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PrimeScript™ Double Strand cDNA Synthesis Kit酶试剂盒Takara Clontech

发表于2026年1月5日由上海金畔生物科技有限公司

上海金畔生物科技有限公司代理Takara Clontech酶试剂盒全线产品，欢迎访问官网了解更多产品信息和订购。

PrimeScript™ Double Strand cDNA Synthesis Kit
品牌	Code No.	产品名称	包装量	价格（元）	说明书	数量
Takara	6111A	PrimeScript™ Double Strand cDNA Synthesis Kit	10 Rxns	￥1,582

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■ 制品内容 (10 次量)

PrimeScript RTase (200 U/μl) 10 μl RNase Inhibitor (40 U/μl) 10 μl Oligo(dT)18 Primer (1 μg/μl) 20 μl Random Primer (9mer) (0.3 μg/μl) 20 μl 5 × 1st Strand Synthesis Buffer 40 μl dNTP Mixture (10 mM each) 40 μl E. coli RNase H/E. coli DNA Ligase Mixture 20 μl E. coli DNA Polymerase I (20 U/μl) 20 μl 5 × 2nd Strand Synthesis Buffer 300 μl T4 DNA Polymerase (1 U/μl) 40 μl RNase free dH2O 600 μl × 2 Control RNA (1 μg/μl)* 5 μl   *【Control RNA】 本试剂盒中的Control RNA是以pSPTet3质粒 (质粒中的SP6启动子下游插入长约1.4 kb的pBR322来源的DNA片段，其DNA片段上含有抗四环素基因) 为模板由SP6 RNA聚合酶经体外转录而得到的。Control RNA (约1.4 kb) 是带有30个A碱基的具有poly (A)+尾的RNA。以这种RNA为模板合成的双链cDNA插入到适当的质粒载体中，如果确实为全长的cDNA，那这种质粒便可获得四环素抗性。

■ 制品说明

以原核细胞或者真核细胞的mRNA为模板合成cDNA后再进行cDNA的克隆，是分子生物学研究中的一种重要手段。利用这一技术可以容易地进行基因的构造解析和目的蛋白质的表达研究等。 一般来说，cDNA的合成以及cDNA文库的利用方法是：在合成与目的mRNA互补的双链cDNA后，将双链cDNA与细菌或病毒来源的载体进行重组，再将重组体导入细菌或真核细胞内进行复制、扩增cDNA，然后再对cDNA进行解析，或者再进一步进行体外转录或体外翻译等。 本试剂盒主要以来自植物和动物的poly (A)+RNA合成双链DNA 。 本试剂盒主要是以Gubler-Hoffman法为基础构建的，其原理见图1、图2，简要说明如下： 1. 在PrimeScript RTase的作用下，利用Oligo(dT)18 Primer或者Random Primer合成cDNA的第一条链 。 2. 使用E. coli RNase H使DNA-RNA杂合体中的RNA链形成单链切口 (Nick) 。在E. coli DNA Polymerase I 与E. coli DNA Ligase的作用下，RNA链被DNA链置换，合成cDNA的第二条链。 3. 使用T4 DNA Polymerase使双链cDNA片段末端平滑。   ■ cDNA合成原理图

图1 使用Oligo(dT)18 Primer时的cDNA合成

图2 使用Random Primer时的cDNA合成

■ 保存

-20℃。

■ Troubleshooting

如果实验不能正常进行，请按照说明书内容确认实验操作，检验以下几点： 1. Control RNA的使用 本试剂盒中的Control RNA (pSP Tet3 Poly(A)+ mRNA) 可以用于对照实验，并确认1st Strand cDNA或2nd Strand cDNA的合成反应是否顺利进行。 2. mRNA的纯度检测 为了能够获得更高的cDNA合成效率，尽可能使用完整的mRNA是非常重要的。在进行cDNA合成反应前，可以通过测定260 nm和280 nm的吸光度 (A260/A280在1.8～2.1是理想值) ，或使用琼脂糖凝胶电泳法对RNA的纯度进行检测。 3. RNase的污染 实验时要注意一定不能在mRNA的样品中混入RNase。实验用的器具、试剂等应尽可能进行高温灭菌处理。操作过程要佩戴手套。

PrimeScript™ High Fidelity RT-PCR Kit酶试剂盒Takara Clontech

发表于2025年11月18日由上海金畔生物科技有限公司

上海金畔生物科技有限公司代理Takara Clontech酶试剂盒全线产品，欢迎访问官网了解更多产品信息和订购。

PrimeScript™ High Fidelity RT-PCR Kit
品牌	Code No.	产品名称	包装量	价格（元）	说明书	数量
Takara	R022A	PrimeScript™ High Fidelity RT-PCR Kit	50 Rxns	￥1,351
Takara	R022B (A × 4)	PrimeScript™ High Fidelity RT-PCR Kit	50 Rxns × 4	￥4,866

