Takara IVTpro™ mRNA Synthesis System酶试剂盒Takara Clontech

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Takara IVTpro mRNA Synthesis System
品牌 Code No. 产品名称 包装量 价格(元) 说明书 数量
Takara 6141 Takara IVTpro mRNA Synthesis System 1 Kit ¥4,973 Takara IVTpro™ mRNA Synthesis System Takara IVTpro™ mRNA Synthesis System Takara IVTpro™ mRNA Synthesis System
Takara 6143 Cloning Kit for mRNA Template 10 Rxns ¥1,531 Takara IVTpro™ mRNA Synthesis System Takara IVTpro™ mRNA Synthesis System Takara IVTpro™ mRNA Synthesis System
Takara 6144 Takara IVTpro T7 mRNA Synthesis Kit 20 Rxns ¥3,442
¥2,926
Takara IVTpro™ mRNA Synthesis System Takara IVTpro™ mRNA Synthesis System Takara IVTpro™ mRNA Synthesis System

*红字为促销价格,促销时间: 2022年9月1日-2022年10月31日

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一款合成高质量、高产量mRNA的体外转录(IVT)试剂盒
·通过体外转录(IVT)合成带有Cap结构和Poly(A)序列的mRNA;
·优化的T7 RNA聚合酶用于IVT反应,RNA合成效率高、产量大;
·独立包装的NTPs,方便修饰NTPs替换,且不影响mRNA产量;
·采用In-Fusion无缝克隆,轻松构建模板质粒DNA;
·使用氯化锂(LiCl)溶液进行RNA纯化,可立即进行下游应用。
 
■ 制品说明
Takara IVTpro mRNA Synthesis System是能够简便、高效合成带有Cap结构和Poly(A)序列的mRNA的体外转录试剂盒。它包含以下两种制品:
① Cloning Kit for mRNA Template(Code No. 6143):
本试剂盒用于将模板DNA无缝克隆到预线性化载体(包含在本试剂盒中)中构建用于体外转录反应的模板质粒。预线性化载体中包含T7 启动子、转录起始序列 (AGG)、5′-UTR(非编码区)、3′-UTR、和105-base Poly(A) 序列。试剂盒还包含用于将目标DNA无缝克隆到预线性化载体的In-Fusion Snap Assembly Master Mix和FLuc对照片段(包括15 bp,3′ In-Fusion sequence;FLuc CDS;和15 bp,5′ In-Fusion sequence)。
 
② Takara IVTpro T7 mRNA Synthesis Kit(Code No. 6144):
本试剂盒以含有 T7 启动子序列的双链 DNA 为模板,使用优化的高效T7 RNA聚合酶,通过体外转录可合成大量mRNA。除此以外,还包含用于IVT反应后消化模板DNA的DNase I和用于纯化mRNA的氯化锂 (LiCl) 溶液。真核细胞翻译蛋白质需要RNA的5’端有Cap结构,本试剂盒配合使用CleanCap Reagent AG(TriLink公司的Cap类似物)可以高效制备具有Cap结构的mRNA。另外,试剂盒包含单独的NTPs,方便优化或使用修饰NTPs如假尿苷替换,而且不会明显降低mRNA的产量。使用本产品,每次反应(20 μl 反应体系)可以合成高达 200μg 或更多的RNA。可以根据需要放大反应体系,即使使用10倍(200μl)反应体系也不影响mRNA预期产量(请参考说明书实验例)。※Cap类似物不包含在本产品中,请另外准备CleanCap Reagent AG (TriLink公司)。
 
Takara IVTpro™ mRNA Synthesis System
 
使用Takara IVTpro 系统合成 mRNA时,通过In-Fusion方法克隆目标基因(GOI)后,使用不会在 Poly (A) 下游留下额外序列的限制性内切酶切割是非常重要的。强烈建议使用 Hind III(Code No. 1060A/B)对用于mRNA合成的质粒进行线性化(请参考说明书和载体图谱信息)。
 
