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protein A原理的抗体快速纯化柱—Capturem™ 膜技术酶试剂盒Takara Clontech

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protein A原理的抗体快速纯化柱—Capturem™ 膜技术
品牌 Code No. 产品名称 包装量 价格（元） 说明书 数量
Clontech 635717 Capturem™ Protein A Miniprep 12 Columns ￥2,545
2,036(终卖) 		protein A原理的抗体快速纯化柱—Capturem™ 膜技术 protein A原理的抗体快速纯化柱—Capturem™ 膜技术 protein A原理的抗体快速纯化柱—Capturem™ 膜技术
Clontech 635720 Capturem™ Protein A Maxiprep 6 Columns ￥3,803
￥3,042 		protein A原理的抗体快速纯化柱—Capturem™ 膜技术 protein A原理的抗体快速纯化柱—Capturem™ 膜技术 protein A原理的抗体快速纯化柱—Capturem™ 膜技术
Clontech 635731 Capturem™ Protein A 24-Well Plate 1 × 24-well plate ￥5,777
￥4,622 		protein A原理的抗体快速纯化柱—Capturem™ 膜技术 protein A原理的抗体快速纯化柱—Capturem™ 膜技术 protein A原理的抗体快速纯化柱—Capturem™ 膜技术
Clontech 635743 Capturem™ Protein A 24-Well Plate – HC 1 × 24-well plate ￥7,788 protein A原理的抗体快速纯化柱—Capturem™ 膜技术 protein A原理的抗体快速纯化柱—Capturem™ 膜技术 protein A原理的抗体快速纯化柱—Capturem™ 膜技术
Clontech 635746 Capturem™ Protein A Buffer 100 ml ￥934
￥747 		protein A原理的抗体快速纯化柱—Capturem™ 膜技术 protein A原理的抗体快速纯化柱—Capturem™ 膜技术 protein A原理的抗体快速纯化柱—Capturem™ 膜技术

*红字为促销价格，促销时间: 2022年9月1日-2022年10月31日 *635717从即日起停止销售，推荐使用中等规格纯化柱635720进行替代。

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■ 产品简介
Capturem™ Protein A 系列产品是基于Protein A* 原理，结合新型膜技术的一次性抗体纯化柱，特别适用于单克隆抗体和多克隆抗体的小量快速纯化和筛选。室温下操作即可，小量纯化仅需5 min，因此无须担心抗体的降解或失活。Capturem™ 系列产品以高性能的尼龙膜为介质并对其进行改造，增加了膜孔表面积，对抗体的结合能力≥75 mg/cm3。产品最突出的特点是柱床体积小，可在室温下操作，纯化简单快速，可实现抗体的高浓度、高纯度纯化。产品有小量（miniprep）、中量（maxiprep）以及高通量（24 well和96 well）四种规格可供选择。
*Protein A是金黄色葡萄球菌的表面蛋白质，对许多物种（如人、大小鼠）的IgG型抗体的Fc片段有很强的亲和力。ProteinA与抗体的结合能力根据抗体同种型（isotype）的不同而不同。
 
■ 产品特点
· 快速方便：从上样到洗脱，室温下操作小量纯化仅需5 min，无需孵育
· 一次性使用：有效减少样品间的交叉污染，受protein A性质影响，纯化抗体的产量因物种
   和抗体同种型的不同而有所差别
· 高质量：样品停留时间短，从而有效地防止了抗体降解及失活，保障了下游应用的成功率
· 高纯度、高浓度：柱床体积小，带入污染少，可实现大体积洗涤，小体积洗脱
· 高灵活性：可从广泛来源的样品中纯化抗体，如动物血清、腹水、细胞培养基等
注：Capturem™ Protein A 24-Well Plate-HC（Code No. 635743）经过优化，与旧版本产品（Code No. 635731）相比，收量更高。
 
■ Capturem™ 膜原理
protein A原理的抗体快速纯化柱—Capturem™ 膜技术
 
■ 产品主要参数
protein A原理的抗体快速纯化柱—Capturem™ 膜技术
 
* 注：Maxiprep需要50 ml tube使用的离心机，24 well、96 well 需要24孔板、96孔板使用的离心机或真空过滤装置
 
Capturem Protein A Miniprep与不同物种来源的抗体的结合能力
 
物种 亲和力 (μg/column)*
Goat 100-150
Horse >150
Human >150
Mouse 100-150
Rabbit 50-100
Rat >150
Sheep >150
 