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■ 制品内容 (Code No.: R022A : 50 次量*1)

PrimeScript RTase (for 2 step) 25 μl 5×PrimeScript Buffer 200 μl RNase Inhibitor (40 U/μl) 25 μl dNTP Mixture (10 mM each) 50 μl Oligo dT Primer (2.5 μM) 50 μl Random 6 mers (20 μM) 50 μl PrimeSTAR Max Premix (2×) 625 μl × 2 Control F-1 Primer*2 (20 μM) 10 μl Control R-1 Primer*3 (20 μM) 10 μl Positive Control RNA (2×105 copies/μl) 20 μl RNase Free dH2O 1 ml     *1 反转录反应20 μl、PCR反应50 μl，2 Step RT-PCR时可使用50次。 *2 Positive Control RNA用上游引物。 *3 Positive Control RNA用下游引物。   Limited Use Label License: [M54]

■ 制品说明

PCR (Polymerase Chain Reaction；聚合酶链式反应) 是一种体外扩增目的DNA的方法。虽然原理上PCR法是扩增DNA，RNA不能直接被扩增，但是经过反转录酶的作用将RNA反转录成cDNA后进行扩增 (RT-PCR)，PCR法便可应用于RNA的解析了。目前，此方法已广泛应用于RNA的构造解析、cDNA的克隆及RNA水平上的表达解析等多种领域。 PrimeScript High Fidelity RT-PCR Kit是一种对Total RNA及mRNA合成cDNA时具有高保真性的RT-PCR用试剂盒。 本试剂盒中使用的反转录酶是Takara改良的M-MLV新型反转录酶PrimeScript RTase，PCR时使用了对cDNA扩增时具有很高保真性的DNA聚合酶PrimeSTAR MAX DNA Polymerase。因PrimeSTAR MAX是兼具高保真性与高扩增效率的预混型酶，模板浓度适用范围广，可用于高保真性的cDNA克隆等重要反应中。 2 Step RT-PCR作为本试剂盒的标准操作流程，2 Step RT-PCR操作流程具有以下优点: 1. 能够高效率地获得高保真性的RT-PCR扩增产物。 2. 在42℃条件下反转录反应也可以使具有复杂结构的RNA进行良好的延伸。 3. 反应体系中Total RNA的使用范围非常宽广，便于使用。 本试剂盒含有反转录反应及PCR扩增反应所需要的全部试剂。并且，也可以进行1 Step RT-PCR反应。   ■ 保存 -20℃。 注意：PrimeSTAR MAX Premix (2×) 反复冻融25次后，已确认其活性没有发生改变，但要注意尽量避免冻融次数过多。

■ 试剂盒特点

使用2 Step RT-PCR标准操作流程时

RNA模板   适用于所有RNA        扩增片段大小   6 kb产物        反转录酶   PrimeScript RTase (反应温度在42℃)        DNA Polymerase   PrimeSTAR Max DNA Polymerase (2×premix)        RNase Inhibitor   必须使用 (Kit中含有) 1st strand cDNA合成用引物   Random 6 mers、Oligo dT Primer、特异性下游引物可供选择

使用1 Step RT-PCR操作流程时

RNA模板   适用于所有RNA        扩增片段大小   6 kb产物        反转录酶   PrimeScript RTase (反应温度50℃)        DNA Polymerase   PrimeSTAR Max DNA Polymerase (2×premix)        RNase Inhibitor   必须使用 (Kit中含有) 1st strand cDNA合成用引物   使用特异性下游引物 (PCR扩增反应用反义链引物)   (不可使用Random 6 mers及Oligo dT Primer)        操 作   在同一个反应管中可连续进行RT-PCR反应

PrimeScript™ II 1st Strand cDNA Synthesis Kit酶试剂盒Takara Clontech

发表于2025年10月24日由上海金畔生物科技有限公司

上海金畔生物科技有限公司代理Takara Clontech酶试剂盒全线产品，欢迎访问官网了解更多产品信息和订购。

PrimeScript™ II 1st Strand cDNA Synthesis Kit
品牌	Code No.	产品名称	包装量	价格（元）	说明书	数量
Takara	6210A	PrimeScript™ II 1st Strand cDNA Synthesis Kit	50 Rxns	￥1,372 ￥823
Takara	6210B (A × 4)	PrimeScript™ II 1st Strand cDNA Synthesis Kit	50 Rxns x 4	￥4,937 ￥2,962

