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TaKaRa Competent Cells BL21酶试剂盒Takara Clontech

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TaKaRa Competent Cells BL21
品牌 Code No. 产品名称 包装量 价格（元） 说明书 数量
Takara 9126 TaKaRa Competent Cell BL21 100 μl x 10 ￥347 TaKaRa Competent Cells BL21 TaKaRa Competent Cells BL21 TaKaRa Competent Cells BL21
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■ 制品内容TaKaRa Competent Cells BL21
TaKaRa Competent Cells BL21 10 × 100 μl
pUC19 DNA (0.1 ng/μl) 10 μl
SOC Medium* 10 × 1 ml
*SOC Medium:          2%
   Tryptone
 0.5%   Yeast extract
 10 mM   NaCl
 2.5 mM   KCl
 10 mM   MgSO4
 10 mM   MgCl2
 20 mM   Glucose
 
■ 制品说明
E.coli BL21来源于B株，为lon蛋白水解酶、ompT外膜蛋白水解酶缺陷型，因此表达的外源蛋白质在该体系中具有更高的稳定性。本制品有利于外源蛋白质的稳定表达。
本制品可用于pCold I-IV DNA 和pCold TF DNA的蛋白质表达，但不适合于启动子为T7的蛋白质表达体系，如pET系列，因为BL21宿主不表达T7 RNA聚合酶。另外，不建议使用此菌株构建或制备质粒，因为它不是recA基因缺失型菌株。
注意：本制品不可用于电击法转化。
 
■ 保存
-80℃。
注意：如果不是-80℃保存，转化效率将会降低。可使用附带的pUC19 DNA确认保存细胞的转化效率。不能液氮保存。
 
■ 质量控制
转入1 ng 的pUC19 DNA，涂于含有Amp+的选择培养基进行筛选。
转化效率 : ≥1×106 colonies /μg pUC19 DNA
 
■ Genotype
E.coli BL21: F–, ompT, hsdSB (rB–mB–), gal, dcm
 
■ 注意事项
1. 将感受态细胞从-80℃冷冻取出后请立即置于干冰/乙醇中。使用前保存于干冰/乙醇中。
2. 当使用100 μl感受态细胞时，加入不超过10 ng的高纯度质粒DNA。否则转化效率会降低。
3. 当改变感受态细胞数量或tubes类型时，适当调整反应条件。
4. 使用TE buffer溶解纯化的质粒DNA。DNA溶液如果盐浓度高，可能会降低转化效率。
5. L-broth 或φb-broth可替代SOC培养基。此时，转化效率可能会降低。
  ·L-broth : Ingredient per liter water  
  Tryptone 10 g  
  Yeast extract 5 g  
  NaCl 5 g  
  用1 N NaOH调整pH到7.5并高压灭菌。
  ·φb-broth: Ingredient per liter water  
  Tryptone 20 g  
  Yeast extract 5 g  
  MgSO4·7H2O 5 g  
    用1 N KOH调整pH到7.5并高压灭菌。
6. 稀释时，使用SOC培养基。
7. 不建议将解冻的感受态细胞再次冷冻保存。但是，如果再次冻结不可避免，将细胞置于干冰/乙醇中迅速冷冻，置于-80℃保存。但是，转化效率可能会降低至少一个数量级。
 
 

E. coli MV1184 Competent Cells酶试剂盒Takara Clontech

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E. coli MV1184 Competent Cells
品牌 Code No. 产品名称 包装量 价格（元） 说明书 数量
Takara 9055 E. coli MV1184 Competent Cells 100 μl × 10 ￥530 E. coli MV1184 Competent Cells E. coli MV1184 Competent Cells E. coli MV1184 Competent Cells
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■ 制品内容E. coli MV1184 Competent Cells
E. coli MV1184 Competent Cells 100 μl × 10
pUC119 plasmid (0.1 ng/μl) 10 μl
SOC Medium* 1 ml × 10
*SOC Medium      2%   tryptone
 0.5%   yeast extract
 10 mM   NaCl
 2.5 mM   KCl
10 mM   MgSO4
10 mM   MgCl2
 20 mM   Glucose
 
