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rBC2LCN-635, AF 人iPS未分化标记染料rBC2LCN-635, AF 品牌：FUJIFILM Wako

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rBC2LCN-635, AF

人iPS未分化标记染料rBC2LCN-635, AF

品牌：FUJIFILM Wako
CAS No.：
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纯度：–
产品编号

(生产商编号)

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187-03501

 for Cell Staining 100uL – 3,930.00 – –


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Human iPS Cell Generation™ All-in-One Vector酶试剂盒Takara Clontech

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Human iPS Cell Generation™ All-in-One Vector
品牌 Code No. 产品名称 包装量 价格（元） 说明书 数量
Takara 3671 Human iPS Cell Generation™ All-in-One Vector 10 μg ￥10,014 Human iPS Cell Generation™ All-in-One Vector Human iPS Cell Generation™ All-in-One Vector Human iPS Cell Generation™ All-in-One Vector
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□ 浓度 0.5 μg/μl
     
□ 贮存溶液  
     Tris-HCl (pH 8.0) 10 mM
     EDTA 1 mM
Limited Use Label License: [L44]
 
■ 制品说明
本制品是制备Human iPS细胞诱导用逆转录病毒所使用的载体。在高效、高表达逆转录病毒载体pDON-5 DNA(Code No.: 3658)上，插入了iPS细胞诱导用基因OCT3/4和SOX2、KLF4、LIN28和NANOG，各基因以Thosea asigna virus 的2A*1序列连接在一个载体上。本载体与Retrovirus Packaging Kit Ampho(Code No.: 6161)中的pGP Vector以及pE-ampho Vector共转染至逆转录病毒制备用细胞G3T-hi(Code No.: 6163)后，可以制备iPS诱导用逆转录病毒。如此制备的重组逆转录病毒由于和RetroNectin®(Recombinant Human Fibronectin Fragment)(Code No.: T100A/B)有高亲和性，所以在向目的细胞中导入基因时，使用经RetroNectin®处理后的培养皿或平板，可以得到较高的基因导入率，有效提高iPS细胞的诱导效率。
*1 5种基因转录在同一个mRNA上，翻译时在2A序列的特定位点被分割，使5种蛋白质可以等量表达。
 
■ 保存
-20℃。
 
■ 各载体的遗传信息
  基因名   GenBank Accession No.
  OCT4   NM_002701.4
  SOX2   NM_003106.2
  KLF4   NM_004235.3＊2
  LIN28   NM_024674.4
  NANOG   NM_024865.2
*2 更新的NM_004235.4中，CDS的5’端追加了对应9个氨基酸的碱基。本制品的KLF4基因中不含N端的这9个氨基酸的序列，已经确认可以有效诱导iPS细胞。
 
■ 载体图谱
Human iPS Cell Generation™ All-in-One Vector
 
 
 
 

 

Mouse ES and iPS cell culture medium (3i)酶试剂盒Takara Clontech

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Mouse ES and iPS cell culture medium (3i)
品牌 Code No. 产品名称 包装量 价格（元） 说明书 数量
Cellartis Y40011 Cellartis® 3i mES/iPSC Culture Medium 200 ml ￥4,226 Mouse ES and iPS cell culture medium (3i) Mouse ES and iPS cell culture medium (3i) Mouse ES and iPS cell culture medium (3i)
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小鼠ES/iPS细胞培养基（3i Medium）
Cellartis 3i mES/iPSC Culture Medium是一款无血清的、成分确定的细胞培养基，可用于小鼠ES细胞的建系、多能性维持和增殖培养。该培养基含有三种小分子抑制剂（基于3i技术：ERK/MEK inhibitor、GSK3β inhibitor、FGFR-TK inhibitor），用于抑制分化诱导信号通路和促进细胞增殖，以及可以在无需额外添加细胞因子刺激的情况下维持多能性基态（Pluripotent ground state）。因此，Cellartis 3i mES/iPSC Culture Medium可以应用于多能性分子机制研究和分析。
Cellartis 3i mES/iPSC Culture Medium也应用于从标准条件下难建立ES细胞的小鼠品系中建立ES细胞系(Ying et al. 2008)。相较于LIF（Leukemia Inhibitory Factor）+血清或BMP（Bone Morphogenetic Protein）条件下培养的小鼠ES细胞，使用Cellartis 3i mES/iPSC Culture Medium培养的小鼠ES细胞可以持续地以双倍速度扩增 (Ying et al. 2008; Kiyonari et al. 2010; Iijima et al. 2010)。此外，同样与LIF+血清或BMP条件下培养的小鼠ES细胞相比，使用Cellartis 3i mES/iPSC Culture Medium培养的小鼠ES细胞表现出更高的多能性克隆形成效率(Clonogenicity)。
 