*红字为促销价格，促销时间: 2022年9月1日-2022年10月31日

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■ 制品内容 (50 次量)

PrimeScript II RTase (200 U/μl) 50 μl 5×PrimeScript II Buffer 200 μl RNase Inhibitor (40 U/μl) 25 μl dNTP Mixture (10 mM each) 50 μl Oligo dT Primer (50 μM) 50 μl Random 6 mers (50 μM) 100 μl RNase Free H2O 1 ml

■ 制品说明

本制品是使用PrimeScript II RTase从Total RNA或Poly (A)+ RNA合成1st Strand cDNA的试剂盒。含有1st Strand cDNA合成所需的全部试剂。 以结构复杂的RNA或长链RNA为模板进行cDNA合成时，cDNA合成受到抑制的主要原因是RNA高级结构与反转录酶的非特异性结合。并且，由于反转录酶的错配引起的非特异性延伸，对RT-PCR或全长cDNA的合成非常不利。PrimeScript II RTase是对PrimeScript RTase进行进一步改良的反转录酶，本反转录酶可以很好地抑制RNA高级结构与反转录酶的非特异性结合。 本制品使用了PrimeScript II RTase，利用Oligo dT从PolyA开始进行延伸反应，使用标准反转录温度42℃，不仅能维持PrimeScript RTase原有的卓越的cDNA合成效率和cDNA合成速度，同时可以合成本底低、纯度高、完整性好的cDNA。另外，反转录反应液配制时所产生的非特异性延伸是抑制cDNA合成的主要原因，本制品能有效控制这一现象。反应液配制后，冰上放置直至反转录反应开始，不会发生抑制cDNA合成的现象。 合成的1st Strand cDNA可广泛应用于2nd Strand cDNA合成、杂交、PCR法扩增等。特别适用于全长cDNA文库制作、高纯度全长cDNA合成等。

■ 保存

-20℃。

PrimeScript™ II High Fidelity RT-PCR Kit酶试剂盒Takara Clontech

发表于2025年10月16日由上海金畔生物科技有限公司

上海金畔生物科技有限公司代理Takara Clontech酶试剂盒全线产品，欢迎访问官网了解更多产品信息和订购。

PrimeScript™ II High Fidelity RT-PCR Kit
品牌	Code No.	产品名称	包装量	价格（元）	说明书	数量
Takara	R023A	PrimeScript™ II High Fidelity RT-PCR Kit	50 Rxns	￥1,472
Takara	R023B (A × 4)	PrimeScript™ II High Fidelity RT-PCR Kit	50 Rxns × 4	￥5,297

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■ 制品内容 (50 次量*1)

PrimeScript II RT Enzyme Mix 50 μl 5×PrimeScript II Buffer 200 μl dNTP Mixture (10 mM each) 100 μl Oligo dT Primer (50 μM) 50 μl Random 6 mers (20 μM) 50 μl PrimeSTAR GXL for RT-PCR 100 μl 5×PrimeSTAR GXL Buffer 500 μl Control F-1 Primer*2 (20 μM) 10 μl Control R-1 Primer*3 (20 μM) 10 μl Positive Control RNA (2×105 copies/μl) 20 μl RNase Free dH2O 1ml     *1 反转录反应20 μl、PCR反应50 μl，2 Step RT-PCR时可使用50次。 *2 Positive Control RNA用上游引物。 *3 Positive Control RNA用下游引物。

■ 制品说明

PCR (Polymerase Chain Reaction；聚合酶链式反应) 是一种使用两种引物扩增目的DNA的方法。虽然原理上PCR法是扩增DNA，RNA不能直接被扩增，但是经过反转录酶的作用将RNA反转录成cDNA后扩增 (RT-PCR)，PCR法便可应用于RNA的解析了。目前，此方法已广泛应用于RNA的构造解析、cDNA的克隆及RNA水平上的表达解析等多种领域。 PrimeScript II High Fidelity RT-PCR Kit是一种对长链RNA及富含GC序列的RNA合成cDNA时具有高保真性的RT-PCR用试剂盒。 本试剂盒中使用的PrimeScript II反转录酶是改良型的PrimeScript RTase，可在合成长链cDNA时发挥效力，同时PCR时使用了对长链及富含GC序列的cDNA扩增时具有高保真性的DNA聚合酶PrimeSTAR GXL DNA Polymerase。因PrimeScript II RTase可很好地抑制由于引物错配引起的非特异性扩增，即使使用高浓度的Oligo dT Primer进行反转录反应也不会导致cDNA合成时的阻害作用，因此使用高浓度的RNA作为模板也可进行良好的反转录反应。 本试剂盒中使用PrimeScript II RTase与RNase Inhibitor的混合型PrimeScript II RT Enzyme Mix。另外，PrimeSTAR GXL DNA Polymerase克服了以往的高保真酶由于核酸浓度过高而存在的反应阻害性，在高浓度核酸存在条件下也能发挥其效力，可以在更宽广的RNA模板范围内获得cDNA扩增产物。 本试剂盒具有以下优点: 1. 能够从长链RNA及富含GC序列的RNA中获得错配率很低的cDNA扩增产物。 2. 在42℃条件下反转录反应也可以使具有复杂结构的RNA进行良好的延伸。 3. 反应体系中Total RNA的使用范围非常宽广，便于使用。 本试剂盒含有反转录反应及PCR扩增反应所需要的全部试剂。并且，也可以进行1 Step RT-PCR反应。