■ 用途
· 用于体外转录(IVT)模板质粒DNA的构建
· 配合使用TriLink公司的CleanCap Reagent AG体外转录合成mRNA
· 使用其它Cap类似物如Anti-Reverse Cap Analog (ARCA)合成带帽结构的mRNA
(* 请注意,使用ARCA时,需要设计与本产品不同的模板序列。)
· 用于长链非编码RNA(Long non-coding RNA)的合成
· 向导RNA(guide RNA)的合成
· siRNA前体的合成
· 用于RT-qPCR的RNA标准模板的合成
· RNA探针的合成
 
■ 制品内容
Cloning Kit for mRNA Template(Code No. 6143)(10次反应)
 
产品组分 体积量 件数/Kit
1. Linearized Template Vector (50 ng/μl)  10 μl 1
2. FLuc Control Fragment (100 ng/μl) *1  10 μl 1
3. 5X In-Fusion Snap Assembly Master Mix  20 μl 1
 
*1:由 In-Fusion 序列 (15 bp) + FLuc-CDS + In-Fusion 序列 (15 bp) 组成的对照片段 (1,683 bp)
 
Takara IVTpro T7 mRNA Synthesis Kit(Code No. 6144)(20次量、20 μl反应体系)
 
产品组分 体积量 件数/Kit
1. 10X Transcription Buffer  40 μl 1
2. 10X ATP  40 μl 1
3. 10X CTP  40 μl 1
4. 10X GTP  40 μl 1
5. 10X UTP  40 μl 1
6. 10X Enzyme Mix  40 μl 1
7. Nuclease-Free Water  1 ml 3
8. DNase I  80 μl 1
9. Lithium Chloride Precipitation Solution  600 μl 1
10. Positive Control Template (FLuc) (0.5 μg/μl)2  10 μl 1
 
*2:由T7 启动子 + 5’UTR + FLuc-CDS + 3’UTR + Poly (A) 序列组成的线性质粒DNA。
 
■ 实验操作注意事项
· 本制品是通过IVT反应合成RNA的试剂。如果双链DNA模板、试剂、试管、微量移液器吸头或反应中使用的其他材料混入RNase污染,会导致使用本试剂盒获得的RNA收量降低或片段化。在反应中使用专用试管和微量移液器吸头,并戴上新的一次性手套以防止RNase污染。
· 10X Enzyme Mix 不要剧烈搅拌。
· 使用前将Lithium Chloride Precipitation Solution在室温下融化。融解后,如果充分混合后仍可见沉淀,可37℃保温溶解。如果仍有沉淀物,请直接使用,对性能没有影响。
 
■ 保存
-20℃
 
■ 试剂盒以外的其它必要试剂(主要试剂)
· CleanCap Reagent AG(TriLink公司)
· 修饰NTPs
· 限制酶(Hind III等等)
 
■ 序列信息 FLuc Control Fragment
序列信息(fasta格式):点此进行下载
该序列与Positive Control Template(FLuc)中2,685~4,367(1,683 bp)的序列相同。
 
■ 序列信息 Linearized Template Vector
序列信息(fasta格式):点此进行下载
Linearized Template Vector(2,921 bp)
 
Takara IVTpro™ mRNA Synthesis System
 
NeoR/KanR: 53~847
Ori: 1,172~1,760
CMV enhancer: 1,861~2,240
CMV promoter: 2,241~2,444
 
T7 promoter sequence: 2,489~2,505
Transcription start sequence (AGG): 2,506~2,508
5’UTR: 2,509~2,559
Upstream In-Fusion region (15 bp): 2,545~2,559
 
In-Fusion cloning site (linearized site): between 2,559 and 2,560
 
Downstream In-Fusion region (15 bp): 2,560~2,574
3’UTR: 2,560~2,672
Poly(A)105: 2,673~2,777
Restriction enzyme sites for plasmid linearization: 2,776~2,801(Hind III, Xho I, Sal I, Avr II, BamH I)
 
Poly(A) Forward Primer: 2,570~2,589
Poly(A) Reverse Primer: 2,863~2,882
 
<T7启动子后序列的详细信息>
Takara IVTpro&trade; mRNA Synthesis System
 
■ 载体信息 Positive Control Template(FLuc)
序列信息(fasta格式):点此进行下载
 
Positive Control Template(FLuc)(4,574 bp)
Takara IVTpro&trade; mRNA Synthesis System
 
