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Tth 核酸内切酶 IV 货 号 #M0294S-NEB酶试剂 New England Biolabs

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产品资料 – DNA修饰酶与克隆技术 – DNA 修复蛋白

Tth 核酸内切酶 IV                              收藏

Tth 核酸内切酶 IV 货 号 #M0294S Tth 核酸内切酶 IV 货 号 #M0294S Tth 核酸内切酶 IV 货 号 #M0294S Tth 核酸内切酶 IV 货 号 #M0294S Tth 核酸内切酶 IV 货 号 #M0294S

货 号
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#M0294S
500 units
889.00
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特性

 耐热
 碱洗脱
 碱解旋

概述

Tth 核酸内切酶 IV 是一种热稳定的脱嘌呤/脱嘧啶（AP）核酸内切酶。该酶切割 AP 位点 5´ 端的第一个磷酸二酯键，产生 3´ 羟基和 5´ 脱氧核糖磷酸末端。该酶也具有 3´ 二酯酶活性。 

来源

克隆有嗜热栖热菌（Thermus thermophilus）endonuclease IV 基因的重组 E. coli 菌株。 

反应条件

1X ThermoPol 反应缓冲液
[10 mM KCl，20 mM Tris-HCl，10 mM (NH4)2SO4，2 mM MgSO4，0.1% Trition X-100（pH 8.8 @ 25℃）]，65℃ 温育。 

质保声明

Tth 核酸内切酶 IV 经过严格的质控检测，确保该产品具有最高的活性和纯度。更多信息请登陆 www.neb.com 或 www.neb-china.com 的产品专栏。 

单位定义

1 单位指在 10 μl 反应体系中，65℃ 条件下,1 小时能切割 1 pmol 含一个 AP 位点* 的 60 bp 寡核苷酸双链所需要的酶量。详情请登陆 www.neb.com 或 www.neb-china.com。
* AP 位点的创建方法如下：37℃ 条件下，用 1 单位尿嘧啶-DNA 糖基化酶（UDG）处理 10 pmol 含一个尿嘧啶碱基的 60 mer 寡核苷酸双链 2 分钟。 

浓度

10,000 units/ml。 

参考文献

关于该酶性质和产品应用的参考文献，请登陆 www.neb.com 或 www.neb-china.com。 

TaKaRa Tth酶试剂盒Takara Clontech

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TaKaRa Tth
品牌 Code No. 产品名称 包装量 价格（元） 说明书 数量
Takara R510A TaKaRa Tth 250 U ￥1,001 TaKaRa Tth TaKaRa Tth TaKaRa Tth
收藏产品 加入购物车
 
■ 制品内容
TaKaRa Tth 250 U
10X Tth PCR Buffer (Mg2+ plus) 1 ml
5X Tth RT-PCR Buffer 1 ml
dNTP Mixture (10 mM each) 150 μl
50 mM Mn(OAc)2 250 μl
 
 
■ 制品说明
Tth DNA polymerase是把Thermus thermophilus HB-8 DNA Polymerase的基因经过克隆转化到大肠杆菌中进行表达后，分离提取而得到的，它与天然Tth DNA 聚合酶具有相同的功能。
本酶具备一般的耐热性DNA聚合酶特性，无3’—5’DNA外切酶活性，且在Mn2+离子存在的条件下，其即便在高温条件下也可以显示反转录活性，利用该特性，可用同一酶在同一管中进行反转录反应与PCR反应（1-STEP RT-PCR）。
 
■ 保存
-20℃。
 
■ 起源
Escherichia coli carrying a plasmid that encodes the Tth DNA Polymerase gene.
 
■ 活性定义
用活性化的大马哈鱼精子DNA作为模板/引物，在74℃，30分钟内，摄入10 nmol的全核苷酸为酸性不溶物的活性定义为1个活性单位（U）。
 
■ 纯度
1) 10 U的本酶和1 μg的λ-Hind III在65℃下反应4小时，未检出外切酶活性。
2) 10 U的本酶和1 μg的Supercoiled pBR322 DNA在74℃下反应2小时，未检出内切酶活性。
3) 10 U的本酶和1 μg的16S，23S rRNA在37℃下反应4小时，未检出RNA分解酶活性。
4) 10 U的本酶和1 μg的λDNA在37℃下反应16小时，未检出DNA分解酶活性。
 
■ 用 途
1） PCR法扩增DNA Tth DNA Polymerase在高温下（95℃）能够持续保持很高的活性，可以用于DNA片段的扩增，且具有5’→ 3’外切酶活性。
2） RT-PCR在Mn2+存在的情况下，Tth DNA Polymerase具有RT酶活性，且没有RNase H活性，能够应用于RNA的检测。
 
 

TaKaRa Tth Hot Start Version酶试剂盒Takara Clontech

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TaKaRa Tth Hot Start Version
品牌 Code No. 产品名称 包装量 价格（元） 说明书 数量
Takara R520A TaKaRa Tth Hot Start Version 250 U ￥2,000 TaKaRa Tth Hot Start Version TaKaRa Tth Hot Start Version TaKaRa Tth Hot Start Version
收藏产品 加入购物车
 
■ 制品内容
TaKaRa Tth HS 250 U
10X Tth PCR Buffer (Mg2+ plus) 1 ml
5X Tth RT-PCR Buffer 1 ml
dNTP Mixture (10 mM each) 150 μl
50 mM Mn(OAc)2 250 μl
 
