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诺如病毒
品牌	Code No.	产品名称	包装量	价格（元）	说明书	数量
Takara	RR250A	TaKaRa qPCR Norovirus (GI/GII) Typing Kit	50 Rxns	￥2,695
Takara	RR250B (A × 5)	TaKaRa qPCR Norovirus (GI/GII) Typing Kit	50 Rxns × 5	￥13,071

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慢病毒浓缩
品牌	Code No.	产品名称	包装量	价格（元）	说明书	数量
Clontech	631231	Lenti-X Concentrator	100 ml	￥2,984 ￥2,387
Clontech	631232	Lenti-X Concentrator	500 ml	￥10,205 ￥8,164

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提高100倍病毒滴度，无需超速离心
· 操作简便，只需与慢病毒上清液混合后离心即可 · 无需繁琐的超速离心操作 · 浓缩倍数可高达100倍，回收率可达到90%
Lenti-X浓缩试剂是一款无需超速离心，可简单、快速且高效地浓缩慢病毒上清液的试剂。其操作流程非常简单，只需要将慢病毒上清液与Lenti-X浓缩试剂相混合，孵育一段时间后，采用标准离心机进行离心，离心后去除上清，以1/10 - 1/100原体积液体重悬沉淀。通过以上操作可将病毒滴度最高提高约100倍。Lenti-X浓缩试剂可用于浓缩包含Clontech Lenti-X慢病毒系统制备的慢病毒在内的大多数慢病毒上清液，浓缩规模可按照需求扩大或者缩小。
■ Lenti-XTM Concentrator操作流程
■ Lenti-X Concentrator与超速离心方法比较
特征 Lenti-X Concentrator 超速离心 易于扩展 是 否 特殊仪器 不需要 需要超速离心机 所需时间 ~1 hr 4 hr至过夜 易用性 ＋＋＋＋ ＋ 回收率 >90% >90%
■ 简便的慢病毒浓缩方法（操作方法请观看视频）
■ 关联资料
Lenti-X Concentrator资料： 点击图片下载
产品详情请点击：

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慢病毒纯化
品牌	Code No.	产品名称	包装量	价格（元）	说明书	数量
Clontech	631233	Lenti-X Maxi Purification Kit	2 Preps	￥3,287
Clontech	631234	Lenti-X Maxi Purification Kit	5 Preps	￥5,474

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慢病毒纯化

Lenti-X Maxi Purification Kit可从原始的培养上清液中纯化出高纯度和高产量的病毒。其基于重力流柱的实验操作，快速、简单、有效并且优于基于过滤器的纯化系统，后者会损坏易于损伤的慢病毒颗粒，从而降低产量。重力流柱会轻柔固定培养上清液中的病毒颗粒，未被结合的物质则会在洗涤步骤穿透柱子流出。

为什么要纯化慢病毒？ 慢病毒纯化能去除可能对转导实验产生不利影响的细胞污染物。原始的培养上清液中包含残留的质粒DNA，不明感染和转导抑制剂，细胞和血清蛋白质，以及具有高度免疫原性的病毒蛋白质、核酸和病毒片段。在使用慢病毒作用于敏感靶细胞或体内应用之前，有必要通过纯化慢病毒来去除这些污染物。

简便的操作流程。 我们的慢病毒纯化柱是即用型预装柱，只需将10X结合缓冲液加入到上清液样品（9-45 ml）中，然后再将混合物添加至纯化柱即可。样品和缓冲液借助重力穿过树脂，就像是基于纯化柱的质粒制备。在两次洗涤纯化柱的过程中，杂质被去除掉了，纯化后的慢病毒回收在3 ml洗脱缓冲液中。

防止假转导。 使用纯化后的慢病毒储液还可以防止假转导，因为在感染的过程中，原始病毒上清液中高水平重组蛋白质会被转移至靶细胞中。而靶细胞假转导会掩盖慢病毒转导所预期的de novo表达。

更高的产量和纯度。 温和的纯化程序是维持病毒感染性和产生60-80％优良慢病毒产量的关键所在。基于阴离子交换的膜系统回收率要低得多，通常低于20％。而与基于过滤器的系统相比，Lenti-X纯化柱获得的病毒纯度更高。事实上，纯化后的Lenti-X样品中可检测到的蛋白质含量很低，而基于过滤器纯化的病毒液则含有与病毒共同纯化出来的高水平外源蛋白质。

■ Overview

· 与其他纯化技术相比，获得的纯度和产量更高 · 浓缩病毒至多10倍 · 简便而温和的重力流操作流程 · 专用收集架可与试剂盒 (Code No. 631245)一同购买，也可单独购买 (Code No. 631246) · 实现更高效、更一致的慢病毒转导，收获更健康的靶细胞 · 有效去除转导抑制剂和细胞毒性污染物

