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核酸外切酶 T 货 号 #M0265L-NEB酶试剂 New England Biolabs

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产品资料 – RNA 试剂 – RNA 连接酶和修饰酶

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核酸外切酶 T 货 号 #M0265L 核酸外切酶 T 货 号 #M0265L 核酸外切酶 T 货 号 #M0265L 核酸外切酶 T 货 号 #M0265L

货 号
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#M0265L
1,250 units
3,219.00
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#M0265S
250 units
799.00
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特性

 去除 DNA 或 RNA 3´ 突出末端生成平末端 

概述

核酸外切酶 T（Exo T），又称为 RNase T，是一种单链 RNA 或 DNA 特异性核酸酶，该酶需要游离的 3´ 末端，以 3´ →5´ 方向去除核苷酸。核酸外切酶 T 对于 DNA 的活性比 RNA 高十倍。核酸外切酶 T 可用于含有 3´ 突出末端的 RNA 或 DNA 的末端平滑化。

来源

核酸外切酶 T 与麦芽糖结合蛋白（MBP）进行 C-端融合后，过表达并纯化。随后用 Factor Xa 蛋白酶从核酸外切酶 T 上切除 MBP，最后纯化去除 Xa 因子 和 MBP。从 MBP 上切割的核酸外切酶 T 在 N 端多出一个氨基酸，且 Phe 替换了 Met（即 Glu-Phe-Exo T 而非 Met- Exo T）。 

反应条件

1X NEBuffer 4
[50 mM KAc，20 mM Tris-Ac，10 mM Mg (Ac)2，1 mM DTT (pH 7.9 @ 25℃) ]，25℃ 温育。
热失活：65℃ 20 分钟。 

质保声明

无核酸内切酶和外切酶污染。 

单位定义

1 单位指 100 μl 反应体系中，25℃ 条件下，30 分钟从 1 nmol [3H]-标记的多聚胸腺嘧啶生成 0.1 nmol TCA 可溶性核苷酸所需要的酶量。 

浓度

5,000 units/ml。 

使用注意事项

Exo T 对 DNA 和 RNA 的反应效率不同，DNA 是 RNA 的 100 倍。对于 RNA，在标准反应条件下，完全消化 1.0 pmol rA20 需要 1 单位 Exo T，反应结果通过凝胶电泳检测。 

参考文献

有关该产品特性和应用的参考文献请联系我们。 www.neb-china.com 或  

RNase HII 货 号 #M0288L-NEB酶试剂 New England Biolabs

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RNase HII                              收藏

RNase HII 货 号 #M0288L RNase HII 货 号 #M0288L RNase HII 货 号 #M0288L

货 号
规 格
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苏州库存

#M0288L
1,250 units
3,419.00
无
无
无
无
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#M0288S
250 units
849.00
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特性

 对掺入有 rNTP 的聚合酶产物进行切刻
 与 T7 核酸内切酶 I 联合使用时，在掺入有 rNTP 的区域位点处产生双链断裂
 降解冈崎片段或其它 RNA-DNA 杂交链中的 RNA 部分

 

概述

核糖核酸酶 HII（RNase HII）为核糖核酸内切酶，适用于在双链 DNA 内部切刻核糖核酸的 5´ 末端，产生 5´ 磷酸和 3´ 羟基末端。RNase HII 还可以在冈崎片段的 RNA 部分进行多处切刻切割。 

来源

重组 E. coli 菌株，该菌株携带来自 E. coli 用 Factor Xa 蛋白酶将 RNase HII 从融合蛋白中切割分离，然后再进行纯化去除 MBP 和 Factor Xa 蛋白酶。从 MBP 中切割下来的 RNase HII 在其 N 端多出四个氨基酸（Ile-Ser-Glu-Phe）。
 

反应条件

1X ThermoPol 反应缓冲液[10 mM KCl，20 mM Tris-HCl，10 mM (NH4)2SO4，2 mM MgSO4，0.1% Triton X-100 (pH 8.8 @ 25℃) ]，37℃ 温育。 

质保声明

无核酸内切酶、核酸外切酶和 RNase 污染。 

单位定义

1 单位指 1X ThermoPol 反应体系中，37℃ 条件下，30 分钟产生与切刻切割 100 pmol 合成的双链 RNA 底物产生相同的荧光信号所需的酶量。该合成的双链底物在荧光/淬火基团对的淬火基团附近含有单个核糖核苷。单位活性检测条件请登陆www.nebchina.com 或 www.neb.com 。 

浓度

5,000 units/ml。 

注意事项

与 0.1% SDS 一起温育足以失活 RNase HII。 

参考文献

有关该产品特性和应用的参考文献请联系我们。  

5´ DNA 腺苷化试剂盒 货 号 #E2610L-NEB酶试剂 New England Biolabs

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5´ DNA 腺苷化试剂盒                              收藏

5´ DNA 腺苷化试剂盒 货 号 #E2610L 5´ DNA 腺苷化试剂盒 货 号 #E2610L

货 号
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#E2610L
50 次反应
5,779.00
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#E2610S
10 次反应
1,449.00
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特性

