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E.coli CJ236 Competent Cells酶试剂盒Takara Clontech

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E.coli CJ236 Competent Cells
品牌 Code No. 产品名称 包装量 价格（元） 说明书 数量
Takara 9053 E.coli CJ236 Competent Cells 100 μl × 10 ￥502 E.coli CJ236 Competent Cells E.coli CJ236 Competent Cells E.coli CJ236 Competent Cells
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■ 制品内容E.coli CJ236 Competent Cells
E.coli CJ236 Competent Cells 100 μl × 10
pUC119 plasmid ( 0.1 ng/μl) 10 μl × 1
SOC Medium* 1 ml × 10
*SOC Medium:      2%   Tryptone
 0.5%   Yeast extract
 10 mM   NaCl
 2.5 mM   KCl
 10 mM   MgSO4
10 mM   MgCl2
 20 mM   Glucose
 
■ 制品说明
Takara公司在Hanahan’s method基础上进行了改良，制备出E.coli CJ236 Competent Cells，当1 ng pUC119转化100 μl 细胞时，转化效率可达1×107 cfu/μg。
E. coli CJ236 Competent Cells适用于制备含有dU的ssDNA。通过CJ236转化后富集的ssDNA，可用于Kunkel法进行定点突变。
 
■ 细胞浓度
1 – 2×109 Bacteria/ml
 
■ Genotype
E. coli CJ236 : dut1, ung1, thi-1, recA1 / pCJ105 (F’ camr)
 
■ 保存
-80℃。
注意：如果不在-80℃下保存，转化效率将会降低。此时，在使用前，请使用附带的pUC119对照质粒来验证细胞的转化效率。不能液氮保存。
 
■ 转化效率
转入1 ng 的pUC119，涂于含有Amp+ 的选择培养基进行筛选。
转化效率 : >1 x 107 cfu/μg pUC119
 
■ 注意事项
1. 将感受态细胞从-80℃冷冻取出后请立即置于干冰/乙醇中。使用前保存于干冰/乙醇中。
2. 可使用microcentrifuge tubes代替Falcon tubes (CORNING #352059或352057)，但效率可能会降低。
3. 当使用100 μl感受态细胞时，加入不超过10 ng的高纯度DNA样品。否则转化效率会降低。
4. 当改变感受态细胞数量或tubes类型时，适当调整反应条件。例如，当使用microcentrifuge tubes时，42℃放置60秒。
5. L-broth 或φb-broth可替代SOC培养基。此时，转化效率可能会降低。
   ·L-broth : Ingredient per liter water  
  Tryptone 10 g  
  Yeast extract 5 g  
  NaCl 5 g  
    用1 N NaOH调整pH到7.5并高压灭菌。
   ·φ b-broth: Ingredient per liter water  
  Tryptone 20 g  
  Yeast extract 5 g  
  MgSO4·7H2O 5 g  
    用1 N KOH调整pH到7.5并高压灭菌。
6. 稀释时使用SOC培养基。
7. 建议在选择培养基中加入 Chloramphenicol (30 μg/ml) 以保证F’ 质粒稳定。
8. YT soft agar: Ingredient per 100 ml water  
  Tryptone 0.8 g  
  Yeast extract 0.5 g  
  NaCl 0.5 g  
    用1 N NaOH调整pH到7.6，加入agar至浓度为0.6%，并高压灭菌。
9. YT-plate: Ingredient per liter water  
  Tryptone 8 g  
  Yeast extract 5 g  
  NaCl 5 g  
    用1 N NaOH调整pH到7.5，加入agar至浓度为1.5%，并高压灭菌。
10. 制备感受态细胞。
11. 不建议将解冻的感受态细胞再次冷冻保存。但是，如果再次冻结不可避免，将细胞置于干冰/乙醇中迅速冷冻，置于-80℃保存。但是，转化效率可能会降低至少一个数量级。
 
 

