多聚核苷酸激酶反应


T4 多聚核苷酸激酶(T4 PNK)                 货   号                  #M0201L
 
在 50 μl T4 多聚核苷酸激酶反应缓冲液体系中,37℃温育 30 分钟,γ-磷酸基团从 ATP 转移至 d(T)的 5´ 羟基末端 [ATP 与 d(T)8 比例是 1:1,量为 50 pmol],结果显示 20 单位酶量可使超过 90% 的磷酸基团转移。

NudC 焦磷酸酶 货 号 #M0607S-NEB酶试剂 New England Biolabs

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NudC 焦磷酸酶                              收藏

NudC 焦磷酸酶                 货   号                  #M0607S NudC 焦磷酸酶                 货   号                  #M0607S NudC 焦磷酸酶                 货   号                  #M0607S NudC 焦磷酸酶                 货   号                  #M0607S NudC 焦磷酸酶                 货   号                  #M0607S

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#M0607S
250 pmol
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特性

·对含 ADP 的、非经典启动核苷酸,如 NAD+ 和 NADH 进行脱帽,生成可连接的 5′ 末端为单磷酸的基团
·水解 NADH 生成 AMP 和还原型烟酰胺单磷酸核苷(NMNH);水解 NAD+ 产生 AMP和烟酰胺单磷酸核苷(NMN+
·水解二磷酸二核苷酸和含有 ADP 基团的代谢辅助因子,如 AppA、FAD、辅酶 A 等
·当 NAD+ 是 RNA 的 5’ 启动核苷酸时,可用于 NAD+ 脱帽或去除 NAD
·适用于基于连接方法的研究,如 5’ RACE 和 RNA 测序,以检测和鉴定含有非经典启动核苷酸的RNA
 
该酶是一种创新酶(EFI,Enzyme for Innovation)。EFI 是由 NEB 发起的一个项目,旨在为科学界提供独特的酶,以期发现新应用。这类酶既有趣又特别。

概述

 NudC 是 NUDIX 焦磷酸酶家族中的一员,可高效水解带 NAD+ 帽 和 NADH 帽的 RNA,生成连接可用的带 5′ 单磷酸末端的 RNA(NAD+ 脱帽或去除 NAD)(1)。研究表明:nudC 基因的缺失增加了大肠杆菌中 NAD+ 帽化 RNA 的比例(2)

 
该酶还能以不同的效率水解含 ADP 基团的小分子,如 NADH、NAD+、AppA、ADP-核糖、ADP-葡萄糖和代谢辅助因子,如 FAD、辅酶 A 和乙酰辅酶 A(3 和未发表结果)。由于其对各种二核苷酸和代谢辅因子的活性,该酶有望通过对帽的焦磷酸化水解作用和核苷酸产物的分析,来识别带有非经典帽结构的 RNA,或使用基于 5′ 连接的方法(如 RNA 测序或 5′ RACE(4))来识别带有 5′ 单磷酸末端的 RNA。
NudC 焦磷酸酶                 货   号                  #M0607S
随酶提供的试剂
NEBuffer™ 3.1
100 mM DTT
 
浓度
10 µM
 
单位定义
在 1X NEBuffer 3.1 和 5 mM DTT 的反应条件中,加入 1 µM NudC,37℃ 温育 30 分钟,能将 200 µM 或更多 NAD+ 水解成 NMN+ 和 AMP。
 
反应条件
1X NEBuffer™ 3.1,补加 5 mM DTT,37℃ 温育。

热失活
65℃ 加热 10 分钟。
 
储存温度
-20℃
 
质保声明 
NudC 焦磷酸酶经过严格的质控检测,确保该产品具有最高的活性和纯度。详情请登陆www.neb.com 或 www.neb-china.com。
 
参考文献

1.  Frick D.N. and Bessman M.J. (1995).  J. Biol. Chem. 270, 1529-1534.

2.  Cahová, H. et al. (2015). Nature. 519, 374-377.

3.  Höfer K. et al. (2016). Nat Chem Biol. 12, 730-734.

4.  Vvedenskaya I.O., et al (2018). Mol Cell. 70, 553-564.e9.