 酶法对 ssDNA 接头进行 5´ 腺苷化，用于二代测序
 单步反应即可完成定量腺苷化
 比目前其它化学和酶学方法更简便
 产物无需纯化

概述

 5´ DNA 腺苷化试剂盒能将 DNA 寡核苷酸 5´端腺苷化，试剂盒操作简便高效，反应需要 Mth RNA 连接酶、 ATP 和 5´ –磷酸化的单链 DNA。试剂盒经过优化，无论序列有无 3´ 端终止子，都能够生成腺苷化的 DNA。通常该试剂盒能将 95% 的 pDNA转化成 AppDNA。高效的转化，使得反应无需进行胶回收提纯步骤，因此可增加总产量。
 

5′ DNA 腺苷化试剂盒组份

– Mth RNA 连接酶（重组酶）
– 5´ DNA 腺苷化缓冲液（10X）
– 1 mM ATP 

质保声明

无核酸内切酶、核酸外切酶污染。

 

注意事项

该酶转化率低，需要约等量摩尔浓度的酶和底物 DNA 相互作用。在二代测序 cDNA文库构建实验中，预腺苷化 DNA 的连接头可用于 RNA 3´ 末端的连接。
 

参考文献

有关该产品特性和应用的参考文献请联系我们。  

RNase If 货 号 #M0243L-NEB酶试剂 New England Biolabs

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RNase If 货 号 #M0243L RNase If 货 号 #M0243L RNase If 货 号 #M0243L

货 号
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#M0243L
25,000 units
2,979.00
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#M0243S
5,000 units
749.00
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特性

 重组酶
 去除 DNA 和蛋白质制备过程中的 RNA
 降解单链 RNA 生成单、二或三核苷酸
 用于核糖核酸酶保护试验 

概述

核糖核酸酶  If（RNase If）是一种 RNA 核酸内切酶，能够切割所有 RNA 二核苷酸键，产生 5´ 羟基和 2´ , 3´ 环状单核苷酸。该酶对单链 RNA 的活性比双链 RNA 高。重组 RNase If 是 RNase I（来源于E. coli）与麦芽糖结合蛋白的融合蛋白，与野生型RNase I 具有相同活性。
 

来源

重组 E. coli 菌株，携带来自 E. coli 的 RNase I 基因（rna）及编码麦芽糖结合蛋白（MBP）的基因。 

反应条件

1X NEBuffer 3
[100 mM NaCl，50 mM Tris-HCl，10 mM MgCl2，1 mM DTT (pH 7.9 @ 25℃) ]，37℃ 温育。
热失活：70℃ 20 分钟。 

使用注意事项

RNase If 不能降解 DNA。降解单链 RNA 的能力比降解双链 RNA 的能力强。 

质保声明

无核酸内切酶、核酸外切酶污染

 

单位定义

1 单位指 10 μl 反应体系中，37℃ 条件下，15 分钟完全降解 1 pmol 合成的 33-mer ssRNA 所需的酶量。反应在 1X NEBuffer 3 中进行，20% 丙烯酰胺凝胶电泳（40:1 Bis），SYBR® Gold 染色后观察结果。单位活性检测条件请登陆 www.neb-china.com 或 www.neb.com 。 

浓度

50,000 units/ml。 

参考文献

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RtcB 连接酶 货 号 #M0458S-NEB酶试剂 New England Biolabs

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RtcB 连接酶                              收藏

RtcB 连接酶 货 号 #M0458S RtcB 连接酶 货 号 #M0458S RtcB 连接酶 货 号 #M0458S RtcB 连接酶 货 号 #M0458S

货 号
规 格
价 格(元)
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#M0458S
25 次反应
909.00
有
有
有
无
有

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特性

    连接单链 RNA 或单链 DNA 的 3´ –磷酸基团或 2´ ,3´ –环磷酸基团连接到单链 RNA 的 5´ –羟基上

含有匹配末端的单链 RNA 环化

 

 

概述

来源于 E. coli 的 RtcB 连接酶能将单链线性RNA 分子中的 3´ –磷酸基或 2´ , 3´ –环磷酸基团与另一个 RNA 分子的 5´ –羟基进行连接。连接反应需有 GTP 和 MnCl2 的参与，并在反应过程中会形成反应中间体–鸟苷酸。如底物末端含有 2´ , 3´ –环磷酸基团，需先行水解成 3´ –磷酸基，然后再通过 GMP 进行 3´ 末端活化和连接。

 

来源

重组 E. coli 菌株，携带有 His 标签的 RtcB 连接酶基因。

 

反应条件

1X RtcB 反应缓冲液 [50 mM Tris-HCl (pH8.3 @ 2℃), 75 mM KCl, 3 mM MgCl2, 10 mM DTT]，补加0.1 mM GTP 和 1 mM MnCl2。 37℃ 温育。

 

 

质保声明

无单链和双链 DNA 核酸内切酶、外切酶、 RNase 以及磷酸酶的污染。

 

浓度

15 μM  

参考文献

 有关该产品特性和应用的参考文献请联系我们。 www.neb-china.com 或 www.neb.com。