λ-Hind III digest酶试剂盒Takara Clontech

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λ-Hind III digest
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Takara 3403 λ-Hind III digest 100 μg ¥230 λ-Hind III digest λ-Hind III digest λ-Hind III digest
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■ 制品内容
λ-Hind Ⅲ digest (0.5 μg/μl) 100 μg
6X Loading Buffer 1 ml
 
■ 制品说明
本制品是由Bacteriophage λcI857 Sam7 DNA用Hind III 酶切反应后配制而成的。
  片段 大小(bp)  
  A 23,130  
  B 9,416  
  C 6,557  
  D 4,361  
  E 2,322  
  F 2,027  
  G 564  
  H 125  
 
■ 保存
-20℃。
6X Loading Buffer开封后应于室温保存。
 
■ Agarose电泳图像示意图
 
λ-Hind III digest
 
■ 用途
本制品在琼脂糖凝胶电泳时作为DNA分子量大小的衡量标准,可与MEGALABEL (Code No.: 6070) 发生激酶交换反应而进行放射性标记。
 
■ 使用注意
λ DNA digest DNA Markers 的原始末端之间经常由COS末端*1结合在一起,在电泳前进行热处理 (60℃, 5分钟),能使Marker的电泳图像变得更为清晰。热处理前使用TE或TEN*2 buffer稀释以防止片段降解。
*1:片段A和D。
*2:TE buffer + 0.1 M NaCl
 
 

Human Stem Cell Derived Intestinal Epithelial Cells酶试剂盒Takara Clontech

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Human Stem Cell Derived Intestinal Epithelial Cells
品牌 Code No. 产品名称 包装量 价格(元) 说明书 数量
Cellartis Y50035 Cellartis® Intestinal Epithelial Cells (from ChiPSC18) Kit 1 Kit ¥20,754 Human Stem Cell Derived Intestinal Epithelial Cells Human Stem Cell Derived Intestinal Epithelial Cells Human Stem Cell Derived Intestinal Epithelial Cells
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来源于人类iPS细胞的小肠上皮细胞
(Intestinal Epithelial Cells Derived from Human Induced Pluripotent Stem Cells)
Cellartis Intestinal Epithelial Cells (from ChiPSC18) 是来源于人iPS细胞的小肠上皮细胞,具备肠上皮样特征,包括形成紧密连接、表达绒毛蛋白villin和肠转录因子CDX2。与人结肠癌Caco-2细胞系相比,该细胞具有更高的代谢酶CYP3A4和转运蛋白PEPT1的表达,为药物代谢吸收、药物相互作用评估提供更好的预测结果。
Cellartis Intestinal Epithelial Cells (from ChiPSC18) Kit 包括1管冻存的细胞Cellartis Intestinal Epithelial Cells (from ChiPSC18)和1个试剂盒Cellartis IEC Maturation Kit。解冻的Cellartis Intestinal Epithelial Cells (from ChiPSC18)使用Cellartis IEC Maturation Kit预先培养5天后,可用于各种检测。
 
■ 产品特点
· 解冻5天内细胞形成紧密连接,解冻5-8天后可用于检测
· 细胞高表达肠上皮标志物 (villin、CDX2等)
· 与Caco-2细胞相比,拥有更高的代谢酶CYP3A4和转运蛋白PEPT1的表达
· 细胞形成一个功能性的、可渗透的屏障,可用于预测药物在体内的渗透性和吸收
 
■ 产品应用
· 药物在小肠的吸收和代谢评价
· 药物研发中的ADME分析
· 药物渗透性检测
 
■ 产品组成
· 1 vial of~4.8 x 106 cells
· 1 Cellartis IEC Maturation Kit(IEC Maturation Basal Medium;IEC Supplement A;IEC Supplement B;IEC Supplement C;IEC Supplement D)
 
Human Stem Cell Derived Intestinal Epithelial Cells
 
实验例
Human Stem Cell Derived Intestinal Epithelial Cells
图1. 紧密连接蛋白ZO-1的免疫荧光染色结果显示,解冻后第5天,hiPSC-derived intestinal epithelial cells (IEC)细胞间形成紧密连接(如闭锁小带zonula occludens)。
 
