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OneTaq® 一步法 RT-PCR 试剂盒 货 号 #E5315S-NEB酶试剂 New England Biolabs

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相关产品

ProtoScript II cDNA 第一链合成试剂盒  

ProtoScript II 反转录酶
小鼠 RNase 抑制剂
Quick-Load 紫色 2-Log DNA Ladder
OneTaq 热启动 DNA 聚合酶

概述

OneTaq 一步法 RT-PCR 试剂盒为终点检测RNA 提供了高效、灵敏的检测方法。使用基因特异性的引物，将 cDNA 合成和 PCR 反应放在单管中完成，大大简化 RT-PCR 操作步骤。试剂盒包含三个优化的混合液：OneTaq 一步法酶混合液、OneTaq 一步法反应混合液和 OneTaq 一步法 Quick-Load 反应混合液。酶混合液包含 ProtoScriptII 反转录酶、小鼠 RNase 抑制剂和 OneTaq热启动 DNA 聚合酶。ProtoScript II 反转录酶是 MMuLV反转录酶的突变体，其降低 RNase H 活性且提高热稳定性。OneTaq 热启动 DNA 聚合酶是热启动 Taq DNA 聚合酶和一个有校读功能的 DNA 聚合酶混合液，无需优化就可得到高产量扩增产物。OneTaq 一步法 RT-PCR 试剂盒最长扩增长度达 9 kb。试剂盒配有两个优化的反应混合液：OneTaq 一步法反应混合液和 Quick-Load OneTaq 一步法反应混合液。反应混合液为 cDNA 合成和 PCR 扩增提供稳定的反应条件。独特的 Quick-Load OneTaq 一步法反应混合液包含染料，不仅在建立反应时起到指示作用，还可直接凝胶上样。总 RNA 或 mRNA 都可作为模板。单次反应能检测到低至 0.1 pg 的 GAPDH 基因。检测靶 RNA 长达 9kb。OneTaq 一步法 RT-PCR 试剂盒一次可以检测 2或 3 个靶基因.

OneTaq 一步法 RT-PCR 试剂盒组成：

– OneTaq 一步法酶混合液
– OneTaq 一步法反应混合液
– Quick-Load OneTaq 一步法反应混合液
– 无核酸酶污染的水
OneTaq® 一步法 RT-PCR 试剂盒 货 号 #E5315S
 
检测不同长度的 RNA 模板。在 50 μl 反应体系中加入
约 100 ng 来源于 Jurkat 总 RNA，按照标准操作流程进
行反应。目标序列大小为 Lane 1：0.7 kb、Lane 2：1.1
kb、Lane 3：1.9kb、Lane 4：2.3 kb、Lane 5：2.5 kb、Lane
6：5.5 kb、Lane 7：7.6 kb 和 Lane 8：9.3 kb。Marker M 为
Quick-Load 2-Log DNA ladder（NEB # M0469）

 
 

Luna® 探针一步法 RT-qPCR 试剂盒（无 ROX） 货 号 #E3007E-NEB酶试剂 New England Biolabs

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#E3007E
2,500 rxns
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特性

 使用探针法 qPCR，快速、灵敏、精准的对目标 RNA 进行检测和定量

 选择更简单
 ·适用于不需要 ROX 染料校正的仪器
 ·预混液试剂和便捷的操作的流程使反应体系的建立更便捷
 ·无干扰的可见示踪染料可避免加样错误
     
        产品性能优异

 · Luna® 系列产品均经过严格测试，以优化产品的特异性、灵敏度、准确性和重复性
 · 该产品对于不同来源的样品性能稳定
 · 通过与市面上其它 qPCR 和 RT-qPCR 试剂的综合评测，展现了 Luna 产品的卓越性能
 
        使用 Luna 温启动反转录酶优化您的 RT-qPCR 实验
 · 新型、热稳定反转录酶（RT）有效改善实验表现
 · 温启动反转录酶和热启动 Taq 酶共同提升反应特异性和功效

 