*使用磷酸盐结合缓冲液(pH8.0)对不同物种来源的总血清进行稀释然后经Capturem Protein A Miniprep 纯化，产物的量通过测定其在280 nm处的吸光度进行计算。
 
■ Protein A和Protein G对于不同来源和亚型抗体的亲和性
Species

Antibody subtype

 Protein A Protein G Protein A/G
Human Total lgG +++ +++ +++
lgG1 +++ +++ +++
lgG2 +++ +++ +++
lgG3 + +++ +++
lgG4 +++ +++ +++
lgM + – +
lgD – – –
lgA1 + – +
lgA2 + – +
Fab + + +
scFv + – +
Mouse Total lgG +++ +++ +++
lgM – – –
lgG1 + ++ ++
lgG2a +++ +++ +++
lgG2b +++ +++ +++
lgG3 +++ +++ +++
Rat Total lgG + ++ ++
lgG1 + ++ ++
lgG2a – +++ +++
lgG2b – + +
lgG2c +++ +++ +++
Rabbit Total lgG +++ +++ +++
+++ strong binding
++ medium binding
+ weak binding
– no binding
 
■ 操作流程
protein A原理的抗体快速纯化柱—Capturem™ 膜技术
 
■ 产品性能
protein A原理的抗体快速纯化柱—Capturem™ 膜技术
 
■ 实验例
protein A原理的抗体快速纯化柱—Capturem™ 膜技术
从杂交瘤培养上清液中筛选Cas9的单克隆抗体。所有克隆均是小鼠IgG1同种型，所以使用高盐法进行纯化。选择Capturem™ Protein A Maxiprep，使用6 ml buffer (配方10 mM sodium borate, pH 8.9, 3 M NaCl)进行平衡，2,000 x g 离心3 min。向抗体上清原液中加入1/10体积的1 M sodium borate（pH8.9）将NaCl浓度调节至3.3 M。取20 ml上清液上样，2,000 x g 离心3 min，流出液重复上样一次，尽可能多的结合抗体。然后使用10 ml wash buffer（配方3 M NaCl, 10 mM sodium borate, pH8.9）洗涤，最后用0.5 ml的elution buffer(配方100 mM glycine, pH3.0)洗脱，收集管中需预先添加有50 μl 的中性buffer（配方1 M tris, pH8.5），使用少量elution buffer洗脱以便获得高浓度抗体产物。图A，SDS-PAGE 凝胶电泳检测纯化产物。图B，将Cas9表达量低(lane #1)和高(lane #2)的细胞裂解液分别进行凝胶电泳并转膜，再使用Capturem™ Protein A Maxiprep纯化得到的抗体对其进行免疫印迹反应。图C，使用筛选到的抗体，对不同比例稀释(从左至右: 20 ng, 10 ng, 5 ng, 2.5 ng, 1.25 ng, 0.625 ng)的Cas9 蛋白质进行免疫印迹反应
 
 
实验操作视频：
https://www.takarabio.com/learning-centers/protein-research/his-tag-purification/protocols/video-capturem-his-miniprep
 
 
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Streptavidin标记物快速纯化柱—Capturem™ 膜技术酶试剂盒Takara Clontech

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Streptavidin标记物快速纯化柱—Capturem™ 膜技术
品牌 Code No. 产品名称 包装量 价格（元） 说明书 数量
Clontech 635733 Capturem™ Streptavidin Miniprep Columns 20 Columns ￥4,638 Streptavidin标记物快速纯化柱—Capturem™ 膜技术 Streptavidin标记物快速纯化柱—Capturem™ 膜技术 Streptavidin标记物快速纯化柱—Capturem™ 膜技术
Clontech 635734 Capturem™ Streptavidin 96-Well Plate 1 × 96 well plate ￥8,935 Streptavidin标记物快速纯化柱—Capturem™ 膜技术 Streptavidin标记物快速纯化柱—Capturem™ 膜技术 Streptavidin标记物快速纯化柱—Capturem™ 膜技术
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■ 产品简介
Capturem™ Streptavidin——利用链霉亲和素快速富集和纯化生物素化物质。
链霉亲和素是一种来源于链霉菌Streptomyces avidinii的细胞壁蛋白质，与生物素有非常强的亲和力，这一互作特性在生命科学领域被广泛应用于富集等相关研究。Capturem™ Streptavidin mini 纯化柱和96-well 纯化板是将链霉亲和素固定在高容量的Capturem膜上，从而在室温条件下就可以对生物素化的靶标实现快速、高质量的纯化和富集，整个操作从上样到洗脱仅需5～15分钟。此外，还可以利用Capturem™ Streptavidin来捕获或pull down靶标分子或复合物。
 