SHuffle T7 表达 E. coli 感受态细胞 货 号 #C3029J-NEB酶试剂 New England Biolabs

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产品资料 – 感受态细胞 – 蛋白表达菌株

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#C3029J
12 x 0.05 ml
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相关产品

SHuffle T7 表达 E. coli 感受态细胞

优点

 有助于细胞质中蛋白质二硫键的折叠
 T7 表达
 蛋白酶缺失的 B 菌株
 BL21 源增强型菌株
 无动物来源产品

概述

T7 表达菌株，在细胞质中正确折叠含有多个二硫键的重组蛋白的能力更强。

基因型

fhuA2 lacZ::T7 gene1 [Ion] ompT ahpC galλatt::pNEB3-r1-cDsbC (SpecR, laclq) ΔtrxB sulA11 R(mcr-73-::miniTn10–TetS)2 [dcm] R(zgb-210::Tn10–TetS)endA1 Δgor Δ(mcrC-mrr)114::IS10

转化效率

1 x 107 cfu/μg pUC19 DNA

抗性

T1 噬菌体（fhuA2）、呋喃妥因、链霉素*、壮观霉素

敏感性

氨苄青霉素、氯霉素、卡那霉素、四环素
*可能观察到对低水平的链霉素存在抗性。

Lemo21(DE3) E. coli 感受态细胞 货 号 #C2528J-NEB酶试剂 New England Biolabs

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优点

 表达问题蛋白
 表达膜蛋白
 细胞周质表达的理想选择
 表达毒性蛋白
 表达存在可溶性问题的蛋白

概述

Lemo21（DE3）E. coli 感受态细胞为 T7 可控表达菌株，专为表达具有挑战性的重组蛋白而设计。它作为 BL21（DE3）的衍生菌株，不仅继承了其特点，还能够通过改变 T7 溶菌酶（lysY）的水平以控制表达水平，T7 溶菌酶为 T7 RNA 聚合酶的天然抑制剂。对蛋白表达的精准控制使得 Lemo21（DE3）成为表达膜蛋白、毒性蛋白、分泌蛋白以及存在可溶性问题蛋白的理想选择。

基因型

fhuA2 [lon] ompT gal (λ DE3) [dcm]ΔhsdS/ pLemo(CamR) λ DE3 = λ sBamHIo ΔEcoRI-Bint::(lacI::PlacUV5::T7 gene1) i21 Δnin 5pLemo = pACYC184-PrhaBAD-lysY

特性

• BL21（DE3）源增强型菌株
• 精准的表达调控
• 在 T7 菌株中表达范围最宽（0-2,000 μM 鼠李糖）
• 消除了形成包涵体的潜在可能

转化效率

高效级：1–3 x 107 cfu/μg pUC19 DNA

抗性

T1 噬菌体（fhuA2），氯霉素

敏感性

 氨苄青霉素、卡那霉素、呋喃妥因、壮观霉素、链霉素、四环素

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随产品提供

 L-鼠李糖溶液

pUC19 对照 DNA

SHuffle T7 E. coli 感受态细胞 货 号 #C3026J-NEB酶试剂 New England Biolabs

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#C3026J
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优点

 有助于细胞质中蛋白质二硫键的折叠
 T7 表达
 K12 菌株
 无动物来源产品

概述

T7 表达菌株，在细胞质中正确折叠含有多个二硫键重组蛋白的能力更强。

基因型

F´ lac, pro, lacIq / Δ(ara-leu)7697 araD13fhuA2 lacZ::T7 gene1 Δ(phoA)Pvull phoR ahpC* galE(or U) galKλatt::pNEB3-r1-cDsbC (SpecR, laclq) ΔtrxBrpsL150(StrR)Δgor Δ(malF)3

转化效率

1 x 106 cfu/μg pUC19 DNA

抗性

T1 噬菌体（fhuA2）、呋喃妥因、壮观霉素、链霉素

敏感性

氨苄青霉素、氯霉素、卡那霉素、四环素
* 可能观察到对低水平的链霉素存在抗性。

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LSL-LG-0528

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