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| in vitro Transcription T7 Kit（for siRNA Synthesis） | ||||||
| 品牌 | Code No. | 产品名称 | 包装量 | 价格（元） | 说明书 | 数量 |
| Takara | 6140 | in vitro Transcription T7 Kit（for siRNA Synthesis） | 50 Rxns | ￥2,504 ￥2,128 |
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*红字为促销价格，促销时间: 2022年9月1日-2022年10月31日
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品牌：Wako
CAS No.：N/A 储存条件：室温 纯度：– |
| 产品编号
(生产商编号) |
等级 | 规格 | 运输包装 | 零售价(RMB) | 库存情况 | 参考值 |
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235-55803 |
No grade | 1 column(W) | – | 7,850.00 | – | – |
* 干冰运输、大包装及大批量的产品需酌情添加运输费用
* 零售价、促销产品折扣、运输费用、库存情况、产品及包装规格可能因各种原因有所变动，恕不另行通知，确切详情请联系上海金畔生物科技有限公司。
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75℃ 20 分钟。
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缺口填充（无链置换活性）
1 单位指在 37℃ 条件下反应 30 分钟，能使 10 nmol 的 dNTP 掺入酸不溶物所需要的酶量。
10,000 units/ml。
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品牌：Chemodex
CAS No.： 储存条件：-20°C 纯度：>98% (NMR) |
| 产品编号
(生产商编号) |
等级 | 规格 | 运输包装 | 零售价(RMB) | 库存情况 | 参考值 |
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CDX-D0575-M001 |
– | 1 mg | – | 6,430.00 | – | – |
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品牌：Chemodex
CAS No.：261351-46-6 储存条件：-20°C 纯度：>95% (HPLC) |
| 产品编号
(生产商编号) |
等级 | 规格 | 运输包装 | 零售价(RMB) | 库存情况 | 参考值 |
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CDX-D0513-M001 |
– | 1 mg | – | 6,430.00 | – | – |
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热失活：65℃ 加热 20 分钟。
10,000 units/ml。
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该酶催化双链 DNA 或 RNA 上相邻的 5´ -磷酸末端和 3´ -羟基末端形成磷酸二酯键。该酶不仅能够催化平齐末端或粘性末端之间的连接，还可以修复双链 DNA、RNA 或 DNA/RNA 杂交双链中的单链切刻。
纯化自 E. coli C600 pcl857 pPLc28 lig8。
1X T4 DNA 连接酶反应缓冲液
[50 mM Tris-HCl（pH 7.5 @ 25℃），10 mM MgCl2，10 mM DTT，1 mM ATP] 推荐 DNA 5´ 末端浓度为 0.1-1.0 μM，16℃ 温育。
65℃ 加热 10 分钟。
T4 DNA 连接酶经过严格的质控检测，确保该产品具有最高的活性和纯度。详情请登陆www.neb.com 或 www.neb-china.com。
1 单位指在 20 μl 1X T4 DNA 连接酶反应缓冲液中，16℃ 反应条件下，30 分钟能使 50% 的经 HindIII 消化的λDNA 片段 [5´ 端浓度为 0.12 μM（300μg/ml）] 连接所需的酶量。
400,000 units/ml 和 2,000,000 units/ml。
与 E. coli DNA 连接酶需要 NAD+ 作辅因子不同，T4 DNA 连接酶的辅因子是 ATP。若需稀释 T4 DNA 连接酶，推荐使用 50% 甘油贮存缓冲液（稀释缓冲液 A，NEB #B8001）稀释，-20℃ 保存。如稀释后马上使用，也可用 1X T4 DNA 连接酶反应缓冲液稀释。