概述

 Luna 通用探针一步法 RT-qPCR 试剂盒（无 ROX）经过优化，适用于水解探针法的 RNA 实时定量。一步法 RT-qPCR 为 RNA 检测和定量提供了一种便捷、强大的方法。在同一管中，RNA 首先由反转录酶转化为 cDNA，然后使用 DNA 依赖型 DNA 聚合酶扩增 cDNA，从而可以进行 qPCR 定量。基于探针法的 qPCR / RT-qPCR 原理是利用聚合酶的 5´ → 3´ 外切酶活性，将淬灭的目标特异性探针切断发出荧光，并实时监测荧光值的增加，以测量 PCR 每个循环中的 DNA 扩增。在荧光信号显著超过背景荧光的位置，可以确定 Cq 值。Cq 值可用于评估两个或多个样品的靶基因相对丰度，通过已知稀释浓度样品的标准曲线，可对靶基因进行绝对定量。

 
在 Luna 通用探针一步法 RT-qPCR 试剂盒（无 ROX）中，热启动 Taq DNA 聚合酶与新型温启动反转录酶联合使用，利用可逆结合的核酸适配体抑制剂控制这两种酶的活性。这种温度依赖型激活可避免热循环之前的非特异性扩增，从而可以放心的在室温下建立反应体系。改造过的 Luna 温启动反转录酶的热稳定性比许多其它反转录酶更高，其最佳反应温度为 55℃。对于困难模板，可以升高反应温度至 60°C，且不会影响 Luna 性能。
 
注意：为确保 Luna 温启动反转录酶的完全激活，建议孵育温度不低于 50℃
 
Luna 通用探针一步法 RT-qPCR 试剂盒（无 ROX）浓度为 2×，包含热启动 Taq DNA聚合酶、dNTP 和所有必需的缓冲液成分。配方中不含校正染料，与不需要 ROX 校正的仪器兼容（如果需要 ROX 校正，可自行添加 ROX 染料）。反应预混液中的 dUTP 用于防止模板残留污染，非荧光可见示踪染料让反应的建立可视化。该可见染料与 qPCR 常用荧光基团的光谱没有重叠，因此不会干扰 qPCR 检测。
 
Luna 温启动反转录酶预混液的浓度为 20×，其中包含 Luna 温启动反转录酶以及用于防止 RNA 降解的小鼠 RNase 抑制剂（详情请见产品手册中的模板制备）。适用于各种 RNA 样品类型（总 RNA，poly（A）-RNA 等）和来源
 
图 1：Luna RT-qPCR 产品具有更高灵敏度、可重复性及更优异的表现。
 

 Luna® 探针一步法 RT-qPCR 试剂盒（无 ROX） 货 号 #E3007E
使用 Luna 通用探针一步法 RT-qPCR 产品检测人 GAPDH 基因，模板为 8 个 10 倍梯度稀释的
Jurkat 总 RNA（1 μg– 0.1 pg），每个浓度的样品做 8 个重复。实验按照试剂盒建议的操作流程进行，反应中包含一个 55℃ 温育 10 分钟的反转录步骤以便于 Luna WarmStart 反转录酶发挥作用。NTC = 无模板对照。
 
图 2：NEB 的 Luna RT-qPCR 产品在多重检测中功效强大
Luna® 探针一步法 RT-qPCR 试剂盒（无 ROX） 货 号 #E3007E
 使用 Luna Universal Probe One-Step RT-qPCR Kit 分别检测 GAPDH 基因、核糖体蛋白 L32g 和 PI-3 激酶相关的 SMG1 基因的表达情况。模板为 7 个分别 10 倍稀释的 Jurkat 总 RNA （1 μg – 1 pg），每个浓度的样品做 4 个重复。实验结果如上图所示，左边是叠加的结果，右边是每个基因单独的检测结果。无论是单重还是多重 qPCR，低拷贝的模板（SMG1）使用的引物浓度为 0.4 μM，高拷贝的模板（L32G 和 GAPDH）使用的引物浓度为 0.2 μM。单重 qPCR 可以直接比较，多重 qPCR 可以比较拷贝数的差异。NTC = 阴性对照
 