■ 产品特点
· 简单、快速的操作流程：室温下操作即可，小量纯化仅需5 min，96-well板仅需15 min
· 产物浓度高：少量的洗脱液即可实现高浓度洗脱
· 高质量：样品停留时间短，从而有效地防止了样品聚集、失活，或者样品中复合物解离
· 高重复性：每个纯化柱的纯化结果有高度的一致性
· 一次性使用：新型膜技术搭配一次性离心柱有效降低了污染和残留的风险
 
■ 应用
· 生物素化蛋白质的纯化或富集
· Pull down与生物素化的配体相结合的蛋白质或oligo
 
Capturem Streptavidin对不同样品的载量和操作时间
  生物素标记的抗体 生物素标记的BSA 生物素标记的ssDNA 游离的生物素 纯化时间
Capturem Streptavidin mini纯化柱和96-well 纯化板 20-40 μg >15 μg 1,000-1,500 ng >4,000 pmol 15 分钟
 
实验例
例1
Streptavidin标记物快速纯化柱—Capturem™ 膜技术
使用Capturem Streptavidin连续三次捕获抗体。图A–C.首先将含48 μg生物素化兔IgG的Binding Buffer上样至平衡好的Capturem Streptavidin spin column中，这时32.0 ± 1.4 μg (图B)的抗体被成功固定在膜上。然后洗涤一次，再将使用Binding Buffer稀释的含20%小鼠血清且同时加入spiked-in靶抗体（约100 μg山羊抗兔抗体）的杂交瘤培养基加入到Capturem Streptavidin spin column中，分别使用Binding Buffer和PBS先后洗涤两次，最后使用1.0 M甘氨酸洗脱3次，从生物素化的捕捉抗体上洗脱获得高纯度的靶抗体，收量约为42 ± 5 μg (图C)。
 
例2
Streptavidin标记物快速纯化柱—Capturem™ 膜技术
Capturem Streptavidin 96-well纯化板具有高度重复性。分别对生物素化oligo（图A）和生物素化BSA（图B）进行8次技术重复上样，并使用离心的方法进行靶标捕获。通过测定样品上样前后的OD值来对结合的分子进行定量。捕获操作按照标准的流程进行，15 min之内完成。
 
 
 
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Capturem™ Extracellular Vesicle Isolation Kit酶试剂盒Takara Clontech

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Capturem™ Extracellular Vesicle Isolation Kit
品牌 Code No. 产品名称 包装量 价格（元） 说明书 数量
Clontech 635741 Capturem™ Extracellular Vesicle Isolation Kit (Mini) 20 Minipreps ￥7,005 Capturem™ Extracellular Vesicle Isolation Kit Capturem™ Extracellular Vesicle Isolation Kit Capturem™ Extracellular Vesicle Isolation Kit
Clontech 635748 Capturem™ Extracellular Vesicle Isolation Kit (Maxi) 8 Maxipreps ￥9,640 Capturem™ Extracellular Vesicle Isolation Kit Capturem™ Extracellular Vesicle Isolation Kit Capturem™ Extracellular Vesicle Isolation Kit
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■ 产品概述
本制品是基于Capturem新型膜技术的一次性使用离心柱，可在30 min内实现血浆等多种生物体液样品中细胞外囊泡（EVs）的简单快速提取。其基本原理是根据EVs的生化性质，选择与其特异性结合的凝集素（非抗体）固定于Capturem™膜上，进而对EVs进行提取，产物纯度高、污染少。
 