只要在反应体系中补加 1 mM ATP，连接反应就可以在 NEB 提供的四种限制性内切酶缓冲液或在 T4 DNA 多聚核苷酸激酶反应缓冲液中进行。
该产品的特性和应用的参考文献，请登陆 www.neb.com 或 www.neb-china.com。
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品牌：Chemodex
CAS No.：208850-35-5 储存条件：-20°C 纯度：>95% (HPLC) |
| 产品编号
(生产商编号) |
等级 | 规格 | 运输包装 | 零售价(RMB) | 库存情况 | 参考值 |
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CDX-D0544-M001 |
– | 1 mg | – | 6,430.00 | – | – |
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T4 多聚核苷酸激酶（3´ 磷酸酶活性缺失）
T4 多聚核苷酸激酶能够催化 ATP 的 γ-位磷酸基团转移到寡核苷酸链（双链或单链 DNA 或 RNA）的 5´ -羟基末端以及 3´ -单磷酸核苷上。T4 多聚核苷酸激酶（NEB #M0201）还具有 3´ 磷酸酶活性，将 3´ -磷酸基团从寡核苷酸的 3´ 磷酸末端、脱氧 3´ -单磷酸核苷和脱氧 3´ -二磷酸核苷上水解掉。经修饰后的酶（NEB #M0236）具有所有激酶的活性，但是缺失了 3´ 磷酸酶活性。
重组 E. coli 菌株，克隆有经修饰的 T4 多聚核苷酸激酶基因。
热失活：65℃ 加热 20 分钟。
达到最佳酶活力，需要新鲜缓冲液（在旧缓冲液中，由于氧化造成的 DTT 含量减少会降低酶活力）。
放射性标记反应：50 μl 反应体系中，用 1X T4 多聚核苷酸激酶反应缓冲液、50 pmol 的 γ-[32P] ATP 和 20 单位的酶 37℃ 温育 30 分钟可催化 1-50 pmol 的 5´ 末端磷酸化。[33P] ATP 可代替 [32P] ATP 作标记反应。
CTP、GTP、TTP、UTP、dATP 及 dTTP 均可替代 ATP 作为磷酸供体。
DNA 或 RNA 磷酸化反应（放射性和非放射性）操作流程请登陆 www.neb.com 或 www.neb-china.com。
要提高平齐末端或 5´ 凹陷末端的磷酸化效率，可在加入 T4 多聚核苷酸激酶前，先将 DNA 溶液于 70℃ 加热 5 分钟，然后冰上冷却，并加入 5%（w/v）的 PEG-8,000。
T4 多聚核苷酸激酶需要 ATP 才能发挥活性，但是为了适用于高活力的放射性标记反应，在随酶提供的反应缓冲液中不含 ATP。
一般来说，进行激酶反应之后是连接反应。在这种情况下，T4 多聚核苷酸激酶反应在连接酶反应缓冲液中 37℃ 温育 30 分钟即可。反应后的产物可直接进行连接，无需改变缓冲液和进行热失活。如果连接时需要保持其它 DNA 片段的去磷酸化状态，则需要在连接反应前热失活 T4 多聚核苷酸激酶。
T4 多聚核苷酸激酶和 T4 多聚核苷酸激酶（3´ 磷酸酶活性缺失）经过严格的质控检测，确保该产品具有最高的活性和纯度。详情请登陆 www.neb.com 或 www.neb-china.com。
1 单位即 1 个 Richardson 单位，指 37℃条件下，30 分钟内催化 1 nmol 酸不溶性 [32P] 掺入所需要的酶量（1）。单位活性检测条件请登陆 www.neb.com 或 www.neb-china.com。
10,000 units/ml。
关于该酶性质和产品应用的参考文献，请登陆 www.neb.com 或 www.neb-china.com。
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| Lenti-X 293T 细胞系 | ||||||
| 品牌 | Code No. | 产品名称 | 包装量 | 价格（元） | 说明书 | 数量 |
| Clontech | 632180 | Lenti-X 293T Cell Line | 1 ml | ￥7,650 |  |
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| Lenti-X 293T 细胞系 | |||||||||||||
| 要充分利用慢病毒包装系统，就需要具备一个HEK 293T宿主细胞系，这个细胞系要易于转染并且可以高水平表达病毒蛋白质。我们的Lenti-X 293T cell line经过了克隆筛选，可以充分满足这些需求，当与我们优质的高滴度Lenti-X包装系统配合使用时，可以获得尽可能高的慢病毒滴度（高达108 IFU/ml）。Lenti-X 293T Cell Line是人胚胎肾细胞转化细胞HEK 293的亚克隆，它可高度转染并高水平表达病毒蛋白质，也可稳定表达猿猴病毒40（SV40）大T抗原。 |
