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细菌表达
品牌	Code No.	产品名称	包装量	价格（元）	说明书	数量
Clontech	630050	Reef Coral Fluorescent Protein Vector Set	Each	￥68,703
Clontech	632468	Living Colors pAcGFP1 Vector	20 μg	￥7,433
Clontech	632440	pAmCyan Vector	20 μg	￥7,433
Clontech	632451	pAsRed2 Vector	20 μg	￥7,433
Clontech	632412	pDsRed-Express Vector	20 μg	￥7,433
Clontech	632535	pDsRed-Express2 Vector	20 μg	￥7,206
Clontech	632467	pDsRed-Monomer Vector	20 μg	￥7,433
Clontech	632404	pDsRed2 Vector	20 μg	￥7,433
Clontech	632553	pE2-Crimson Vector	20 μg	￥7,433
Clontech	632370	pGFP Vector	20 μg	￥6,676
Clontech	632312	pGFPuv Vector	20 μg	￥6,676
Clontech	632410	pHcRed1 Vector	20 μg	￥7,433
Clontech	632446	pZsGreen Vector	20 μg	￥7,433
Clontech	632443	pZsYellow Vector	20 μg	￥7,433
Clontech	632528	pmBanana Vector	20 μg	￥6,676
Clontech	632522	pmCherry Vector	20 μg	￥6,676
Clontech	632548	pmOrange2 Vector	20 μg	￥7,433
Clontech	632527	pmPlum Vector	20 μg	￥6,676
Clontech	632526	pmRaspberry Vector	20 μg	￥6,676
Clontech	632530	pmStrawberry Vector	20 μg	￥6,676
Clontech	632531	ptdTomato Vector	20 μg	￥6,676

注意：购买以上产品（除632370、632312外），需要填写专利确认书

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腺病毒表达系统3
品牌	Code No.	产品名称	包装量	价格（元）	说明书	数量
Clontech	632269	Adeno-X Adenoviral System 3 (CMV)	10 Rxns	￥14,907
Clontech	632267	Adeno-X Adenoviral System 3 (CMV, Green)	10 Rxns	￥16,432
Clontech	632268	Adeno-X Adenoviral System 3 (CMV, Red)	10 Rxns	￥16,432
Clontech	632266	Adeno-X Adenoviral System 3 (Universal)	10 Rxns	￥14,907
Clontech	632264	Adeno-X Adenoviral System 3 (Universal, Green)	10 Rxns	￥16,432
Clontech	632265	Adeno-X Adenoviral System 3 (Universal, Red)	10 Rxns	￥16,432

由于产品升级，从即日起，您订购的以上产品中的组分In-Fusion HD Cloning Kit (Code No. 639648)将陆续替换为性能更高的In-Fusion® Snap Assembly Master Mix (Code No. 638947)，该组分数量保持不变，请以实际收到的产品为准。如需含HD组分的旧版说明书或产品组分列表文件，请邮件联络sales@jinpanbio.com

注意：购买632267、632268、632264、632265时，需要填写专利确认书

Adeno-X adenoviral system 3是非常出色的腺病毒基因导入系统，为重组腺病毒载体构建提供了更简单、更快速、更有效的方法。有7种不同的系统形式可供选择，包括先进的四环素诱导表达系统、荧光标记可选择的组成型表达系统、允许克隆和表达您选择的任何完整表达框的无启动子系统。

更为简便的腺病毒表达系统

该系统依赖于In-Fusion克隆技术进行载体克隆，使用这项技术能够正确识别和融合两个线性DNA分子之间的15 bp同源序列。要产生与预线性化pAdeno-X载体同源的短区域，只需要在扩增目标基因的PCR引物上添加15 bp的附加序列即可。然后，添加线性化载体DNA和目标基因DNA建立In-Fusion克隆反应，克隆反应时间仅需要15 分钟，反应结束后转化Stellar感受态细胞。In-Fusion克隆技术是一种定向克隆技术，并且90％的克隆包含正确的插入片段。

四环素诱导表达系统

当您将目的基因克隆到pAdenoX-Tet3G中时，您正在创建一个对基因表达控制更为严紧，更为敏感的诱导表达系统。由于Tet-On-3G转录激活蛋白质和启动子PTRE3G调控的目标基因包含在同一个腺病毒载体上，因此严紧的强力霉素诱导的调控表达和组成性表达一样容易实现。使用这个系统可以实现高达3,000倍的诱导表达。