■ 产品特点
· 成分确定、无血清、无饲养层、无细胞因子
· 通过添加小分子抑制剂来抑制分化诱导通路并维持小鼠ES细胞处于多能性状态
· 支持小鼠ES细胞增殖并维持≥99%纯度
 
■ 产品应用
· 维持小鼠ES细胞处于多能性状态
· 从难建系的小鼠品系中制备小鼠ES细胞
· 高效制备具有完全多能性的小鼠ES细胞
 
■ 产品组成
· 1 bottle (200 ml) of Cellartis mES/iPSC Culture Basal Medium
· 1 tube (200 μl) of Cellartis 3i mES/iPSC Supplement
 
 
■ 产品详情请点击：Mouse ES and iPS cell culture medium (3i)
 
Cellartis 3i mES/iPSC Culture Medium维持小鼠ES细胞处于同质化、未分化状态。
Mouse ES and iPS cell culture medium (3i)
小鼠ES细胞系ES-E14TG2a分别使用Cellartis 3i mES/iPSC Culture Medium（A）和 GMEM-based medium（B）培养，通过碱性磷酸酶（Alkaline phosphatase, AKP）染色检测ES细胞多能性，左边为染色前，右边为AKP染色后结果，可以看出Cellartis 3i Medium培养的小鼠ES细胞为均一的、未分化细胞。
 
Cellartis 3i mES/iPSC Culture Medium培养建立的小鼠ES细胞系具备高嵌合率。
Mouse ES and iPS cell culture medium (3i)
将ES细胞注射并植入胚胎后，通过出生小鼠个体的毛色来判断ES细胞的嵌合率。从Cellartis 3i medium培养建立的ES细胞所获得的小鼠均为黑色毛，即在单代内就获得了完全是ES细胞来源的嵌合体小鼠（A），具备高嵌合率。而从常规培养基培养建立的ES细胞所获得的嵌合体小鼠毛色混杂，未完全嵌合（B）。
 
■ 参考文献
1. Ying, Q. L. et al. The ground state of embryonic stem cell self-renewal. Nature 453, 519–23 (2008).
2. Kiyonari, H. et al. Three inhibitors of FGF receptor, ERK, and GSK3 establishes germline-competent embryonic stem cells of C57BL/6N mouse strain with high efficiency and stability. Genesis 48, 317–327 (2010).
3. Iijima, S. et al. Effect of different culture conditions on establishment of embryonic stem cells from BALB/cAJ and NZB/BINJ mice. Cell Reprogram. 12, 679–688 (2010).
 
 

Human iPS Cell Editing Systems酶试剂盒Takara Clontech

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Human iPS Cell Editing Systems
品牌 Code No. 产品名称 包装量 价格（元） 说明书 数量
Cellartis Y30021 Cellartis iPSC Single-Cell Cloning DEF-CS™ Culture Media Kit 1 kit ￥7,860 Human iPS Cell Editing Systems Human iPS Cell Editing Systems Human iPS Cell Editing Systems
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从开始到结束：人iPS细胞基因编辑和单细胞克隆系统
Start-To-Finish hiPSC Editing and Single-Cell-Cloning Systems
人诱导多能干细胞（Human induced pluripotent stem cells，hiPSCs)是一个功能强大的研究工具和疾病模型，因为其具备增殖、自我更新、分化为多种细胞类型的能力。此外，人iPS细胞还可以再现细胞来源个体的疾病表型和基因型。将人iPS细胞结合基于CRISPR/Cas9的基因编辑技术，可以在同基因的细胞系中研究特定基因改变引起的功能影响，因为基因编辑过的人iPS细胞能提供可再生的、无遗传变异的患病细胞和健康细胞资源。
CRISPR/Cas9系统已经成为一个强大的基因编辑工具，因为其高的靶向特异性，编辑效率和易用性。该技术的强大主要源于它的简单，因为全部只需要一个Cas9核酸酶结合一个单链向导RNA（single guide RNA，sgRNA) 就可以决定靶向特异性（Jinek et al. 2012)。这种RNA编程的（RNA-programmable）方法利用了非同源末端连接(non-homologous end joining，NHEJ) DNA修复途径的易错特性，进而产生基因敲除(通过插入/删除)。这种方法也可以通过同源重组（homology-directed repair，HDR)途径被用于基因敲入。
 