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| 温馨提示：建议细胞产品接收后立即进行复苏培养，如若不能立即复苏培养则需要保存在液氮中或者-150℃冰箱中，并尽早进行复苏培养。对于HEK 293细胞，建议采用胶原蛋白包被培养皿辅助细胞贴壁。 | |||||||||||||
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| 图1. Lenti-X 293T细胞系 |
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| ■ 实验例 | |||||||||||||
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| 图2. 制备高滴度慢病毒。使用Lenti-X表达系统进行慢病毒包装，添加指定体积（μl）的慢病毒上清液转导Lenti-X 293T细胞，然后使用嘌呤霉素筛选9天形成抗性菌落，之后使用结晶紫进行染色。 |
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| 图3. 293T细胞系可制备出更高的病毒滴度。我们使用第四代慢病毒包装系统和一种pLVX-慢病毒载体，比较Lenti-X 293T Cell Line和其它两种常用HEK 293包装细胞系的病毒制备能力。Lenti-X 293T Cell Line明显优于其他细胞系——所获得的病毒滴度比293FT细胞高出6倍，比亲代HEK 293细胞系高出30倍。 |
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产品详情请点击： |
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10,000 units/ml。
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33,485 Da。
10 mg/ml。
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10,000 units/ml。
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含有编码 T4 denV 基因质粒的 E. coli 菌株。
10,000 units/ml。
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3,000,000 units/ml。
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1 X T7 DNA 连接酶反应缓冲液
3,000,000 units/ml。
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请注意：该产品已停产，库存售完即止。该产品的替代产品为 T5 核酸外切酶（订购货号： M0663）。M0663 新产品与原产品的名称一样，但新产品带有一个 his 标签；新产品的单位定义也根据 GMP 产品的要求进行了修正；新产品的产品性能、蛋白浓度及反应条件均未发生变化。
10,000 units/ml。
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Salt-T4 耐盐 DNA 连接酶作为 T4 DNA 连接酶的耐盐变体，该酶催化双链 DNA 或 RNA 上相邻的5´ -磷酸末端和 3´-羟基末端形成磷酸二酯键，比野生型T4 DNA连接酶更耐受高盐条件。该酶在盐浓度高达300mM的情况下仍能连接粘性末端而不丧失任何活性。该酶对其他反应组分（载体或插入片段）携带的盐不敏感，并允许连接反应在盐含量较高的替代反应缓冲液（如 NEBuffer 3.1）中进行。
图1：与T4 DNA连接酶相比，Salt-T4 耐盐 DNA 连接酶在粘性末端底物上表现出更高的耐盐性
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· 固定化 T4 DNA 连接酶（IM T4 DNA Ligase）由 T4 DNA 连接酶和磁珠组成，两者由共价键连接。
T4 DNA 连接酶催化双链 DNA 或 RNA 上相邻的 5´-磷酸基末端和 3´-羟基末端形成磷酸二酯键。该酶不仅能够催化平末端或粘性末端之间的连接，还可以修复双链 DNA、RNA 或 DNA/RNA 杂交双链中的单链切刻（1）。
固定化 T4 DNA 连接酶（IM T4 DNA Ligase）是包被有 T4 DNA 连接酶的磁珠悬浮液，以 10 mg/ml 的溶液（50% 甘油）提供，每微升溶液的有效浓度为 60 粘性末端单位（CEU）。反应完成后，体系中的酶可使用磁力去除，然后可重复使用。
固定化 T4 DNA 连接酶在不同温度下的相对活性
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Temperature |
% Activity |
