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牛痘病毒加帽系统 货 号 #M2080S-NEB酶试剂 New England Biolabs

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牛痘病毒加帽系统 货 号 #M2080S 牛痘病毒加帽系统 货 号 #M2080S

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相关产品

 
 

小鼠 RNase 抑制剂

特性

 体内或体外翻译前 mRNA 的加帽
 标记 mRNA 5´ 末端

概述

牛痘病毒加帽体系利用牛痘病毒加帽酶及其它组份，将 7-甲基鸟苷帽结构（Cap 0）加到 RNA 的 5´ 末端。在真核生物中，该类末端帽结构影响到 mRNA 的稳定、转运和翻译。使用酶促反应为 RNA 加帽是一种简单有效的方法，对用于体外转录、转染和显微注射的 RNA，能改善其稳定性和翻译能力。另外，反应中所用到的标记 GTP 还能提供一种便捷的标记方法，将 5´ 末端带有三磷酸的任何 RNA 进行标记。
牛痘病毒加帽酶由两个亚基（D1 和 D12）组成，具有三种酶活性（D1 亚基具有 RNA 三磷酸酶和鸟苷转移酶活性；D12 亚基具有鸟嘌呤甲基转移酶活性），所有这些活性都是添加一个完整的 Cap 0 结构，即 m7Gppp (5´ ) N 所必需的。加帽反应不仅高效而且方向正确，不像共转录会添加上一些帽类似物。 

来源

携带牛痘病毒（WR）加帽酶基因的 E. coli 菌株。 

反应条件

1X 加帽反应缓冲液
[50 mM Tris-HCl（pH 8.0 @ 25℃），5 mM KCl，1 mM DTT，1 mM MgCl2]，37℃ 温育。 

提供的试剂

牛痘病毒加帽酶
加帽缓冲液（10X）
GTP 溶液（10 mM）
SAM 溶液（32 mM） 

质保声明

无单链或双链 DNA 核酸外切酶、核酸内切酶和 RNase 污染。 

单位定义

1 单位指 37℃ 条件下，1 小时内将 10 pmol (α-32P) GTP 掺入到一条 80 个核苷酸的转录产物上所需要的酶量。 

浓度

10,000 units/ml。 

参考文献

有关该产品特性和应用的参考文献请联系我们。  

5´ App DNA/RNA 热稳定连接酶 货 号 #M0319L-NEB酶试剂 New England Biolabs

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5´ App DNA/RNA 热稳定连接酶                              收藏

5´ App DNA/RNA 热稳定连接酶 货 号 #M0319L 5´ App DNA/RNA 热稳定连接酶 货 号 #M0319L 5´ App DNA/RNA 热稳定连接酶 货 号 #M0319L

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相关产品

通用 miRNA 克隆接头

特性

 二代测序文库构建中连接单链 DNA 和腺苷化的 DNA 接头
 构建 small RNA 二代测序文库时，可在较高温度下连接预腺苷化的接头和 RNA 

概述

5´ App DNA/RNA 热稳定连接酶来自嗜热碱甲烷杆菌（Methanobacterium thermoautotrophicum），是 RNA 连接酶催化亚基的赖氨酸点突变体。该酶连接时不需要 ATP，但需要 5´ 预腺苷化的接头才能将其连接到 RNA 或单链 DNA 的 3´ OH 末端。该酶也可催化 3´ 端被 2´ -O-甲基化的 RNA 和 5´ 预腺苷化接头的连接反应。连接反应的最适反应温度为 60-65℃。连接酶的点突变体不能使 RNA 或单链 DNA 的 5´ 端磷酸腺苷化，因此降低非特异性的串联和环化。

该酶能在 65℃ 反应，此温度下降低了 RNA 二级结构对连接反应的制约。

来源

重组 E. coli 菌株，携带有 His 标签的 5´ AppDNA/RNA 连接酶基因。 

反应条件

1X NEBuffer 1 [10 mM Bis-Tris-Propane-HCl (pH 7.0 @ 25℃)，10 mM MgCl2，1 mM DTT]，65℃ 温育。 

质保声明

无单链和双链 DNA 核酸内切酶、核酸外切酶、 RNase 和磷酸酶污染。
 

浓度

20 μM。 

使用注意事项

建议连接单链 DNA 和预腺苷酸化接头时，使用含镁离子的 NEBuffer 1。 

参考文献

有关该产品性质及应用的相关文献请登陆  

E. coli Poly(A) 聚合酶 货 号 #M0276L-NEB酶试剂 New England Biolabs

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E. coli Poly(A) 聚合酶                              收藏

E. coli Poly(A) 聚合酶 货 号 #M0276L E. coli Poly(A) 聚合酶 货 号 #M0276L E. coli Poly(A) 聚合酶 货 号 #M0276L

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相关产品

5´ -三磷酸腺苷（ATP）
小鼠 RNase 抑制剂

特性

 用 5´ 三磷酸化虫草素（cordycepin 5´-triphosphate）或 ATP 标记 RNA
 为 RNA 添加 Poly(A) 尾，用于克隆或亲和纯化
 提高转染至真核细胞中 RNA 的翻译效率 