■ 产品特点
· 适用范围广— 可应用于全血、血浆、血清、唾液、尿液、脑脊液、母乳、细胞培养上清液等多种生物体液样品中的EVs提取
· 快速、重复性好– 30 min内即可从最高850 μl（Mini）或24 ml（Maxi）生物体液样品中快速提取EVs，不同操作者也可获得具有重复性的EVs收量
· 收量高— EVs最高收量可达1010（Mini）或1011（Maxi），可获得足够的exosomal RNA应用于下游的RT-qPCR、 NGS等研究
· 纯度高— 提取的EVs经Western Blot检测表达exosome蛋白质，而不表达nonexosomal污染蛋白质，如calnexin和 albumin
· 完整性好– 基于凝集素的提取原理，EVs不易被破坏，TEM下观察呈经典形态
· 简单易用— 试剂盒组分配备齐全，包含一次性的预清洁柱，一次性的离心柱，以及平衡、洗涤和洗脱缓冲液，且经过优化，操作简便
 
■ 操作流程
Capturem™ Extracellular Vesicle Isolation Kit
注：1. *过滤步骤使用100-kDa MWCO的过滤装置，过滤时间取决于样品的类型和体积。
    2. 本制品最大载样量约为1010 EVs/column（Mini）或1011 EVs/column（Maxi），多次上样收量也不会超过最大值。
 
■ 实验例
 
实验例 1
Capturem™ Extracellular Vesicle Isolation Kit
Capturem™ Extracellular Vesicle Isolation Kit
 
与超速离心法相比，本制品分离得到的EVs浓度和纯度更高。分别使用本制品和超速离心法从500 μl血浆样品中分离EVs，进行三次重复性实验，使用Nanoparticle tracking analysis (NTA) 检测。每种方法的粒径分布计算以平均值（黑线）和标准误差（红线）显示。结果显示，本制品提取的EVs平均粒径大小为81 nm（D90=110 nm），超速离心法提取的EVs平均粒径大小为135 nm（D90=203 nm）。上图可见，使用本制品提取的EVs具有更窄的粒径分布范围，且稳定性更好。
 
实验例 2
Capturem™ Extracellular Vesicle Isolation Kit
 
使用本制品成功地从不同生物体液样品中提取EVs。上图NTA结果显示，本制品可以应用于多种生物体液样品的EVs提取，如母乳、唾液、脑脊液、血清、尿液、条件培养基。每种方法的粒径分布计算以平均值（黑线）和标准误差（红线）显示。
 
实验例 3
Capturem™ Extracellular Vesicle Isolation Kit
对使用本制品与超速离心法提取的EVs中的目的蛋白质进行Western blot分析。结果显示，与超速离心法相比，本制品提取的EVs包含更多的exosome特异性标记物CD63、CD9和Alix，而non-exosome蛋白质（calnexin和albumin）含量较少。因此，本制品提取的EVs纯度更高、污染蛋白质更少。
 
实验例 4
Capturem™ Extracellular Vesicle Isolation Kit
与超速离心法相比，使用本制品提取的EVs，可获得更高的RNA收量。使用Capturem EV kit（Mini）从50 μl血浆中提取的EVs可以获得约100 pg/μl的RNA，而使用超速离心法，至少需要300 μl血浆才能获得同样收量的RNA。而使用Capturem EV kit（Maxi）从大量样本中提取的EVs，也可以获得稳定的RNA收量。
 
实验例 5
Capturem™ Extracellular Vesicle Isolation Kit
Capturem™ Extracellular Vesicle Isolation Kit
使用本制品提取的EVs，可获得足够的RNA用于下游RT-qPCR实验。本实验例是对Capturem分离的EVs进一步提取RNA再进行miRNA筛选。 首先使用PrimeScript RT Master Mix（Perfect Real Time）将RNA反转录为cDNA，然后使用Takara PreAmp Master Mix进行预扩增。应用SmartChip Real Time PCR系统对所得cDNA库进行1,200个miRNA靶标筛选，结果检测到108个miRNA，对表达量前8的miRNA进行了芯片外验证，结果显示miR-548w，miR-496，miR-744-3p，miR-660-3，miR-3167和miR-376A-3p在分离的EVs样品中拷贝数最高，其中很多microRNA已被验证过在血浆来源的EVs中表达量较高。本实验例表明，Capturem分离的EVs包含足够的RNA可用于下游的RT-qPCR实验。
 