CRISPR/Cas9系统的组件可以通过多种方法成功导入至靶细胞，包括基于载体的表达系统，RNA转染, 导入Cas9/sgRNA核糖核蛋白（ribonucleoprotein，RNP)复合物(Sander and Joung 2014)等。与基于载体的方法相比，直接导入Cas9/sgRNA RNPs提供了一种快速转入基因编辑实验的方法，同时脱靶效应的可能性更小（Kim et al. 2014)。
 
一旦Cas9/sgRNA RNP复合物被导入，为了分离和筛选感兴趣的基因型，单细胞必须被分离并扩增为克隆细胞系。传统上,从基因编辑的hiPS细胞建立一个克隆群是低效的、具有挑战性的和耗时的，因为hiPS 细胞是以集落生长和传代的。通常，这会导致细胞死亡和提前分化。然而，Cellartis单细胞克隆系统包含一个成分确定的培养系统(由基础培养基，包被剂，和添加剂组成)，用于有效形成单细胞克隆和扩增基因编辑后的hiPSC克隆。DEF-CS culture system (Asplund et al. 2016)是一个基于单层培养的系统，规避了集落状培养带来的挑战，允许单细胞传代和促进接种的单细胞存活和后续扩增。
 
Cellartis iPSC Single-Cell Cloning DEF-CS Culture Media Kit (Code No. Y30021) 是一个完整的，在无饲养层和成分确定条件下，用于hiPSCs有效扩增和扩大生产的系统。试剂盒包含了从接种单细胞至96孔板到扩增至48孔板过程中所有必要的试剂。单细胞克隆扩增后，hiPSCs可以使用Cellartis DEF-CS 500 Culture System (Code No. Y30010)继续培养。
 
关联基因编辑系统：
一、电穿孔法基因编辑
通过电穿孔的方法对hiPSCs进行有效的基因编辑，Takara提供重组Cas9蛋白质和产生大量sgRNAs所有必要的试剂，用于电穿孔hiPSCs。后续与Cellartis iPSC Single-Cell Cloning DEF-CS Culture Media Kit (Code No. Y30021)一起使用，用于进行基因编辑后的单细胞克隆形成和扩增。单细胞克隆扩增后，hiPSCs可以使用Cellartis DEF-CS 500 Culture System (Code No. Y30010)继续培养。
二、Gesicle法基因编辑
Gesicles法是一种无毒的、高效的、替代电穿孔的方法，不依赖昂贵的设备或耗材。通过Gesicle法导入Cas9/sgRNA复合物进行有效的基因编辑，Takara提供所有的必要试剂用于产生细胞衍生的纳米囊泡（Gesicles），来转导Cas9和sgRNA至hiPSCs。后续可与Cellartis iPSC Single-Cell Cloning DEF-CS Culture Media Kit (Code No. Y30021)一起使用，用于进行基因编辑后的单细胞克隆形成和扩增。单细胞克隆扩增后，hiPSCs可以使用Cellartis DEF-CS 500 Culture System (Code No. Y30010)继续培养。
 