Human Stem Cell Derived Intestinal Epithelial Cells
图2. 在解冻后第7天,与Caco-2细胞相比,hiPSC-derived intestinal epithelial cells (IEC)中高表达肠上皮标志物villin和CDX2。
 
Human Stem Cell Derived Intestinal Epithelial Cells
图3. 在解冻后第7天,与Caco-2细胞相比,hiPSC-derived intestinal epithelial cells (IEC)中高表达药物代谢酶CYP3A4和药物转运蛋白PEPT1。
 
 
■ 产品详情请点击:Human Stem Cell Derived Intestinal Epithelial Cells
 
 

基因编辑后克隆基因型确认酶试剂盒Takara Clontech

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基因编辑后克隆基因型确认
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Clontech 632611 Guide-it Genotype Confirmation Kit 100 Rxns ¥5,910 基因编辑后克隆基因型确认 基因编辑后克隆基因型确认 基因编辑后克隆基因型确认
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          基因敲除    
          基因编辑后克隆基因型确认 基因编辑后克隆基因型确认 基因编辑后克隆基因型确认
基因编辑后克隆基因型确认 基因编辑后克隆基因型确认 基因编辑后克隆基因型确认            
  基因敲入        
          基因编辑后克隆基因型确认        
 
 
基因编辑后克隆基因型确认
Guide-it Genotype Confirmation Kit
每个细胞中大部分基因都拥有两个等位基因。CRISPR/Cas9基因编辑可以对特定基因的一个或两个等位基因引入插入突变或缺失突变(indels)。Guide-it Genotype Confirmation Kit提供了一种简单的方法,用于确认特定克隆是一个等位基因突变(单等位基因),还是两个等位基因突变(双等位基因突变),或者是未发生变化(野生型)。实验操作中涉及到从Cas9 和single guide RNA (sgRNA)处理的细胞中扩增靶点序列。扩增出的序列被用在重组Cas9和相同的sgRNA的体外剪切反应。剪切产物通过琼脂糖凝胶电泳,确定基因型。
基因编辑后使用该试剂盒,加快了在大量克隆中筛选所需基因型的进程。每个试剂盒包含足够的试剂,用于100次提取、扩增和剪切反应。
 
产品特点:
· Cas9 和sgRNA体外剪切实验,用于确定单等位基因突变和双等位基因突变
· 包括高纯度的重组Cas核酸酶,用于体外剪切实验
· 流程化的操作步骤,使用来自于细胞的目的基因组DNA直接扩增
 
产品应用:
· CRISPR/Cas9 基因编辑
· CRISPR/Cas9 基因编辑后,单等位基因突变和双等位基因突变的确定
 
实验例:
基因编辑后克隆基因型确认
A图:使用Cas9和靶向C4BPB 基因的sgRNA对HEK 293细胞进行基因编辑。使用Guide-it Genotype Confirmation Kit对获得的15个单细胞克隆进行C4BPB位点的基因型鉴定。图中左侧的野生型 (WT),单等位基因 (M),双等位基因 (B)在分析中作为对照。结果表明克隆1,4,10,12是野生型;克隆2是单等位基因突变;以及克隆3,5-9,11和13-15是双等位基因突变。
B图:对A图中挑选的克隆进行测序分析。每个结果中,小写字母代表的是野生型(WT)序列。对于那些在A图中使用基因型鉴定方法确认的双等位基因突变的克隆,进一步测序分析表明克隆7是杂合子,克隆9和11是纯合子。在克隆2中,检测到3种不同的等位基因,可能是因为在HEK 293细胞系中出现拷贝数变异。
(数据来源于Takara Bio USA, Inc.)
 