NeoR/KanR: 193~987
Ori: 1,312~1,900
CMV enhancer: 2,001~2,380
CMV promoter: 2,381~2,584
 
T7 promoter sequence: 2,629~2,645
Transcription Start Sequence (AGG): 2,646~2,648
5’UTR: 2,649~2,699
FLuc CDS: 2,700~4,352
3’UTR: 4,353~4,465
Poly(A)105: 4,466~4,570 (FLuc Control Fragment-derived sequence: 2,685~4,367)
 
Linearized site by Hind III (5′ overhangs) : 4,569 (4,573)
Takara IVTpro&trade; mRNA Synthesis System
 
<T7启动子后序列的详细信息>
Takara IVTpro&trade; mRNA Synthesis System
 
 

mRNA Cap 2’-O-Methyltransferase酶试剂盒Takara Clontech

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mRNA Cap 2’-O-Methyltransferase
品牌 Code No. 产品名称 包装量 价格(元) 说明书 数量
Takara 2470A mRNA Cap 2′-O-Methyltransferase 2,500 U ¥684 mRNA Cap 2’-O-Methyltransferase mRNA Cap 2’-O-Methyltransferase mRNA Cap 2’-O-Methyltransferase
Takara 2470B(A×4) mRNA Cap 2′-O-Methyltransferase 10,000 U ¥2,601 mRNA Cap 2’-O-Methyltransferase mRNA Cap 2’-O-Methyltransferase mRNA Cap 2’-O-Methyltransferase
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■ 制品内容(Code No. 2470A)mRNA Cap 2’-O-Methyltransferase
mRNA Cap 2’-O-Methyltransferase (50 U/μl) 2,500 U  
10× Capping Buffer 100 μl  
S-adenosylmethionine (SAM) (32 mM) 100 μl  
 
■ 制品说明
mRNA Cap 2’-O-Methyltransferase是一种来源于牛痘病毒的甲基化酶,该酶特异性地甲基化5’端具有7-甲基鸟苷酸结构的Cap-0 RNA第一个核苷酸的2’-O,从而产生Cap 1 RNA。
已知Cap-1 RNA有助于抑制体内先天免疫应答并促进翻译。该产品还包括反应缓冲液和作为甲基供体的S-adenosylmethionine (SAM),可以把Cap 0 高效的转化成Cap 1 RNA。此外,和Vaccinia Capping Enzyme (Code No. 2460A/B)一起使用,可以经一步反应把未加帽的RNA(5’-三磷酸RNA)加帽生成Cap 1 RNA。
 
■ 用途
Cap 1 mRNA的制备
 
■ 保存
-20℃
 
■ 来源
Escherichia coli carrying a plasmid containing the gene for vaccinia virus mRNA cap 2’-O-methyltransferase
 
■ 性质
分子量:约40 kDa
 
■ 活性定义
37℃条件下,1小时内甲基化10 pmol Cap 0 RNA所需要的酶量定义为1个活性单位(U)。
 
■ 使用注意
1. 混匀时,不要剧烈振荡。
2. 如果试剂、试管或微量移液器吸头被RNase污染,就会导致RNA产量减少或降解。在实验过程中应采取预防措施以避免RNase污染,如戴一次性手套以及使用专用于RNA实验的试管及微量移液器吸头。
 
 

操作简便的单细胞mRNA分析酶试剂盒Takara Clontech

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操作简便的单细胞mRNA分析
品牌 Code No. 产品名称 包装量 价格(元) 说明书 数量
Clontech 634436 SMART-Seq® HT Kit 480 Rxns ¥118,883 操作简便的单细胞mRNA分析 操作简便的单细胞mRNA分析 操作简便的单细胞mRNA分析
Clontech 634437 SMART-Seq® HT Kit 96 Rxns ¥30,910 操作简便的单细胞mRNA分析 操作简便的单细胞mRNA分析 操作简便的单细胞mRNA分析
Clontech 634438 SMART-Seq® HT Kit 192 Rxns ¥57,064 操作简便的单细胞mRNA分析 操作简便的单细胞mRNA分析 操作简便的单细胞mRNA分析
Clontech 634439 SMART-Seq® HT Lysis Components 96 Rxns ¥1,199 操作简便的单细胞mRNA分析 操作简便的单细胞mRNA分析 操作简便的单细胞mRNA分析
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操作简便的单细胞mRNA分析 延伸     操作简便的单细胞mRNA分析 操作简便的单细胞mRNA分析
操作简便的单细胞mRNA分析 操作简便的单细胞mRNA分析
         