图 3：通过与市场上探针法 RT-qPCR 试剂相比，Luna 产品展现出更好的稳定性和特异性
Luna® 探针一步法 RT-qPCR 试剂盒（无 ROX） 货 号 #E3007E
使用市售的 RT-qPCR 试剂对 7 个靶标（丰度、长度和 GC 含量不同）进行测试。测试均根据产品说明书进行，数据来源于两个实验人员。实验结果对扩增效率、低起始量和缺乏无模板对照的扩增进行了评估（ΔCq = 无模板对照的平均 Cq – 最低起始量的平均 Cq）。此外，还评估了稳定性、可重复性、所有扩增曲线质量（质量分数）。柱状图展示了达到可接受的性能标准的目标百分比。图中展示了 NEB 和其它供应商的结果：Quanta，qScript™ XLT 1-Step RT-qPCR ToughMix®；ABI，TaqMan® RNA-to-Ct 1-Step Kit；QIAGEN，QuantiFast® Probe RT-PCR Kit；Bio-Rad，iTaq™ Universal Probes One-Step Kit；Promega®，GoTaq® Probe 1-Step RT-qPCR System。NEB 的 Luna 通用探针一步法 RT-qPCR 试剂盒*性能优于其它测试试剂。


*数据来源于 Luna 通用探针一步法 RT-qPCR 试剂盒（NEB #E3006）。Luna 通用探针一步法 RT-qPCR 试剂盒（无 ROX）（NEB #E3007）的性能与之相同

 

试剂盒组分

 以下试剂随产品提供

 

储存温度 （°C）

浓度

Luna® Probe One-Step Reaction Mix （No ROX）

-20

2 X

Luna® WarmStart® RT Enzyme Mix

-20

20 X

Nuclease-free Water

-20

  

储存温度

 -20°C

Luna® 通用一步法 RT-qPCR 试剂盒 货 号 #E3005E-NEB酶试剂 New England Biolabs

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Luna® 通用一步法 RT-qPCR 试剂盒 货 号 #E3005E Luna® 通用一步法 RT-qPCR 试剂盒 货 号 #E3005E Luna® 通用一步法 RT-qPCR 试剂盒 货 号 #E3005E Luna® 通用一步法 RT-qPCR 试剂盒 货 号 #E3005E Luna® 通用一步法 RT-qPCR 试剂盒 货 号 #E3005E

货 号
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#E3005E
2500次反应
20,609.00
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无
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#E3005L
500次反应
5,349.00
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无

#E3005S
200次反应
2,379.00
有
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有
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#E3005X
1000次反应
9,269.00
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相关产品

南极热敏 UDG

特性

Luna® 通用一步法 RT-qPCR 试剂盒 货 号 #E3005E

概述

一步法 RT-qPCR 为 RNA 检测和定量提供了方便、强大的方法。首先，RNA 在反转录酶的作用下被反转录为 cDNA，然后 cDNA 在 DNA 聚合酶的扩增作用下通过 qPCR 完成定量检测，而这一切都是在一管内完成。
Luna RT-qPCR 试剂盒包含一种新型的、应用核酸适配体技术设计的反转录酶，经基因工程改造提高其反应能力。Luna 温启动反转录酶及 Taq 热启动 DNA 聚合酶以及其试剂盒利用一种对温度敏感、可逆的适配体，在低于 45℃ 条件下，抑制其活性。因此，可以在室温下建立反应并抑制非特异性扩增。此外，温启动反转录酶具有更高的热稳定性，提升了在高温中的反应性能。
NEB Luna 通用一步法 RT-qPCR 试剂盒经过优化，可以对目标 RNA 序列进行染料法实时荧光定量检测，该试剂盒适用于具有 SYBR/FAM 通道的大部分 qPCR 仪器。
NEB Luna 通用探针一步法 RT-qPCR 试剂盒经过优化，使用水解探针法对目标 RNA 序列进行实时荧光定量检测。
Luna RT-qPCR 试剂盒中含有热启动 Taq DNA 聚合酶及独特校正染料，与多种 qPCR 仪器兼容，包括需要 ROX 校正的仪器，实验操作过程中不需要额外添加染料。预混液中包含 dUTP，qPCR 前使用NEB 的南极热敏 UDG 进行预处理以防止产物残留污染。预混液中还加有肉眼可见的蓝色染料，在向透明多孔 PCR 板中加样时起指示作用。快速、灵敏、精确的 Luna qPCR 产品必将成为您实时定
量实验的首选。

 

Luna 通用一步法 RT-qPCR 试剂盒组成：

Luna 通用一步法反应混合液
– Luna WarmStart 反转录酶混合液
– 无核酸酶污染的水

WarmStart® 荧光 LAMP/RT-LAMP 试剂盒 货 号 #E1700L-NEB酶试剂 New England Biolabs

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产品资料 – DNA聚合酶与扩增技术 – 等温扩增和链置换

