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038-23221
"Phos-tag™ 系列磷酸化蛋白新方法!
Phos-tag™是一种能与磷酸离子特异性结合的功能性分子。它可用于磷酸化蛋白的分离(Phos-tag™ Acrylamide)、Western Blot检测(Phos-tag™ Biotin)、蛋白纯化 (Phos-tag™Agarose)及质谱分析MALDI-TOF/MS (Phos-tag™ Mass Analytical Kit)。
◆Phos-tag™ 的基本结构:
特点:
与-2价磷酸根离子的亲和性和选择性高于其它阴离子
在pH 5-8的生理环境下生成稳定的复合物
◆原理:
◆相关应用:
◆相关产品:产品名称 用 途 Phos-tag™ Acrylamide 分离: SDS – PAGE 分离不同磷酸化水平的蛋白 SuperSep Phos-tag™ 分离: 预制胶中含有50μM Phos-tag™ Acrylamide Phos-tag™ Biotin 检测: 代替 Western Blot 检测中的磷酸化抗体 Phos-tag™ Agarose 纯化: 通用柱层析,纯化磷酸化蛋白 Phos-tag™ Mass
Analytical Kit分析: 用于质谱 MALDI-TOF/MS 分析,提高磷酸化分子的检测灵敏度 SuperSep Phos-tag™预制胶即开即用!
phos-tag™由日本广岛大学研究生院医齿药学综合研究科医药分子功能科学研究室开发。
SuperSep Phos-tag™是一种预制胶,预先加入了50 μmol/L的Phos-tag™ Acrylamide,打开包装即可直接使用。预制胶中含有锌作为金属离子,在中性凝胶缓冲液中保存稳定性很好,得到的结果条带也很整齐。
板大小 100 x 100 x 3 (mm) 凝胶大小 90 x 85 x 1 (mm) 孔数 13 17 孔容积 30 μL 25 μL Phos-tag™浓度 50 μmol/L 丙烯.酰胺浓度 10%、12.5%、15% 和17% ZnCl2浓度 100 μmol/L
注意:
这款产品为预制胶,适合用于“EasySeparator”电泳槽。
使用预染的maker会使条带弯曲。推荐使用WIDE-VIEW Prestained Protein Size Marker III。
在使用产品之前,参考“SuperSep Ace”或者其它常用的SDS-PAGE摸索样品的电泳条件。
进行Western blotting之前,需要用EDTA先处理再进行转膜。
优点、特色:
u 即开即用。
u 预制胶使用安全。
u 可长期保存(6个月)。
u 操作与普通SDS-PAGE一样。
◆案例、应用:
电泳条件:30 mA(恒电流), 60分钟
样品:5 ug/Lane α-酪蛋白(含磷酸化与去磷酸化α-酪蛋白)(产品编号038-23221)
普通SDS-PAGE只观察到一条条带,而Phos-tag™ SDS-PAGE里可见α-酪蛋白磷酸化和α-酪蛋白去磷酸化两条
条带。
样品缓冲液:Sample Buffer Solution (2ME+) (X4) (产品编号191-13272)
电泳缓冲液:SDS-PAGE 缓冲液, pH8.5(产品编号192-16801)
染色:QUICK CBB PLUS(产品编号174-00553)
P10%(左) : SuperSep Phos-tag™ (50 μmol/L), 10%, 13well
P15%(中) : SuperSep Phos-tag™ (50 μmol/L), 15%, 13well
A15%(右) : SuperSep™Ace, 15%, 13well (不含Phos-tag™)
◆相关产品:
产品编号 产品名称 规 格 058-07681 EasySeparator <配套电泳槽> 1 套 230-02461 Wide-View Prestained Protein Size Marker III (11~245kDa) 500 μL (200 次) 038-23221 α-Casein, from Bovine Milk, Dephosphorylated 1 mg
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