■ 实验例

图1 慢病毒纯化过程。基于Lenti-X重力柱的纯化方法（结合、清洗、洗脱），这种方法操作简便、有效，并且与基于针筒式过滤器的纯化方法相比能够更好地保存病毒。

图2. 使用Clontech慢病毒纯化试剂盒可获得高产量和高纯度。使用我们的高滴度慢病毒包装系统制备并纯化慢病毒。Panel A. 为了确定病毒产量，通过qRT-PCR（RNA拷贝数）或流式细胞仪/荧光（IFU）测定纯化前和纯化后的慢病毒滴度，展示数据为七组实验的平均值。Panel B. 使用Lenti-X或基于过滤器的纯化系统（Vendor M和Vendor S）制备等量的纯化后慢病毒（1×105 IFU）进行SDS-PAGE和银染。与其它两种基于过滤器系统所制备的样品相比，在相同IFU的情况下Lenti-X样品含有明显更少的污染蛋白质。

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整合的慢病毒拷贝数测定
品牌	Code No.	产品名称	包装量	价格（元）	说明书	数量
Clontech	631239	Lenti-X Provirus Quantitation Kit	200 Rxns	￥6,511

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Lenti-X Provirus Quantitation Kit可以让您快速确定转导细胞混合或克隆群体中存在的整合慢病毒(前病毒)的拷贝数。该试剂盒包括用于测定前病毒拷贝数的引物、基因组DNA纯化试剂盒、制备标准曲线的对照DNA，以及基于TB Green检测的qPCR试剂（可检测200次）。

正确确定慢病毒的有效滴度

通过量化已整合到靶细胞核DNA中的慢病毒的数量，您可以正确确定慢病毒上清液原液的真实滴度（即有效滴度）。利用这个信息，可以用正确的MOI（感染复数）去感染细胞，让您能够预测将有多少病毒基因组会整合到细胞中。您也可以使用此方法来校准其他滴定方法，那些方法可以测量包装细胞上清液中的病毒含量，但不能测定靶细胞中的功能性整合滴度。

一致并且可预测的慢病毒转基因表达

当使用慢病毒载体将基因导入至靶细胞时，表达水平会随着MOI的增加而增加，因为更多的慢病毒拷贝会整合到细胞核DNA中。同样，对于给定的病毒制剂，在不同目标细胞系中的有效MOI可能会因各个细胞系对慢病毒感染的敏感度不同而不同。Lenti-X Provirus Quantitation Kit可让您评估任何细胞系中的转导结果，而不受表达水平的影响，并且可确保不同细胞系间或使用不同病毒制剂间转导水平一致。

■ 概述/特点

· 预测不同实验间一致的转基因表达水平 · 比较多个细胞系的转导数据 · 确保不同实验或不同细胞系之间的拷贝数一致 · 包含纯化10种基因组DNA和进行200 次TB Green qPCR反应试剂*

* 此试剂盒中包含的引物旨在扩增HIV-1基因组包装信号附近的的保守区域。这些引物与Takara Bio销售的所有慢病毒载体和常用的慢病毒载体相兼容。如果不能确定该试剂盒是否与您的载体相兼容，请将您的载体序列发送至service，我们的技术支持团队将很乐意为您确认引物的兼容性。

■ 实验例

图1. 测定靶细胞中整合的慢病毒拷贝数。使用快速qPCR方法确定前病毒含量。

图2. 慢病毒前病毒拷贝数会影响转导细胞中转基因的表达水平。使用AcGFP1慢病毒表达载体分别以高或低MOI感染HT1080细胞。感染后72小时，对细胞进行嘌呤霉素药物选择。一周后，选择稳定转导的细胞克隆进行扩增和表达分析。使用流式细胞术确定AcGFP1的表达水平，并使用Lenti-X Provirus Quantitation Kit确定基因组DNA中的前病毒含量。该图所示数据为低拷贝数（> 3; n = 8）和高拷贝数（> 9; n = 7）实验组两组合并数据。结果表明，前病毒含量越高，表达水平也就越高。

图3. 等量病毒感染细胞时，不同类型细胞获得的前病毒（整合的慢病毒）拷贝数不同。 用等量的单一慢病毒原液（100 μl）感染HT1080、HeLa和HEK 293细胞。感染后72小时，使用嘌呤霉素对细胞进行药物选择。一周后，使用Lenti-X Provirus Quantitation Kit确定稳定转导细胞群的前病毒拷贝数。

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