操作简便的单细胞mRNA分析
 
 
SMART-Seq HT Kit & SMART-Seq HT Plus Kit:自动化友好型的单细胞mRNA全长分析
· 自动化友好型 - 兼容自动化工作站,更少的时间分析更多的样本
· 高灵敏度 - 可以从单细胞或10 pg总RNA起始(起始量:1-100个细胞或10 pg-1 ng总RNA)
· 高质量的RNA-Seq数据 - 保留全长基因信息,低rRNA比率,高基因检出数,有效扩增GC-rich转录本
· 单管操作流程 - SMART-Seq HT PLUS Kit包含完整的cDNA合成和文库构建流程,分别在单管中进行,减少样品损失与混淆,降低手动操作误差
· 增强的测序性能 - SMART-Seq HT PLUS Kit整合双端特殊index(UDI),即便多个文库pool后用高通量型illumina测序仪(如Novaseq)分析,也能得到正确结果
· 更高的文库产量 - 更便于使用高通量型illumina测序仪测序(如Novaseq),或保存剩余的文库用于多次测序
 
产品说明
SMART-Seq HT Kit(SS-HT)和SMART-Seq HT Plus Kit(SS-HT PLUS)均兼容自动化移液工作站,采用oligo(dT)引物,支持1-100个细胞或10 pg-1 ng总RNA起始。
SS-HT试剂盒是从第4代的SMARTer Ultra Low试剂(SMART-Seq v4)发展而来的,具有简化的操作流程,将原有的反转录和PCR扩增步骤整合为一步,且不影响性能。细胞分离或RNA提取后,仅通过一步RT-PCR扩增双链cDNA,然后进行纯化完成操作。cDNA合成可在4小时内完成,整个文库构建方案可在2天内完成。而且,SMART-Seq HT试剂盒具有与SMART-Seq v4试剂盒相同的灵敏度和可重复性。核心的SMART技术,是一种对全转录组研究,以及包括细胞内剪接位点,可变剪接研究的非常强大的工具,且可以检测全长基因。 Oligo(dT)可以从高品质总RNA(RIN> 8)或完整细胞中特异性扩增mRNA。 通过采用LNA技术,提升了模板转换的效率与基因检出数等性能。
SS-HT PLUS Kit在包含核心的cDNA合成试剂基础上,同时整合了Takara Bio Group专利性的文库构建技术(U.S. Patents 7,803,550, 8,399,199, 8,728,737, 9,598,727
, 10,196,686, 10,208,337, and 11,072,823及单次使用的双端特殊index(UDI),提供完整的单细胞cDNA合成到文库构建的实验体验。建库试剂中包含片段化酶,以实现对合成cDNA的片段化,接着利用特别的茎环形接头构建高品质illumina文库。在建库阶段,单管两步操作、过程中无需纯化、2 h即可建成文库!
 
SS-HT Kit:流程缩短、性能不变!
操作简便的单细胞mRNA分析
图1 SMART-Seq HT的技术流程
 
操作简便的单细胞mRNA分析
图2 SMART-Seq v4和SMART-Seq HT工作流程的比较
 
SMART-Seq HT(右)是由SMART-Seq v4方法(左)经过改进而来的一个手动操作时间更短的高通量工作流程。使用FACS方法获得单细胞,SMART-Seq HT试剂盒只需3个操作步骤即可制备cDNA,而SMART-Seq v4试剂盒需要6步。SMART-Seq HT工作流程的一个重要步骤是一步RT-PCR,即使用一步RT-PCR缓冲液,进行高效的反转录和PCR扩增cDNA的过程。
 