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16ºC |
100% |
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25ºC |
100% |
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37ºC |
50% |
固定化 T4 DNA 连接酶在不同 NEB 缓冲液中的活性
图 1：固定化 T4 DNA 连接酶成功连接 Lambda DNA-HindIII 消化产物
根据产品说明书推荐步骤，分别使用无连接酶、可溶性 T4 DNA 连接酶（NEB #M0202）、固定化 T4 DNA 连接酶（NEB #M0569）对 Lambda DNA- HindIII 消化产物（NEB #N3012）进行连接。结果显示，可溶性酶和固定化酶的连接效果一致。
图 2：固定化 T4 DNA 连接酶可重复使用
将固定化 T4 DNA 连接酶（NEB #M0569）置于快连缓冲液中，对 Nanopore 接头进行连续夹板连接，数据显示：经过 20 次连续连接反应后，酶活仍不受影响。
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该产品是 T5 核酸外切酶（NEB #M0363）的替代产品。
·双链 DNA 特异性核酸外切酶、单链 DNA 核酸内切酶
·从线性化或切刻双链 DNA 的 5’末端起始消化
·沿 5’→3’方向切割线性化或切刻双链 DNA
10,000 units/ml
· 从完全连接的环状双链 DNA 中，去除不完全连接产物
· 降解碱裂解质粒提取方法中产生的变性 DNA，提高 DNA 克隆效率
·降解质粒样品中污染的线性化和切刻 DNA
T5 核酸外切酶沿 5’→3’方向降解 DNA（1）。它既能从 5’末端起始消化，也能从线性或环状双链 DNA 的切刻或缺口处起始消化（1）。但不能降解超螺旋双链 DNA（2）。T5 核酸外切酶还具有单链 DNA 核酸内切酶活性。
·降解线性单链、双链 DNA 或切刻质粒 DNA，但对超螺旋质粒 DNA 不起作用
·去除碱裂解质粒提取过程中产生的变性 DNA（3）
·提高小提制备的cDNA 文库质粒的转染效率（4）
纯化自含有 T5 噬菌体 D15 基因质粒的 E.coli 菌株， D15 基因融合有 His 标签。
1 单位指在 CutSmart 反应缓冲液中，37℃ 条件下，每分钟引起 0.00032 A260 nm 变化所需要的酶量。单位活性检测条件请登陆 www.neb.com 或 www.neb-china.com
1X NEBuffer 4，37℃ 温育
T5 核酸外切酶经过严格的质控检测，确保该产品具有最高的活性和纯度。详情请登陆 www.neb.com 或 www.neb-china.com
1. Sayers, J.R. et al. (1991). Nucleic Acids Res. 19, 4127-4132.
2. Sayers, J.R. et al. (1990). J. of Biol. Chem. 265, 18311-18317.
3. Sayers, J.R. et al. (1996). Analytical Biochem. 241, 186-189.
4. Kiss-Toth, E. et al. (2001). Analytical Biochem. 288, 230-232.
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Hi-T4™ 耐热 DNA 连接酶是 T4 DNA 连接酶的耐热变体，该酶催化双链 DNA 或 RNA 上相邻的 5´ – 磷酸末端和 3´ – 羟基末端形成磷酸二酯键，经过改造其作用温度高于野生型 T4 DNA 连接酶。Hi-T4 耐热 DNA 连接酶可在温度高达 50ºC 时进行平末端和粘性末端的连接以及修复双链 DNA 、RNA 或
DNA / RNA 杂交链的单链切刻。
图1：Hi-T4 耐热 DNA 连接酶比普通 T4 DNA 连接酶热稳定性更好
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| Bme T110 I (Ava I) | ||||||
| 品牌 | Code No. | 产品名称 | 包装量 | 价格（元） | 说明书 | 数量 |
| Takara | 1207A | Bme T110 I (Ava I) | 500 U | ￥130 ￥98 |
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| Takara | 1207B (A × 5) | Bme T110 I (Ava I) | 500 U × 5 | ￥581 | |
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*红字为促销价格，促销时间: 2022年9月1日-2022年10月31日
| ■ 识别位点 | ||||||||||