实验例 6
Capturem™ Extracellular Vesicle Isolation Kit
使用本制品提取的EVs，可获得足够的RNA用于下游NGS实验。以本制品提取的EVs中的RNA为样本，使用SMARTer Stranded Total RNA-Seq Kit v2 – Pico Input Mammalian进行NGS建库。Bioanalyzer trace表明构建了良好且统一的文库，后续的测序表明，构建得到的NGS文库基因覆盖度良好。
 
 
产品详情请点击：Capturem™ Extracellular Vesicle Isolation Kit
 
 

protein G原理的抗体快速纯化柱—Capturem™ 膜技术酶试剂盒Takara Clontech

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protein G原理的抗体快速纯化柱—Capturem™ 膜技术
品牌 Code No. 产品名称 包装量 价格（元） 说明书 数量
Clontech 635725 Capturem™ Protein G Miniprep 10 Columns ￥2,545
￥2,036 		protein G原理的抗体快速纯化柱—Capturem™ 膜技术 protein G原理的抗体快速纯化柱—Capturem™ 膜技术 protein G原理的抗体快速纯化柱—Capturem™ 膜技术
Clontech 635726 Capturem™ Protein G 96-Well Plate 1 × 96-well plate ￥5,499 protein G原理的抗体快速纯化柱—Capturem™ 膜技术 protein G原理的抗体快速纯化柱—Capturem™ 膜技术 protein G原理的抗体快速纯化柱—Capturem™ 膜技术
Clontech 635727 Capturem™ Protein G Maxiprep 6 Columns ￥3,803 protein G原理的抗体快速纯化柱—Capturem™ 膜技术 protein G原理的抗体快速纯化柱—Capturem™ 膜技术 protein G原理的抗体快速纯化柱—Capturem™ 膜技术
Clontech 635732 Capturem™ Protein G 24-Well Plate 1 × 24-well plate ￥5,777
￥4,622 		protein G原理的抗体快速纯化柱—Capturem™ 膜技术 protein G原理的抗体快速纯化柱—Capturem™ 膜技术 protein G原理的抗体快速纯化柱—Capturem™ 膜技术
Clontech 635745 Capturem™ Protein G 24-Well Plate – HC 1 × 24-well plate ￥7,788 protein G原理的抗体快速纯化柱—Capturem™ 膜技术 protein G原理的抗体快速纯化柱—Capturem™ 膜技术 protein G原理的抗体快速纯化柱—Capturem™ 膜技术
Clontech 635744 Capturem™ Protein G 24-Well Plate – HC 4 × 24-well plate ￥26,358 protein G原理的抗体快速纯化柱—Capturem™ 膜技术 protein G原理的抗体快速纯化柱—Capturem™ 膜技术 protein G原理的抗体快速纯化柱—Capturem™ 膜技术

*红字为促销价格，促销时间: 2022年9月1日-2022年10月31日

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■ 产品简介
Capturem™ Protein G 系列产品是基于Protein G* 原理，结合新型膜技术的一次性抗体纯化柱，特别适用于单克隆抗体和多克隆抗体的小量快速纯化和筛选。室温下操作即可，小量纯化仅需5 min，因此无须担心抗体的降解或失活。Capturem™ 系列产品以高性能的尼龙膜为介质并对其进行改造，增加了膜孔表面积，对抗体的结合能力≥75 mg/cm3。产品最突出的特点是柱床体积小，可在室温下操作，纯化简单快速，可实现抗体的高浓度、高纯度纯化。产品有小量（miniprep）、中量（maxiprep）以及高通量（24 well、96 well）四种规格可供选择。
*Protein G是来源于Staphylococcus aureus的细胞壁蛋白质，与许多物种（人、大小鼠等）的单克隆或多克隆IgG型抗体分子的Fc段有高亲和性。本制品使用的是重组protein G，去掉了白蛋白结合结构域、细胞壁和细胞膜结合结构域，从而提高了与抗体Fc片段的结合特异性。
 
