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T4 RNA 连接酶 2，截短型 货 号 #M0242L-NEB酶试剂 New England Biolabs

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产品资料 – RNA 试剂 – RNA 连接酶和修饰酶

T4 RNA 连接酶 2，截短型                              收藏

T4 RNA 连接酶 2，截短型 货 号 #M0242L T4 RNA 连接酶 2，截短型 货 号 #M0242L T4 RNA 连接酶 2，截短型 货 号 #M0242L T4 RNA 连接酶 2，截短型 货 号 #M0242L

货 号
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#M0242L
10,000 units
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#M0242S
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通用 miRNA 克隆接头

特性

 将预腺苷化的 DNA 或 RNA 序列标签连接到任何 RNA 3´ 末端
 将单链腺苷化引物连接至小 RNA 上，用于 cDNA 文库构建
 将单链腺苷化引物连接至 RNA 上，用于链特异 cDNA 文库构建 

概述

T4 RNA 连接酶 2，截短型（T4 Rnl2 截短型）可特异性地将 5´ 端预腺苷化的 DNA 或 RNA连接到 RNA 3´ 末端。该酶连接时不需要 ATP，但需要预腺苷化底物。 T4 Rnl2 截短型的表达来自E. coli 质粒，该质粒编码 T4 RNA 连接酶 2 基因的前 249 个氨基酸。与全长的 T4 RNA 连接酶 2 不同， T4 Rnl2 截短型不能将底物的 5´ 末端腺苷化，因此无法将 RNA 或 DNA 的 5´ 磷酸末端连接到 RNA的 3´ 端。该酶即 Rnl2（1-249），可用于 microRNA 克隆中接头连接的优化，因为此酶只能利用腺苷化的引物，因此可以降低连接背景。
 

来源

携带 T4 RNA 连接酶 2， 截短型基因的重组 E. coli 菌株。 

反应条件

1X T4 RNA 连接酶反应缓冲液[50 mM Tris-HCl (pH 7.5 @ 25℃)，10 mM MgCl2，1 mM DTT]，25℃ 温育。热失活：65℃ 20 分钟。 

随酶提供的试剂

10X T4 RNA 连接酶反应缓冲液
50% PEG 8000 

质保声明

无单链和双链 DNA 核酸内切酶、外切酶、 RNase 以及磷酸酶的污染。
 

单位定义

200 单位指 20 μl 反应体系中， 25℃ 条件下， 1 小时将 80% 的 31-mer RNA 连接到预腺苷化 17-mer DNA 末端[miRNA 通用性克隆接头（NEB#S1315） ]末端所需的酶量。单位活性检测条件见www.neb-china.com 或 www.neb.com。
 

浓度

200,000 units/ml。 

参考文献

有关该产品特性和应用的参考文献请联系我们。 www.neb-china.com 或  

T4 RNA 连接酶 2，截短型 K227Q 货 号 #M0351L-NEB酶试剂 New England Biolabs

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T4 RNA 连接酶 2，截短型 K227Q                              收藏

T4 RNA 连接酶 2，截短型 K227Q 货 号 #M0351L T4 RNA 连接酶 2，截短型 K227Q 货 号 #M0351L T4 RNA 连接酶 2，截短型 K227Q 货 号 #M0351L

货 号
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#M0351L
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相关产品

通用 miRNA 克隆接头

 
 

特性

 将预腺苷化的 DNA 或 RNA 序列标签连接到任何 RNA 3´ 末端
 将腺苷化单链引物连接至小 RNA 上，用于 cDNA 文库构建
 将腺苷化单链引物连接至 RNA 上，用于链特异性 cDNA 文库构建 

概述

 
 

T4 RNA 连接酶 2，截短型 KQ（T4 Rnl2tr KQ）能特异性将 5´ 末端预腺苷化的 DNA 或 RNA 连接到RNA 的 3´ OH 末端。反应无需 ATP，但需预腺苷化接头。