■ 制品说明
Takara公司在Hanahan’s method基础上进行了改良，制备出E.coli MV1184 Competent Cells，当1 ng pUC119转化100 μl 细胞时，转化效率可达1×107 cfu/μg。
E.coli MV1184宿主具有琥珀突变抑制因子，只允许没有发生琥珀突变的载体进行复制，可以用作琥珀突变DNA的选择宿主。同时本宿主含有F’质粒，也可作为M13 phage载体DNA的宿主菌，制备单链DNA。此外，本宿主在使用pUC系列质粒载体或M13 phage载体进行转化或转染时，具有α-互补性，可以通过在培养基中加入X-Gal 和 IPTG进行蓝白筛选。
X-Gal : 5-Bromo-4-Chloro-3-Indolyl-β-D-Galactoside
IPTG : Isopropyl-β-D-thiogalactopyranoside
 
■ 细胞浓度
1-2×109 bacteria/ml
 
■ Genotype
E. coli MV1184：ara,△(lac-proAB),rpsL, thi (Φ80lacZ△M15), △(srl-recA) 306::Tn10 (tet r) / F’ [traD36, proAB+, lac Iq, lacZ△M15]
 
■ 保存
-80℃。
注意： 如果不在-80℃下保存，转化效率将会降低。此时，在使用前，请使用附带的pUC119 对照质粒来确认细胞的转化效率。不能液氮保存。
 
■ 转化效率
按照“质粒载体转化”的使用方法，使用1 ng 的pUC119转化到100 μl E. coli MV1184 Competent Cells中，在含有氨苄青霉素的LB平板上筛选，转化效率 : >1 x 107 cfu/μg pUC119
 
 

E.coli CJ236 Competent Cells酶试剂盒Takara Clontech

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E.coli CJ236 Competent Cells
品牌 Code No. 产品名称 包装量 价格（元） 说明书 数量
Takara 9053 E.coli CJ236 Competent Cells 100 μl × 10 ￥502 E.coli CJ236 Competent Cells E.coli CJ236 Competent Cells E.coli CJ236 Competent Cells
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■ 制品内容E.coli CJ236 Competent Cells
E.coli CJ236 Competent Cells 100 μl × 10
pUC119 plasmid ( 0.1 ng/μl) 10 μl × 1
SOC Medium* 1 ml × 10
*SOC Medium:      2%   Tryptone
 0.5%   Yeast extract
 10 mM   NaCl
 2.5 mM   KCl
 10 mM   MgSO4
10 mM   MgCl2
 20 mM   Glucose
 
■ 制品说明
Takara公司在Hanahan’s method基础上进行了改良，制备出E.coli CJ236 Competent Cells，当1 ng pUC119转化100 μl 细胞时，转化效率可达1×107 cfu/μg。
E. coli CJ236 Competent Cells适用于制备含有dU的ssDNA。通过CJ236转化后富集的ssDNA，可用于Kunkel法进行定点突变。
 
■ 细胞浓度
1 – 2×109 Bacteria/ml
 
■ Genotype
E. coli CJ236 : dut1, ung1, thi-1, recA1 / pCJ105 (F’ camr)
 
■ 保存
-80℃。
注意：如果不在-80℃下保存，转化效率将会降低。此时，在使用前，请使用附带的pUC119对照质粒来验证细胞的转化效率。不能液氮保存。
 
■ 转化效率
转入1 ng 的pUC119，涂于含有Amp+ 的选择培养基进行筛选。
转化效率 : >1 x 107 cfu/μg pUC119
 
■ 注意事项
1. 将感受态细胞从-80℃冷冻取出后请立即置于干冰/乙醇中。使用前保存于干冰/乙醇中。
2. 可使用microcentrifuge tubes代替Falcon tubes (CORNING #352059或352057)，但效率可能会降低。
3. 当使用100 μl感受态细胞时，加入不超过10 ng的高纯度DNA样品。否则转化效率会降低。
4. 当改变感受态细胞数量或tubes类型时，适当调整反应条件。例如，当使用microcentrifuge tubes时，42℃放置60秒。
5. L-broth 或φb-broth可替代SOC培养基。此时，转化效率可能会降低。
   ·L-broth : Ingredient per liter water  
  Tryptone 10 g  
  Yeast extract 5 g  
  NaCl 5 g  
    用1 N NaOH调整pH到7.5并高压灭菌。
   ·φ b-broth: Ingredient per liter water  
  Tryptone 20 g  
  Yeast extract 5 g  
  MgSO4·7H2O 5 g  
    用1 N KOH调整pH到7.5并高压灭菌。
6. 稀释时使用SOC培养基。
7. 建议在选择培养基中加入 Chloramphenicol (30 μg/ml) 以保证F’ 质粒稳定。
8. YT soft agar: Ingredient per 100 ml water  
  Tryptone 0.8 g  
  Yeast extract 0.5 g  
  NaCl 0.5 g  
    用1 N NaOH调整pH到7.6，加入agar至浓度为0.6%，并高压灭菌。
9. YT-plate: Ingredient per liter water  
  Tryptone 8 g  
  Yeast extract 5 g  
  NaCl 5 g  
    用1 N NaOH调整pH到7.5，加入agar至浓度为1.5%，并高压灭菌。
10. 制备感受态细胞。
11. 不建议将解冻的感受态细胞再次冷冻保存。但是，如果再次冻结不可避免，将细胞置于干冰/乙醇中迅速冷冻，置于-80℃保存。但是，转化效率可能会降低至少一个数量级。
 