■ 产品特点
· 快速方便：从上样到洗脱，室温下操作小量纯化仅需5 min，无需上样后孵育
· 结合力强：膜与抗体的结合能力≥75 mg/cm3
· 高质量：样品停留时间短，从而有效地防止了抗体降解及失活，保障了下游应用的成功率
· 高纯度、高浓度：柱床体积小，带入污染少，可实现大体积洗涤，小体积洗脱
· 高灵活性：可从广泛来源的样品中纯化多种类型的抗体，如动物血清、腹水、细胞培养基等
· 一次性使用：有效减少样品间的交叉污染，单孔的纯化产量因样品类型、物种以及抗体同种型的不同而有所差别。
注：Capturem™ Protein G 24-Well Plate-HC（Code No. 635745/635744）经过优化，与旧版本产品（Code No. 635732）相比，收量更高
 
■ Capturem™ 膜原理
protein G原理的抗体快速纯化柱—Capturem™ 膜技术
 
■ 操作流程
protein G原理的抗体快速纯化柱—Capturem™ 膜技术
 
■ 产品主要参数
 
  Capturem™ Protein G Miniprep Capturem™ Protein G Maxiprep Capturem™Protein G 24-Well Plate-HC Capturem™Protein G 96-Well Plate
包装量 10次 6次 24 well 96 well
样品上样量*1 100～800 μl 2～20 ml 0.5～4.3 ml/well 200～1,000 μl/well
操作时长 5 min 15 min 15 min 15 min
收量*2 60 μg
protein/column 		1.2 mg
protein/column 		600 μg*3
protein/well		 60 μg
protein/well
洗脱液使用量 100-300 μl 0.5-1.5 ml 1.8 ml 100-300 μl
 
*1. 样品与binding buffer的稀释比例为1:2～1:15。建议杂交瘤样品1:2～1:4稀释，血清样品1:15稀释。
*2. 收量多少取决于样品的类型、物种以及抗体同种型（isotype）。
*3. 这是在HEK293细胞上清液中添加1 mg小鼠IgG1时获得的收量。
 
■ Protein A和Protein G对于不同来源和亚型抗体的亲和性
Species

Antibody subtype

 Protein A Protein G Protein A/G
Human Total lgG +++ +++ +++
lgG1 +++ +++ +++
lgG2 +++ +++ +++
lgG3 + +++ +++
lgG4 +++ +++ +++
lgM + – +
lgD – – –
lgA1 + – +
lgA2 + – +
Fab + + +
scFv + – +
Mouse Total lgG +++ +++ +++
lgM – – –
lgG1 + ++ ++
lgG2a +++ +++ +++
lgG2b +++ +++ +++
lgG3 +++ +++ +++
Rat Total lgG + ++ ++
lgG1 + ++ ++
lgG2a – +++ +++
lgG2b – + +
lgG2c +++ +++ +++
Rabbit Total lgG +++ +++ +++
+++ strong binding
++ medium binding
+ weak binding
– no binding
 
■ 各试剂盒组成
 
Capturem™ Protein G Miniprep（635725）
Miniprep Column      10个
 
Capturem™ Protein G Maxiprep（635727）
Maxiprep Column      6个
 
Capturem™ Protein G 96-Well Plate（635726）
96 well plate          1块
 
Capturem™ Protein G 24-Well Plate（635732）
24 well plate          1块
 
Capturem™ Protein G 24-Well Plate-HC（635745）
24 well plate          1块
 
Capturem™ Protein G 24-Well Plate-HC（635744）
24 well plate          4块
 
【注】由于Capturem Protein G系列产品不包含buffer和收集管，请按以下建议配制buffer和准备材料。
1. 纯化buffer
本制品可搭配使用磷酸盐、柠檬酸盐缓冲液等抗体纯化常用试剂。标准的buffer配方请参考说明书中内容，需要注意的是，buffer的盐浓度和pH值对纯化抗体的收量和纯度的影响会因抗体的同种型不同而不同。
2. 收集tube/plate
使用Miniprep产品进行1次纯化，需要额外准备4个2 ml tube
使用Maxiprep产品进行1次纯化，需要额外准备4个50 ml tube
使用96 well产品进行1次纯化，需要额外准备4个96 well collection plate
使用24 well产品进行1次纯化，需要额外准备4个24 well collection plate
 