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| ■ 制品内容 | ||||||||||
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| ■ 制品说明 | ||||||||||
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· 基于 T7 核酸内切酶的基因编辑检测
将引物设计在已完成基因编辑位点的两侧，PCR 产物变性、退火后会生成三种结构。其中一种结构能够被 T7 核酸内切酶 I 切割（多于1个碱基错配的双链 DNA），经电泳分离和片段分析后，估算出基因编辑效率。
关于该酶特性和产品应用的参考文献，请登陆 www.neb.com 或 www.neb-china.com 查询。
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合成长链或短链 RNA 转录产物
NEB HiScribe T7 高效 RNA 合成试剂盒可在体外高效合成多种类型的 RNA，包括内部标记的RNA 及共转录带帽结构 RNA。利用 T7 RNA 聚合酶，该试剂盒可以从少量样本得到高效转录，单次反应可获得高达 180 μg 的产物，或利用帽类似物合成带帽 RNA，产量高达 30-40 μg。利用该试剂盒得到的 RNA 适用于多种下游应用，如 RNA结构和功能研究、核酸酶生物化学研究、RNase保护分析探针、印迹杂交、反义 RNA 及 RNAi 实验、微阵列分析、显微注射、体外翻译和 RNA 疫苗等。
– T7 RNA 聚合酶混合液
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合成长链或短链 RNA 转录产物
NEB HiScribe T7 高效 RNA 合成试剂盒可在体外高效合成多种类型的 RNA，包括内部标记的RNA 及共转录带帽结构 RNA。利用 T7 RNA 聚合酶，该试剂盒可以从少量样本得到高效转录，单次反应可获得高达 180 μg 的产物，或利用帽类似物合成带帽 RNA，产量高达 30-40 μg。利用该试剂盒得到的 RNA 适用于多种下游应用，如 RNA结构和功能研究、核酸酶生物化学研究、RNase保护分析探针、印迹杂交、反义 RNA 及 RNAi 实验、微阵列分析、显微注射、体外翻译和 RNA 疫苗等。
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DNase I（无 RNase）
RNA 上样染料（2X）
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T4 多聚核苷酸激酶能够催化 ATP 的 γ-位磷酸基团转移到寡核苷酸链（双链或单链 DNA 或 RNA）的 5´ -羟基末端以及 3´ -单磷酸核苷上。T4 多聚核苷酸激酶（NEB #M0201）还具有 3´ 磷酸酶活性，将 3´ -磷酸基团从寡核苷酸的 3´ 磷酸末端、脱氧 3´ -单磷酸核苷和脱氧 3´ -二磷酸核苷上水解掉。经修饰后的酶（NEB #M0236）具有所有激酶的活性，但是缺失了 3´ 磷酸酶活性。
重组 E. coli 菌株，克隆有 T4 多聚核苷酸激酶基因。
达到最佳酶活力，需要新鲜缓冲液（在旧缓冲液中，由于氧化造成的 DTT 含量减少会降低酶活力）。
放射性标记反应：50 μl 反应体系中，用 1X T4 多聚核苷酸激酶反应缓冲液、50 pmol 的 γ-[32P] ATP 和 20 单位的酶 37℃ 温育 30 分钟可催化 1-50 pmol 的 5´ 末端磷酸化。[33P] ATP 可代替 [32P] ATP 作标记反应。
CTP、GTP、TTP、UTP、dATP 及 dTTP 均可替代 ATP 作为磷酸供体。
DNA 或 RNA 磷酸化反应（放射性和非放射性）操作流程请登陆 www.neb.com 或 www.neb-china.com。
要提高平齐末端或 5´ 凹陷末端的磷酸化效率，可在加入 T4 多聚核苷酸激酶前，先将 DNA 溶液于 70℃ 加热 5 分钟，然后冰上冷却，并加入 5%（w/v）的 PEG-8,000。
T4 多聚核苷酸激酶需要 ATP 才能发挥活性，但是为了适用于高活力的放射性标记反应，在随酶提供的反应缓冲液中不含 ATP。
T4 多聚核苷酸激酶经过严格的质控检测，确保该产品具有最高的活性和纯度。详情请登陆 www.neb.com 或 www.neb-china.com。
1 单位即 1 个 Richardson 单位，指 37℃条件下，30 分钟内催化 1 nmol 酸不溶性 [32P] 掺入所需要的酶量（1）。单位活性检测条件请登陆 www.neb.com 或 www.neb-china.com。
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携带 T4 RNA 连接酶 1 基因的 E. coli 菌株。
pCp 的连接需要加入终浓度为10%（v/v）的 DMSO。
10,000 或 30,000 units/ml。