 

ECOS(TM) Competent E.coli JM109 品牌：Nippon Gene

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ECOS(TM) Competent E.coli JM109

品牌：Nippon Gene
CAS No.：
储存条件：-80℃
纯度：–
产品编号

(生产商编号)

 等级 规格 运输包装 零售价(RMB) 库存情况 参考值

317-06246

 – 50uL×40 – 咨询 – –


* 干冰运输、大包装及大批量的产品需酌情添加运输费用


* 零售价、促销产品折扣、运输费用、库存情况、产品及包装规格可能因各种原因有所变动，恕不另行通知，确切详情请联系上海金畔生物科技有限公司。

Competent Cell Preparation Kit酶试剂盒Takara Clontech

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Competent Cell Preparation Kit
品牌 Code No. 产品名称 包装量 价格（元） 说明书 数量
Takara 9139 Competent Cell Preparation Kit 200 Rxns ￥190 Competent Cell Preparation Kit Competent Cell Preparation Kit Competent Cell Preparation Kit
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■ 制品内容 (200 次量)
Solution A 20 ml
Solution B 20 ml
 
■ 制品说明
大肠杆菌经过处理后可以摄取外源DNA (Plasmid DNA、Phage DNA等)，处于这种状态的细胞称为感受态细胞 (Competent Cell)。在基因工程实验中，经常要使用各种感受态细胞进行DNA的转化操作。
实验使用的感受态细胞的来源大体可以分为两种：一种是购买商品化的感受态细胞，但商品化感受态细胞成本高、运输及保存有一定困难 (超低温)；另一种是自己制备感受态细胞，实验人员自己制作感受态细胞时，往往受到各种试剂及实验条件等限制，制备的感受态细胞效率低，达不到实验要求。
Competent Cell Preparation Kit是一种方便、高效、快速制备感受态细胞的试剂盒。使用本试剂盒制备的感受态细胞可以满足大多数实验的需要，并且适用于大多数常用的大肠杆菌，例如：E.coli DH5α、JM109、CJ236、HB101、MV1184、BMH71–18mutS等，转化效率均可以达到1×106 cfu/μg pUC19以上 (转化效率根据大肠杆菌细胞系及转化用DNA不同稍有差异)。使用本试剂盒制备的感受态细胞可以在-80℃保存一年。
 
■ 保存
4℃。
 
■ 注意事项
1. 制作感受态细胞时应使用专用的玻璃器皿或塑料容器。洗刷这些玻璃器皿或塑料容器时应尽量洗净。由于微量的洗涤剂或污染物都可能降低感受态细胞的转化效率，因此在洗刷完用于制作感受态细胞的专用玻璃器皿或塑料容器后，建议用去离子水浸泡一晚，然后再充分洗净。
2. 制作感受态细胞时使用的菌种，不应使用4℃或常温保存的传代细菌。应使用-70℃保存的菌种，在LB/抗生素平板培养基上分级划线培养后，挑取单菌落。使用这种菌种制作的感受态细胞，能提高转化效率。
3. 培养感受态细胞制备用菌体时，OD600值的测定应随时进行，以使OD600值控制在0.35～0.5之间。如果OD600值超出此范围，可能降低感受态细胞的转化效率。
4. 用于感受态细胞制备的菌体培养停止后要立即处理，不要将培养液过长时间室温放置，在冰中放置时也不要时间过长。
5. 感受态细胞的制备操作过程中，离心后弃上清时要尽量弃尽，否则会降低感受态细胞的转化效率。
6. 使用Solution A、Solution B悬浮沉淀时要用手指轻轻弹动Microtube管壁，禁止剧烈振荡操作。
7. 为了有效确认感受态细胞的转化效率，建议制作一批高纯度的质粒DNA分装低温 (-20℃) 保存，用作阳性对照，以确认每批制作的感受态细胞的转化效率。