 
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Capturem™ Trypsin （质谱级）酶试剂盒Takara Clontech

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Capturem™ Trypsin （质谱级）
品牌 Code No. 产品名称 包装量 价格（元） 说明书 数量
Clontech 635737 Capturem™ Trypsin 96-Well Plate (Mass Spectrometry Grade) 1 × 96-Well Plate ￥6,030 Capturem™ Trypsin （质谱级） Capturem™ Trypsin （质谱级） Capturem™ Trypsin （质谱级）
Clontech 635736 Capturem™ Trypsin 96-Well Plate (Mass Spectrometry Grade) 4 × 96-Well Plates ￥21,610 Capturem™ Trypsin （质谱级） Capturem™ Trypsin （质谱级） Capturem™ Trypsin （质谱级）
Clontech 635739 Capturem™ Trypsin Activation Buffer 50 ml ￥629 Capturem™ Trypsin （质谱级） Capturem™ Trypsin （质谱级）
Clontech 635740 Capturem™ Trypsin Miniprep Kit (Mass Spectrometry Grade) 20 Rxns ￥3,213 Capturem™ Trypsin （质谱级） Capturem™ Trypsin （质谱级） Capturem™ Trypsin （质谱级）
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■ 产品简介
Capturem™ Trypsin能在室温下快速、高效并且完整的酶解消化蛋白质用于质谱分析，与需要4小时甚至过夜的传统蛋白质酶解消化操作流程相比，可以使蛋白质组学分析流程更加连贯、流畅。本制品基于新型Capturem™ 膜技术，膜上固定trypsin（猪胰腺来源，且经过还原甲基化修饰，稳定性和抗自溶能力都显著增强），有小型离心柱以及96孔板的形式可供选择，能在短短几分钟内完成独立或高通量样品的蛋白质酶解消化，不需要溶液法的长时间孵育（长时间孵育易造成蛋白质的氧化或非特异性修饰，最终导致鉴定困难并且重复性低），并且自溶片段很少，效率更高。此外，使用小离心柱或plate的方法操作速度快，更能避免溶液法易出现的过度酶解消化的情况。每个小离心柱或96 well plate的单孔最大上样量为80 μg的蛋白质或25 μg的抗体。
 
■ 产品特点
·操作快速，步骤简单，Miniprep产品4 min内即可在室温下酶解蛋白质样品，无需过夜处理
·比溶液法效率更高，酶解更彻底，且不易出现过度酶解
·Trypsin经过修饰稳定性更高，样品中自溶片段更少，蛋白质非特异性修饰几率更低
·可以使整个蛋白质组学分析流程更加连贯，实现更有效的肽和蛋白质的质谱鉴定
·有独立的小型离心柱和高通量的96 well plate形式可供选择，满足不同的实验需求
* 4 × 96-Well Plates包装的产品不包含Activation Buffer，需要搭配购买635739或自行配制，每个plate需要搭配使用25 ml Activation Buffer
 
■ 操作流程
 
Capturem™ Trypsin （质谱级）
Capturem™ Trypsin消化流程。 在用活化buffer激活Capturem™ Trypsin后，将天然状态或经变性处理的样品溶液（50-800 μl）加入孔中，通过2 min的离心使样品过柱。在柱上进行胰蛋白酶消化，随后肽片段再次进行2 min的离心洗脱。与传统溶液法需要过夜消化的时长相比，Capturem™ Trypsin进行完全的抗体消化仅需3-6 min。*本流程不包括变性/还原/烷基化的时间。
 
■ 产品应用
·蛋白质鉴定
·蛋白质组学分析
·质谱样品制备
·抗体鉴定
 
■ 实验例
 
Capturem™ Trypsin （质谱级）
在天然条件下用Capturem™ Trypsin消化80 μg的肌红蛋白（Apo）的HPLC图谱。由图可见，Capturem™ Trypsin酶解消化的产物具有很高的重复性。
 
Capturem™ Trypsin （质谱级）
对使用Capturem™ Trypsin消化的SILuLite进行定量。Trypsin离心法消化SILuLite可产生ng级别（1, 10, 50 ng）的可检测替代肽段。特异性肽段的AUCs具有线性相关性。
 
 
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