pAUR101 DNA酶试剂盒Takara Clontech

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pAUR101 DNA
品牌 Code No. 产品名称 包装量 价格(元) 说明书 数量
Takara 3600 pAUR101 DNA 20 μg ¥2,003 pAUR101 DNA pAUR101 DNA pAUR101 DNA
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□ 浓度  
     1.0 μg/μl  
□ 贮存溶液  
     Tris-HCl (pH 8.0) 10 mM
     EDTA 1 mM
   
 
■ 制品说明
pAUR101是酿酒酵母(Saccharomyces cerevisiae)染色体整合型穿梭载体。在酵母细胞中不能自主复制,只能通过重组酶将其整合到酵母染色体中才能稳定的存在。pAUR101含有突变体AUR1-C基因作为筛选标记,在酵母转化时,可使用Aureobasidin A (AbA)进行抗性筛选。该载体可通过AUR1-C基因中单切点限制酶(BstP I、EcoO65 I、BsiW I或Stu I)线性化,然后以同源重组的方式有效地整合到宿主染色体中。
 
■ 保存
-20℃。
 
■ GenBank登录
Accession No. : AB012282
 
■ 链长
6,687 bp
 
■ 制备
CsCl-EtBr 超离心方法制备。
 
■ 用途
pAUR101 DNA是利用Aureobasidin A (AbA) 进行酿酒酵母 (Saccharomyces cerevisiae) 转化的载体 (染色体整合型穿梭载体)。
 
pAUR101载体图谱
pAUR101 DNA
 
 

pAUR112 DNA酶试剂盒Takara Clontech

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pAUR112 DNA
品牌 Code No. 产品名称 包装量 价格(元) 说明书 数量
Takara 3601 pAUR112 DNA 20 μg ¥2,159 pAUR112 DNA pAUR112 DNA pAUR112 DNA
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□ 浓度  
     1.0 μg/μl  
□ 贮存溶液  
     Tris-HCl (pH 8.0) 10 mM
     EDTA 1 mM
   
 
■ 制品说明
pAUR112 DNA是一种以质粒形式稳定存在于酿酒酵母细胞中的穿梭载体。本载体在大肠杆菌中的选择标记是氨苄青霉素,在酿酒酵母中的选择标记是Aureobasidin A (AbA),其抗性基因是AUR1-CURA3,含有可以在酿酒酵母细胞中自主复制的序列CEN/ARS。多克隆位点由Xho I、Sal I、Xba I、Sma I、Kpn I和Sac I 6种限制酶酶切位点组成。
 
■ 保存
-20℃。
 
■ GenBank登录
Accession No. AB012283
 
■ 链长
7,102 bp
 
■ 制备
CsCl-EtBr 超离心方法制备。
 
■ 用途
pAUR112是利用Aureobasidin A (AbA)进行酿酒酵母 (Saccharomyces cerevisiae) 转化的载体。在酿酒酵母中以质粒状态存在。
 
pAUR112载体图谱
pAUR112 DNA
 
 

pAUR123 DNA酶试剂盒Takara Clontech

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pAUR123 DNA
品牌 Code No. 产品名称 包装量 价格(元) 说明书 数量
Takara 3602 pAUR123 DNA 20 μg ¥2,159 pAUR123 DNA pAUR123 DNA pAUR123 DNA
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□ 浓度  
     1.0 μg/μl  
□ 贮存溶液  
     Tris-HCl (pH 8.0) 10 mM
     EDTA 1 mM
   
 
■ 制品说明
pAUR载体含有酿酒酵母的AUR1-C突变体基因作为筛选标记,使用Aureobasidin A (AbA)进行酵母转化的抗性筛选。pAUR123 DNA来源于pAUR112 DNA,是一种蛋白质表达穿梭载体,能够在酿酒酵母细胞中自主复制。蛋白质表达用的启动子是ADH1基因3(Alcohol dehydrogenase 1 gene)的启动子。
(注:本载体不适用于蛋白质的高表达。)
 