概述

E. coli Poly(A) 聚合酶催化由 ATP 转化成的 AMP 添加到 RNA 3´ 端，该反应不依赖模板的存在。 

来源

重组 E. coli 菌株，携带克隆自大肠杆菌的 Poly(A) 聚合酶基因。 

反应条件

1X Poly(A) 聚合酶反应缓冲液
[50 mM Tris-HCl (pH 7.9 @ 25℃)，250 mM NaCl，10 mM MgCl2]，加入 1 mM ATP，37℃ 温育。
热失活：65℃ 20 分钟。 

随酶提供

10X Poly(A) 聚合酶反应缓冲液
10 mM ATP 

质保声明

无 DNase、RNase 和磷酸酶污染。 

单位定义

1 单位指 20 μl 反应体系中 37℃ 条件下， 10 分钟催化 1 nmol 的 AMP 掺入 RNA 所需要的酶量。单位活性检测条件请登陆 www.neb-china.com 或

浓度

5,000 units/ml。 

参考文献

有关该产品特性和应用的参考文献请联系我们。 www.neb-china.com 或  

T4 RNA 连接酶 2，截短型 货 号 #M0242L-NEB酶试剂 New England Biolabs

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T4 RNA 连接酶 2，截短型                              收藏

T4 RNA 连接酶 2，截短型 货 号 #M0242L T4 RNA 连接酶 2，截短型 货 号 #M0242L T4 RNA 连接酶 2，截短型 货 号 #M0242L T4 RNA 连接酶 2，截短型 货 号 #M0242L

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相关产品

通用 miRNA 克隆接头

特性

 将预腺苷化的 DNA 或 RNA 序列标签连接到任何 RNA 3´ 末端
 将单链腺苷化引物连接至小 RNA 上，用于 cDNA 文库构建
 将单链腺苷化引物连接至 RNA 上，用于链特异 cDNA 文库构建 

概述

T4 RNA 连接酶 2，截短型（T4 Rnl2 截短型）可特异性地将 5´ 端预腺苷化的 DNA 或 RNA连接到 RNA 3´ 末端。该酶连接时不需要 ATP，但需要预腺苷化底物。 T4 Rnl2 截短型的表达来自E. coli 质粒，该质粒编码 T4 RNA 连接酶 2 基因的前 249 个氨基酸。与全长的 T4 RNA 连接酶 2 不同， T4 Rnl2 截短型不能将底物的 5´ 末端腺苷化，因此无法将 RNA 或 DNA 的 5´ 磷酸末端连接到 RNA的 3´ 端。该酶即 Rnl2（1-249），可用于 microRNA 克隆中接头连接的优化，因为此酶只能利用腺苷化的引物，因此可以降低连接背景。
 

来源

携带 T4 RNA 连接酶 2， 截短型基因的重组 E. coli 菌株。 

反应条件

1X T4 RNA 连接酶反应缓冲液[50 mM Tris-HCl (pH 7.5 @ 25℃)，10 mM MgCl2，1 mM DTT]，25℃ 温育。热失活：65℃ 20 分钟。 

随酶提供的试剂

10X T4 RNA 连接酶反应缓冲液
50% PEG 8000 

质保声明

无单链和双链 DNA 核酸内切酶、外切酶、 RNase 以及磷酸酶的污染。
 

单位定义

200 单位指 20 μl 反应体系中， 25℃ 条件下， 1 小时将 80% 的 31-mer RNA 连接到预腺苷化 17-mer DNA 末端[miRNA 通用性克隆接头（NEB#S1315） ]末端所需的酶量。单位活性检测条件见www.neb-china.com 或 www.neb.com。
 

浓度

200,000 units/ml。 

参考文献

有关该产品特性和应用的参考文献请联系我们。 www.neb-china.com 或  

mRNA 帽结构 2′-O-甲基转移酶 货 号 #M0366S-NEB酶试剂 New England Biolabs

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mRNA 帽结构 2′-O-甲基转移酶                              收藏

mRNA 帽结构 2'-O-甲基转移酶 货 号 #M0366S mRNA 帽结构 2'-O-甲基转移酶 货 号 #M0366S

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#M0366S
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特性

 提高 RNA 的翻译效率
 改善 mRNA 在显微注射和转染后的表达 

概述

该酶能在 RNA 5´ 末端紧邻帽结构的第一个核苷酸的 2´ -O 上添加甲基基团。利用 S-腺苷甲硫氨酸（SAM）作为甲基供体，使带帽 Cap O 甲基化为 Cap 1。 

来源

纯化自携带牛痘病毒 mRNA 帽结构 2´ –O-甲基转移酶基因的 E. coli 菌株。 

反应条件

1X 加帽缓冲液
[50 mM Tris-HCl，5 mM KCl，1 mM DTT，1 mM MgCl2，(pH 8.0 @ 25℃)]，37℃ 温育。 

单位定义

1 单位是指在 37℃ 的条件下，1 小时内将 10 pmol 80 nt 的带帽 RNA 转录子甲基化所需酶量。 

浓度

50,000 units/ml。 

参考文献

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