■ 各种引物的序列

引物名称 各引物序列 Random 6 mers Pd (N)6 Oligo dT Primer Takara独自开发的dT区域的序列 Control F-1 Primer 5′-CTGCTCGCTTCGCTACTTGGA-3′ Control R-1 Primer 5′-CGGCACCTGTCCTACGAGTTG-3′

■ Positive Control RNA

本试剂盒中的Control RNA是以pSPTet3质粒 (质粒中的SP6启动子下游插入长约1.4 kb的pBR322来源的DNA片段，DNA片段上含有抗四环素基因) 为模板由SP6 RNA聚合酶经体外转录而得到的。

图1. Control RNA：使用Control Primer时所能扩增的DNA片段

■ 保存

-20℃。

■ 使用注意

1. 当同时需要进行数次RT-PCR反应时，应先配制各种试剂的混合液 (Master Mix；其中包括RNase Free dH2O、Buffer、dNTP Mixture等)，然后再分装到每个反应管中。这样，可使所取的试剂体积更准确，减少试剂损失，避免重复分取同一试剂。同时也可以减少实验操作或实验之间产生的误差。 2. 使用PrimeScript II RT Enzyme Mix、PrimeSTAR GXL for RT-PCR等酶类产品时，应轻轻混匀，避免起泡；分取之前要小心地离心收集到反应管底部；由于酶保存液中含有50%的甘油，粘度高，分取时应慢慢吸取。 3. 酶制品应在实验前才从-20℃中取出，使用后也应立即放入-20℃保存。 4. 为了防止Positive Control RNA分解，应尽量避免反复冻融。有条件的实验室最好保存于-70℃～-80℃。 5. 分装试剂时务必使用新的枪头 (Tip)，以防止样品间污染。

PrimeScript™ Reverse Transcriptase酶试剂盒Takara Clontech

发表于2025年9月23日由上海金畔生物科技有限公司

上海金畔生物科技有限公司代理Takara Clontech酶试剂盒全线产品，欢迎访问官网了解更多产品信息和订购。

PrimeScript™ Reverse Transcriptase
品牌	Code No.	产品名称	包装量	价格（元）	说明书	数量
Takara	2680Q	PrimeScript™ Reverse Transcriptase	2,000 U	￥271
Takara	2680A	PrimeScript™ Reverse Transcriptase	10,000 U	￥1,162
Takara	2680B (A × 4)	PrimeScript™ Reverse Transcriptase	10,000 U × 4	￥4,165
Takara	2680C (A × 10)	PrimeScript™ Reverse Transcriptase	10,000 U × 10	￥9,833

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■ 制品内容 (Code No.: 2680A)

PrimeScript™ Reverse Transcriptase (200 U/μl) 10,000 U 5X PrimeScript Buffer 500 μl

■ 制品说明

PrimeScript Reverse Transcriptase是Takara公司依据M-MLV (Moloney Murine Leukemia Virus)来源的RTase开发的一种反转录酶。本酶具有很强的延伸能力，能够有效地合成1st-strand cDNA，即使对有复杂二级结构的RNA，在42℃条件下也能得到良好的反应效果，无需进行高温反转录反应，高温的反转录反应会导致RNA的降解。本酶适合于长链cDNA的合成及高比例的全长cDNA文库的构建等。   ■ 保存 -20℃。   ■ 起源 E. coli carrying the plasmid that encodes reverse transcriptase gene.   ■ 活性定义 以poly (rA)·oligo (dT)12-18 为模板/引物，在37℃的条件下，10分钟内掺入1 nmol [3H] dTTP所需要的酶量定义为1个活性单位(unit)。   ■ 用途 1. 1st-Strand cDNA的合成。 2. cDNA Probe的制备。 3. RT-PCR。