可将任何表达框克隆到通用载体中

除了CMV表达系统，我们还创建了通用的腺病毒系统，其载体的克隆位点没有启动子和polyA信号。只需要从预先存在的构建体中扩增整个表达框（从启动子到polyA），然后使用In-Fusion克隆技术将其克隆至腺病毒载体中即可。通用系统适用于使用更适合您的目标细胞类型的启动子来进行表达，如EF1α或组织特异性启动子。

Overview

· 腺病毒载体克隆，就像其它任何质粒克隆一样简单快速 · 直接克隆到pAdenoX vector，无需穿梭载体 · 只需2-3天就可获得90%以上的克隆效率（其他系统至少需要8天时间） · 形式高度灵活——使用现有表达框，或者自行创建一个新表达框而无需亚克隆 · 转导分裂细胞和非分裂细胞 · 高滴度，高表达，广泛的宿主范围 · 还可提供四环素诱导表达腺病毒系统

TECH NOTE

Fastest,easiest adenoviral system ever

Tetracycline-inducible expression using an all-in-one adenovirus vector

FAQs

Questions about adenoviral vector systems, purification and titration

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杆状病毒表达系统
品牌	Code No.	产品名称	包装量	价格（元）	说明书	数量
Clontech	631401	BacPAK6 DNA (Bsu36 I digest)	5 Transfections	￥6,798
Clontech	631721	X-GLUC	100 mg	￥5,354

Code No. 产品名称 631401   BacPAK6™ DNA (Bsu36 I digest) 631721   X-GLUC

产品介绍

与细菌表达系统相比，在昆虫细胞中产生的重组蛋白质的翻译后加工和折叠更类似于哺乳动物过程，有功能的目的蛋白质的产量通常要大得多。因此，为了生产大量的重组蛋白质，许多研究者已经转向杆状病毒表达系统。

BacPAK法

BacPAK系统采用苜蓿银纹夜蛾核型多角体病毒（AcMNPV）在昆虫细胞中表达目标蛋白质。首先把目的基因插入到穿梭载体中，然后与线性化的BacPAK6病毒DNA共转染至昆虫宿主细胞。这个特殊设计的BacPAK6病毒DNA能够迫使病毒和载体之间发生重组，实现高的重组效率。重组之后挑选并纯化几个噬菌斑，验证重组表型。新分离得到的重组病毒就可以扩增并且感染昆虫细胞产生大量的目的蛋白质。     如有需要，可以使用产品附带的pBacPAK8-GUS作为共转染步骤的阳性对照。该载体具有大肠杆菌β-葡糖醛酸糖苷酶（GUS），克隆在多角体蛋白质启动子的下游。pBacPAK8-GUS与BacPAK6病毒DNA重组后能够表达β-葡糖苷酸酶，该酶可催化底物X-GLUC显现蓝色。

产品特点

● 每L培养基表达的蛋白质量最高可达500 mg     ● 重组效率>90%     ● 蛋白质折叠正确     ● 可以有效表达具有生物活性的蛋白质     ● 真核蛋白质的翻译后修饰

产品应用

在昆虫细胞中表达重组蛋白质

BacPAK6 Viral DNA 图谱

操作流程示意图

In-Fusion Ready BacPAK载体和杆状病毒表达系统。将含有目的基因的PCR片段直接克隆到In-Fusion Ready BacPAK载体以构建N末端或C末端蛋白质的表达载体。将验证过的克隆与BacPAK6病毒DNA共转染至昆虫细胞中，通过AcMNPV序列二者进行重组，被感染的昆虫细胞就会随着病毒的扩增而产生重组蛋白质，最后使用TALON技术对其进行纯化。

实验例1

使用表达水母绿色荧光蛋白质（AcGFP1）的重组杆状病毒载体感染昆虫细胞。使用In-Fusion Ready BacPAK载体构建重组杆状病毒，用以表达带有N末端标签的AcGFP1。被感染的Sf9细胞能够表达高水平的AcGFP1并发出强烈的荧光，流式细胞术的检测结果显示，被感染细胞的平均荧光强度是未感染对照组的约440倍。

实验例2

使用BacPAK杆状病毒表达系统生产重组病毒制备蛋白质。通过共转染载体和BacPAK6病毒DNA (Bsu36 I消化)产生重组病毒，然后在Sf21细胞中进行扩增。感染48 hr后裂解细胞进行SDS PAGE检测。

泳道1：未被感染的Sf21细胞 泳道2：野生型AcMNPV病毒感染的Sf21细胞 泳道3：未重组BacPAK6病毒感染的Sf21细胞 泳道4：BacPAK8-GUS重组病毒感染的Sf21细胞 泳道5：纯化的CAT蛋白质 泳道6：BacPAK8-CAT重组病毒感染的Sf21细胞 泳道M：分子量marker

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