 
Code No. 产品名称
632611   Guide-it Genotype Confirmation Kit
 
产品详情请点击:基因编辑后克隆基因型确认
 
 

Human Stem Cell Markers酶试剂盒Takara Clontech

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Human Stem Cell Markers
品牌 Code No. 产品名称 包装量 价格(元) 说明书 数量
Takara M221 Anti-Human Oct4, Monoclonal 0.1 mg Inquire Human Stem Cell Markers Human Stem Cell Markers Human Stem Cell Markers
Takara M222 Anti-Human Lin28, Monoclonal 0.1 mg Inquire Human Stem Cell Markers Human Stem Cell Markers Human Stem Cell Markers
Takara M223 Anti-Human Sox2, Monoclonal 0.1 mg Inquire Human Stem Cell Markers Human Stem Cell Markers Human Stem Cell Markers
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人干细胞标志物抗体
(Human Stem Cell Markers)
通过向体细胞引入“发育全能性相关因子”可以获得诱导干细胞(iPS)。例如,通过在人类体细胞内异位表达(ectopic expression)Oct4, Sox2, Lin28以及 Nanog,可以诱导细胞获取发育全能性(pluripotency)(Yu et al., 2007)。针对这些因子的抗体,可以使用在Western blot实验或是免疫组织化学实验中。
 
■ 产品应用
· Western blot analysis under reducing conditions
· Immunocytochemistry
 
Human Stem Cell Markers
 
参考文献:
Yu, J. et al. (2007) Induced Pluripotent Stem Cell Lines Derived from Human Somatic Cells. Science 318:1917–1920.
 

Vaccinia Capping Enzyme酶试剂盒Takara Clontech

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Vaccinia Capping Enzyme
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Takara 2460A Vaccinia Capping Enzyme 500 U ¥1,575 Vaccinia Capping Enzyme Vaccinia Capping Enzyme Vaccinia Capping Enzyme
Takara 2460B(A×4) Vaccinia Capping Enzyme 2000 U ¥5,984 Vaccinia Capping Enzyme Vaccinia Capping Enzyme Vaccinia Capping Enzyme
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■ 制品内容(Code No. 2460A)Vaccinia Capping Enzyme
Vaccinia Capping Enzyme (10 U/μl) 500 U  
10× Capping Buffer 100 μl  
S-adenosylmethionine (SAM) (32 mM) 100 μl  
GTP (10 mM) 50 μl  
 
■ 制品说明
在真核生物中,帽结构对于mRNA的稳定,出核转运以及翻译起到重要作用。Vaccinia Capping Enzyme是一种来源于牛痘病毒的加帽酶,在RNA的5’末端(5’-三磷酸RNA)加上7-甲基鸟苷酸结构(Cap 0)。本酶由D1和D12两个亚基组成,具有RNA三磷酸酶,、鸟苷酸转移酶和鸟嘌呤甲基转移酶这三种酶活性。该酶与本产品中包含的试剂一起使用(10X Capping Buffer, S-adenosylmethionine (SAM), GTP)可以在体外高效合成mRNA的完整Cap0结构。此外,这种酶也可以与mRNA Cap 2’-O-Methyltransferase(Code No. 2470A/B)一起使用,一步反应高效地在RNA 5’末端紧邻帽结构(Cap0)的第一个核苷酸的 2’-O 上添加甲基基团,形成带有 Cap 1 结构的 mRNA。
 
■ 用途
1. Cap0 mRNA的制备
2. 标记5’末端mRNA
 
■ 保存
-20℃
 
■ 来源
Escherichia coli carrying plasmids containing the genes for vaccinia virus capping enzyme
 
■ 性质
分子量:约98 kDa和33 kDa(异二聚体)
 
■ 活性定义
在37℃下1小时内将10 pmol的[α-32P]GTP结合到RNA转录物中所需的酶量定义为1个活性单位(U)。
 
■ 使用注意
1. 混匀时,不要剧烈振荡。
2. 如果试剂、试管或微量移液器吸头被RNase污染,就会导致RNA产量减少或降解。在实验过程中应采取预防措施以避免RNase污染,如戴一次性手套以及使用专用于RNA实验的试管及微量移液器吸头。