■ 保存
-20℃。
 
■ GenBank登录
Accession No. : AB012284
 
■ 链长
6,982 bp
 
■ 制备
CsCl-EtBr 超离心方法制备。
 
■ 用途
pAUR123是利用Aureobasidin A (AbA)进行酿酒酵母 (Saccharomyces cerevisiae) 转化的载体 (穿梭表达载体)。
 
pAUR123载体图谱
pAUR123 DNA
 
 

pAUR224 DNA酶试剂盒Takara Clontech

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pAUR224 DNA
品牌 Code No. 产品名称 包装量 价格(元) 说明书 数量
Takara 3603 pAUR224 DNA 20 μg ¥2,159 pAUR224 DNA pAUR224 DNA pAUR224 DNA
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□ 浓度  
     1.0 μg/μl  
□ 贮存溶液  
     Tris-HCl (pH 8.0) 10 mM
     EDTA 1 mM
   
 
■ 制品说明
pAUR224 DNA是穿梭型表达载体,利用粟酒裂殖酵母 (Schizosaccharomyces pombe)的基因突变体aur1R作为选择标记基因,进行酵母转化。包含细胞巨化病毒的启动子 (CMV)。
 
■ 保存
-20℃。
 
■ 链长
7,638 bp
 
■ 制备
CsCl-EtBr 超离心方法制备。
 
■ 用途
pAUR224是利用Aureobasidin A (AbA) 进行粟酒裂殖酵母 (Schizosaccharomyces pombe) 转化的载体 (穿梭型表达载体) 。
 
pAUR224载体图谱
pAUR224 DNA
 
 

pAUR135 DNA酶试剂盒Takara Clontech

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pAUR135 DNA
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Takara 3604 pAUR135 DNA 20 μg ¥2,003 pAUR135 DNA pAUR135 DNA pAUR135 DNA
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□ 浓度  
     0.5 μg/μl  
□ 贮存溶液  
     Tris-HCl (pH 8.0) 10 mM
     EDTA 1 mM
   
 
■ 制品说明
pAUR135 DNA是一种穿梭载体,可以利用载体本身的DNA序列将酿酒酵母 (Saccharomyces cerevisiae) 转化子中的载体部分序列包括选择标记AUR1-C基因去除。选择标记被去除的克隆筛选更容易且高效。所以,pAUR135载体可以反复转化。含有AUR1-C基因的载体在酵母细胞中具有Aureobasidin A (AbA)抗性和GAL10启动子调控的GIN11M86 DNA。GIN11M86基因的过表达可以抑制宿主细胞的生长。大部分因为pAUR135存在而具有AbA抗性的转化子在转移到半乳糖培养基中培养时,GIN11M86基因可以在GAL10启动子和半乳糖作用下过表达,从而表现出致死显型。但是只有那些低效重组获得的pAUR135载体被去除的克隆可以优先在半乳糖培养基中生长。这些能在含有半乳糖的培养基中生长的克隆是包含目的表型的克隆和回复原状的克隆,是AbA敏感的克隆。所以pAUR135可以对这些克隆再次转化。pAUR135能够有效地在酵母中导入突变和破坏基因功能。假如工业酵母菌株发生了退变,应用pAUR135可以减少不必要DNA序列引起的麻烦。
 
■ 保存
-20℃。
 
■ 链长
6,074 bp
 
■ 制备
CsCl-EtBr 超离心方法制备。
 
■ 注意

1. 在pAUR135中进行选择标记去除主要依靠GIN11M86的过表达,而GIN11M86的过表达受半乳糖诱导的GAL10启动子控制。

因此,有效的标记去除需要宿主菌对半乳糖的消化作用,实验前要事先确认宿主的半乳糖营养性后再使用本系统。
2. 对于标记去除的克隆,目的表型的比例受导入突变或缺失的位置的影响很大。

 
pAUR135载体图谱
pAUR135 DNA