T4 Rnl2tr KQ 是 T4 RNA 连接酶 2，截短型（NEB#M0242）的双点突变体。 K227 的突变降低了赖氨酰腺苷化。由于降低了 T4 Rnl2tr 从接头将腺苷基团转移到 RNA 5´ 磷酸基的活性， K227Q 可以减少 T4 Rnl2tr 非特异性的连接（串联体和环）。在 T4 Rnl2tr K227Q 中进一步突变 R55K，提高了酶的连接活性，使其与野生型 T4 Rnl2tr 连接活性水平一致。

因为不再使用 ATP，而改用预腺苷化接头，同时降低赖氨酰腺苷化酶的活性，所以连接反应的背景可以降至最低。该酶已用于二代测序 Small RNA的文库构建中，优化了接头的连接过程。

 

来源

重组 E. coli 菌株，携带有 MBP 融合表达的质粒，该质粒克隆有含编码 T4 RNA 连接酶 2 的前249 个氨基酸序列。 T4 Rnl2tr K227Q 是将 227 位的赖氨酸突变为谷氨酸。 T4 Rnl2tr KQ 分别在 55 和 位置进行了突变，精氨酸突变为赖氨酸、赖氨酸突变为谷氨酰胺。
 
 

反应条件

1X T4 RNA 连接酶反应缓冲液[50 mM Tris-HCl (pH 7.5 @ 25℃)，10 mM MgCl2，1 mM DTT]，25℃ 温育。
热失活：65℃ 20 分钟。 

随酶提供的试剂

10X T4 RNA 连接酶反应缓冲液
50% PEG 8000 

质保声明

无单链和双链 DNA 核酸内切酶、外切酶、 RNase 以及磷酸酶的污染。
 

单位定义

200 单位指 20 μl 反应体系中， 25℃ 条件下， 1 小时能将 80% 的 31-mer RNA 连接到预腺苷化 17-mer DNA 末端 [miRNA 通用克隆接头（NEB#S1315）] 所需的酶量。单位活性检测条件请登陆 www.neb-china.com 或 www.neb.com。
 

浓度

200,000 units/ml。 

参考文献

有关该产品特性和应用的参考文献请联系我们。  

核酸外切酶 VIII，截短型 货 号 #M0545L-NEB酶试剂 New England Biolabs

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产品资料 – DNA修饰酶与克隆技术 – 核酸酶

核酸外切酶 VIII，截短型                              收藏

核酸外切酶 VIII，截短型 货 号 #M0545L 核酸外切酶 VIII，截短型 货 号 #M0545L 核酸外切酶 VIII，截短型 货 号 #M0545L 核酸外切酶 VIII，截短型 货 号 #M0545L 核酸外切酶 VIII，截短型 货 号 #M0545L

货 号
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#M0545L
5,000 units
3,509.00
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#M0545S
1,000 units 
909.00
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特性

 降解线性双链 DNA，保留环状双链DNA

概述：

 核酸外切酶 VIII,截短型是大肠杆菌核酸外切酶 VIII 活性结构域的基因工程酶。其从 5´ →3´ 方向切除线性双链 DNA 的 5´ 末端核苷酸。该酶不降解超螺旋双链 DNA 和环状单链 DNA。

来源

 来源于 E. coli，克隆自含核酸外切酶 VIII 基因活性区域的基因工程质粒。

反应条件：

 1X NEBuffer 4 反应缓冲液。37℃ 温育。热失活：70℃ 加热 15 分钟。

质保声明：

核酸外切酶 VIII，截短型经过严格的质控检测，确保该产品具有最高的活性和纯度。详情请登陆 www.neb.com 或 www.neb-china.com。

单位定义：

1 单位指在 50 μl 含超声处理的 0.15mM [3H]-标记双链 DNA 的1X NEBuffer 4 反应缓冲液体系中，37℃ 条件下，30 分钟内能催化双链 DNA产生 1 nmol 酸溶性脱氧核苷酸所需的酶量。单位活性检测条件请登陆 www.neb.com 或 www.neb-china.com。

浓度：

 10,000 units/ml

参考文献：

关于该酶性质和产品应用的参考文献，请登陆 www.neb.com 或 www.neb-china.com。