 
■ 制品说明
本制品是抗Tth单克隆抗体和TaKaRa Tth的混合制品，适用于Hot Start PCR。高温加热前，抗Tth单克隆抗体与Tth酶结合，抑制其活性，从而抑制低温条件下由引物的非特异性退火或引物二聚体引起的非特异性扩增。
 
■ 保存
-20℃。
 
■ 活性定义
用活性化的大马哈鱼精子DNA作为模板/引物，在74℃，30分钟内，摄入10 nmol的全核苷酸为酸性不溶物的活性定义为1个活性单位（U）。
 
■ 纯度
1) 10 U的本酶和0.6 μg的λ-Hind III在74℃下反应1小时，未检出外切酶活性。
2) 10 U的本酶和0.6 μg的Supercoiled pBR322 DNA在74℃下反应1小时，未检出内切酶活性。
3) 10 U的本酶和0.6 μg的16S,23S rRNA在37℃下反应1小时，未检出RNA分解酶活性。
4) 10 U的本酶和0.6 μg的λDNA在74℃下反应1小时和37℃下反应16小时，未检出DNA分解酶活性。
 
■ 用 途
1） Hot Start PCR法扩增DNA
2） RT-PCR
 
 

Tth Argonaute 蛋白 (TtAgo) 货 号 #M0665S-NEB酶试剂 New England Biolabs

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产品资料 – DNA修饰酶与克隆技术 – Argonaute 蛋白

Tth Argonaute 蛋白 (TtAgo)                              收藏

Tth Argonaute 蛋白 (TtAgo) 货 号 #M0665S

货 号
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#M0665S
50 pmol
919.00
有
无
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有

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特性

TtAgo 来自嗜热栖热菌，是一种可编辑的核酸内切酶，在 5’ 磷酸化的单链 DNA（ssDNA） 指导下能够切割底物靶序列，在底物与向导 DNA 互补序列的磷酸二酯键处产生断裂。

·所需 5’ 磷酸化 ssDNA 长度短，仅 16 -18 nt，成本低，可用 NEB T4 PNK 进行磷酸化

·向导/靶标序列的选择不受相邻序列限制

·对 ssDNA 和大多数双链 DNA（dsDNA）底物活性较高（在 dsDNA 底物上产生切刻），对 ssRNA 底物也有一定活性

·适用于体外应用

·参考 Tth Argonaute (TtAgo) 实验的优化指南

 

概述

 TtAgo 是一种来自革兰氏阴性嗜热栖热菌（Thermus thermophiles）的原核 argonaute 蛋白，在 5′-磷酸化单链 DNA（16 – 18 nt）指导下，可发挥 DNA 介导的核酸内切酶作用。在二价 Mg2+（或Mn2+）金属离子存在时，该酶具有类 RNase H 活性（见产品使用说明 #1），并在与 DNA 向导链第 10 和 11 个碱基互补的碱基处切割底物。

 
TtAgo 工作示意图
Tth Argonaute 蛋白 (TtAgo) 货 号 #M0665S
TtAgo 在 65-85℃ 时具有活性（见产品使用说明 #2），对 ssDNA 活性最高，其次是 dsDNA，对单链 RNA（ssRNA）底物活性最低。该酶与单链向导 DNA 协同作用时，不会切割 dsDNA ，而只是切刻与向导 DNA 链互补的底物 DNA 链。该酶对双链 RNA（dsRNA）底物无活性。切割后的 5’ 和 3’ 末端产物可进行下游连接（1）。结果表明，在某些情况下，反应中加入热稳定单链 DNA 结合蛋白（ET-SSB，NEB #M2401）和/或热稳定解旋酶有助于切割 dsDNA 底物。
 
无向导 DNA 的 TtAgo 会通过 “剪切” 来降解 dsDNA，这被认为是 TtAgo 从入侵的或外源 DNA 中自发产生向导 DNA 的机制。（2）为防止这种非特异性活性的产生，向导 DNA 的摩尔量应超过 TtAgo 量的 5 倍。此外，向导链要与 TtAgo 一起在 ～75℃ 条件下孵育 10-30 分钟，形成核蛋白复合物后再加入底物进行反应。更多详细信息，请参阅操作步骤、说明书和使用说明。
 
TtAgo 适用于体外应用。
 
随酶提供的试剂
ThermoPol 反应缓冲液套装
 
浓度
1 µM
 
来源
TtAgo 纯化自携带革兰阴性嗜热栖热菌（Thermus thermophilus）克隆基因的大肠杆菌菌株，该克隆基因是 N 端含 6X His 标记的融合基因。
 

 

保存温度

-20°C
 
质保声明 
TtAgo 蛋白经过严格的质控检测，确保该产品具有最高的活性和纯度。详情请登陆 www.neb.com 或 www.neb-china.com。
 
参考文献
1. Hunt, E. A., Evans Jr, T. C., & Tanner, N. A. (2018). Single-stranded binding proteins and helicase enhance the activity of prokaryotic argonautes in vitro. PloS One. 13 (8), e0203073.
2. Swarts, D., Szczepaniak, M., Sheng, G., Chandradoss, S., Zhu, Y., & Timmers, E. et al. (2017). Autonomous Generation and Loading of DNA Guides by Bacterial Argonaute. Molecular Cell.. 65 (6), 985-99.