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#E1700L
500次反应
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#E1700S
100次反应
2,609.00
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特性

·RNA 和 DNA 模板的 LAMP 扩增反应
·优化预混液，提高了 LAMP 反应的特异性和灵敏性
·独特的双热启动机制支持室温建立反应体系
·适用多种检测方法：荧光检测、浊度分析、变色检测和电泳检测等

概述

（LAMP）环介导等温扩增反应是一种核酸扩增技术，广泛用于目标 DNA 或 RNA 的检测。WarmStart LAMP 试剂盒（DNA & RNA）环介导等温扩增反应提供简单、一步解决方案，适用于检测 DNA 和 RNA 的 LAMP 和 RT-LAMP 实验。LAMP和 RT-LAMP 是常见的等温扩增技术，使用 LAMP 特异性引物（用户自己提供）和链置换聚合酶快速检测目标核酸。该试剂盒是 WarmStart LAMP 2X 预混液，包含 Bst 2.0 WarmStart DNA 聚合酶、WarmStartRTx 反转录酶和优化的 LAMP 缓冲液。经基因工程改造，显著提高了 Bst 2.0 WarmStart DNA 聚合酶和WarmStart RTx 反转录酶在 LAMP 和 RT-LAMP 实验中的扩增能力。同时提供荧光染料，用于实时定量荧光检测。WarmStart LAMP 试剂盒可以兼容多种检测方法，包括浊度检测、实时荧光检测（当使用LAMP 荧光染料时）和反应结束可视法。
 
WarmStart LAMP 试剂盒组成：
– WarmStart LAMP 2X 预混液
– LAMP 荧光染料（50X）

OneTaq® RT-PCR 试剂盒 货 号 #E5310S-NEB酶试剂 New England Biolabs

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OneTaq® RT-PCR 试剂盒 货 号 #E5310S OneTaq® RT-PCR 试剂盒 货 号 #E5310S OneTaq® RT-PCR 试剂盒 货 号 #E5310S OneTaq® RT-PCR 试剂盒 货 号 #E5310S

货 号
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#E5310S
30 次反应
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相关产品

小鼠 RNase 抑制剂
M-MuLV 反转录酶
OneTaq 热启动 2X 预混液（提供标准缓冲液）

特性

• 稳定的 RT-PCR 反应
• 便捷的预混液剂型
• OneTaq DNA 聚合酶对各种模板具有超强的扩增能力

概述

OneTaq RT-PCR 试剂盒含有两种强大的预混液，M-MuLV 酶预混液与 OneTaq 热启动 2X 预混液（提供标准缓冲液），可用于两步法的 RT-PCR 实验。这两种混合试剂可确保最快捷的建立反应和最稳定高效的 RT-PCR 反应，为 RT-PCR 反应的提供优秀的重复性和稳定性。
使用两种优化的混合液：M-MuLV 酶混合液和 MMuLV反应混合液合成第一链 cDNA。M-MuLV 酶混合液含 M-MuLV 反转录酶和小鼠 RNase 抑制剂，MMuLV反应混合液中包含 dNTP 和经过优化的缓冲液。该试剂盒还包括两种优化的反转录引物和无核酸酶污染的水。锚定的 Oligo-dT 引物 [d(T)23VN]迫使引物与 polyA 尾的起始端退火。经过优化的随机引物混合液能随机并持续性的与整个 RNA 模板配对，包括 mRNA 与无 polyA 尾的 RNA。

OneTaq RT-PCR 试剂盒组成：

 – 10X M-MuLV 酶混合液

– 2X M-MuLV 反应混合液
– OneTaq 热启动 2X 预混液（提供标准缓冲液）
– 随机引物预混液（60 μM）
– Oligo d(T)23VN 引物（50 μM）**
– 无核酸酶污染的水
OneTaq® RT-PCR 试剂盒 货 号 #E5310S
 
 
脾总 RNA 为模板合成第一链 cDNA，泳道 1、4 和 7
中加入 dT23VN，泳道 2、5 和 8 中加入随机 6 碱基引
物，泳道 3、6 和 9 为阴性对照反应。使用 OneTaq
热启动预混液分别对 beta-actin 基因、GAPDH 基因和
p532 基因进行 35 个循环的扩增，分别得到 1.5 kb 片
段、0.6 kb 片段和 5.5 kb 片段。Marker M 为 2-Log DNA
Ladder（NEB #N3200）。