操作简便的单细胞mRNA分析
图3 使用SMART-seq v4 kit和SMART-Seq HT kit从FACS分选的293T细胞中获得的高重复性的基因表达数据
 
使用SMART-Seq v4试剂盒(SSv4_1-SSv4_12)和SMART-Seq HT试剂盒( HT_1-HT_9)(上图)从21个293T细胞单细胞制备文库,并对每个细胞获得的基因表达性进行评估。层次聚类热图展示了所有细胞之间的Euclidean distances,并显示从0.74到0.97的Pearson相关性。不仅用相同试剂盒制备的细胞之间可以观察到非常高的相关性,而在两种试剂盒之间的相关性也非常高。这些数据表明,SMART-Seq HT的工作流程与SMART-Seq v4相比,在基因表达分析中没有显著的偏差。
 
SS-HT PLUS Kit:不只是一个Kit,更是完整的单细胞RNA-Seq建库体验!
为了使单细胞cDNA合成、文库构建实验“一步”到位,我们全新推出了SS-HT PLUS Kit。
操作简便的单细胞mRNA分析
 
操作简便的单细胞mRNA分析
 
从高灵敏度、高重复性的cDNA合成出发,构建更高品质illumina文库
 
Takara科学家从10 pg小鼠脑total RNA起始,采用SMART-Seq HT Kit完成cDNA合成。随后分别使用SS-HT Plus Kit中的SMART-Seq Library Prep Kit模块与市面上较常用的A公司试剂盒构建文库,并比较性能差异。
 
操作简便的单细胞mRNA分析
(比较数据来源于Takara Bio USA, Inc.)
 
从测试数据中可以看出,SS-HT PLUS Kit所建文库的产量是A公司Kit产量的5倍,而更高的文库产量更适于高通量型Illumina测序仪,如Novaseq。
 
两种方法所建文库随后用Nextseq 500完成测序,并对TPM(Transcripts per million)≥0.1的基因数进行统计。SS-HT PLUS文库能比A公司文库多检出10%的基因,从同样的cDNA起始能“捕获”更全的信息!
 
 
产品详情请点击:操作简便的单细胞mRNA分析
 
更多实验数据:
SS-HT Kit
SS-HT Plus Kit
 
延伸阅读:
单细胞NGS解决方案
 
 

Orm1 mRNA,Rat 品牌:Nippon Gene


Orm1 mRNA,Rat

品牌:Nippon Gene
CAS No.:
储存条件:-80℃
纯度:
产品编号

(生产商编号)

等级 规格 运输包装 零售价(RMB) 库存情况 参考值

318-06911

10 ul 咨询


* 干冰运输、大包装及大批量的产品需酌情添加运输费用


* 零售价、促销产品折扣、运输费用、库存情况、产品及包装规格可能因各种原因有所变动,恕不另行通知,确切详情请联系上海金畔生物科技有限公司。

未甲基帽 G(5′)ppp(5′)G 货 号 #S1407L-NEB酶试剂 New England Biolabs

上海金畔生物科技有限公司代理New England Biolabs(NEB)酶试剂全线产品,欢迎访问官网了解更多产品信息和订购。

产品资料 – RNA 试剂 – RNA 合成

未甲基帽 G(5′)ppp(5′)G                              收藏

货 号
规 格
价 格(元)
北京库存
上海库存
广州库存
成都库存
苏州库存

#S1407L
5 μmol
5,629.00

#S1407S
1 μmol
1,409.00

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概述

体外实验的初始阶段,绝大多数真核生物 mRNA 5´ 端 m7G 帽结构可促进翻译。对于绝大多数
RNA,帽结构都可提高 RNA 的稳定性,降低其对核酸外切酶降解的敏感性,并促进 mRNA 起始复合体的形成。在真核生物无细胞蛋白合成系统的情况下,5´ 端帽结构甚至可使原核 mRNA 的翻译效率与真核 mRNA 一样高。另外,还发现在真核生物靶 RNA 的剪切过程同样需要帽结构。

应用

• 用 T7、SP6 和 T3 RNA 聚合酶共转录加帽
• 合成未甲基化 G 加帽的 RNA