■ 产品特点
· Highly efficient gene editing in hiPSCs—use either electroporation or gesicles to deliver Cas9 protein and sgRNA with no genomic integration and reduced off-target effects
· Superior single-cell survival—edited hiPSCs exhibit high (typically ~50%) survival when seeded as single cells in a 96-well plate
· Maintenance of pluripotency after editing and during single-cell cloning—hiPSCs maintain high levels (>90%) of pluripotency markers Oct-4, TRA-1-60, and SSEA-4
· Stable karyotype from start to finish—maintain a normal and stable karyotype throughout editing, single-cell cloning, and expansion
· Flexibility to perform gene editing experiments your way—choose from complete kits that provide editing and single-cell cloning solutions using either electroporation-based or utilize the culture media kit (Code No. Y30021) to perform efficient single-cell cloning following your own editing experiments
· Continuous use of DEF-CS technology throughout gene editing/single-cell cloning experiments—use the Cellartis DEF-CS 500 Culture System (Code No. Y30010) before and during gene editing experiments, then during scale-up after single-cell cloning experiments
 
■ 产品组成
Cellartis® iPSC Single-Cell Cloning DEF-CS™ Culture Media Kit
（Code No. Y30021，1 kit）
· Cellartis DEF-CS 500 Basal Medium (Code No. Y30011; 500 ml)
· Cellartis iPSC Single-Cell Cloning DEF-CS COAT-1 (Code No. Y30018; 2 × 800 μl)
· Cellartis iPSC Single-Cell Cloning DEF-CS Additives
   (Code No. Y30019; 2 × 750 μl, 1 × 500 μl, 1 × 500 μl)
 
关联基因编辑产品
电穿孔法基因编辑
Guide-it™ sgRNA In Vitro Transcription Kit (632635; 1 kit)
Guide-it™ Recombinant Cas9 (Electroporation-Ready) (632641; 100 μg)
Gesicle法基因编辑
Guide-it™ CRISPR/Cas9 Gesicle Production System (632613；1 kit)
 
■ 产品应用
· CRISPR/Cas9-mediated gene editing of hiPSCs
· Single-cell cloning of hiPSCs
· Disease modeling
 
■ 参考文献
Asplund, A. et al. One Standardized Differentiation Procedure Robustly Generates Homogenous Hepatocyte Cultures Displaying Metabolic Diversity from a Large Panel of Human Pluripotent Stem Cells. Stem Cell Rev. Reports 12, 90-104 (2016).
Jinek, M. et al. A Programmable Dual-RNA-Guided DNA Endonuclease in Adaptive Bacterial Immunity. Science 337, (2012).
Kim, S., Kim, D., Cho, S. W., Kim, J. & Kim, J.-S. Highly efficient RNA-guided genome editing in human cells via delivery of purified Cas9 ribonucleoproteins. Genome Res. 24, 1012-9 (2014).
Sander, J.-D. & Joung, J.-K. CRISPR-Cas9 systems for genomic editing, regulation and targeting. Nat. Biotechnol. 32, 347-55 (2014).
 
■ 产品详情请点击：Human iPS Cell Editing Systems
 
 
 
Human iPS Cell Editing Systems
Human induced pluripotent stem cells (hiPSCs) growing in DEF-CS medium were edited with Cas9 and sgRNA specific to CD81. Pluripotency is maintained in edited human induced pluripotent stem cells (hiPSCs) that have been seeded as single cells. 12 clonal lines created from single-seeded hiPSCs exhibit high levels of Oct-4 (97-99%), TRA-1-60 (98-99%), and SSEA-4 (98-99%).
  （图片来源于Takara Bio USA, Inc.）
 
 
 

rBC2LCN-FITC (AiLecS1-FITC) 人iPS未分化标记染料rBC2LCN-FITC (AiLecS1-FITC) 品牌：FUJIFILM Wako

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rBC2LCN-FITC (AiLecS1-FITC)

人iPS未分化标记染料rBC2LCN-FITC (AiLecS1-FITC)

品牌：FUJIFILM Wako
CAS No.：
储存条件：-20℃
纯度：–
产品编号

(生产商编号)

 等级 规格 运输包装 零售价(RMB) 库存情况 参考值

180-02991

 for Cell Staining 100uL – 2,580.00 – –


* 干冰运输、大包装及大批量的产品需酌情添加运输费用


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