OneTaq® 一步法 RT-PCR 试剂盒 货 号 #E5315S-NEB酶试剂 New England Biolabs

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OneTaq® 一步法 RT-PCR 试剂盒                              收藏

OneTaq® 一步法 RT-PCR 试剂盒                货   号                  #E5315S OneTaq® 一步法 RT-PCR 试剂盒                货   号                  #E5315S OneTaq® 一步法 RT-PCR 试剂盒                货   号                  #E5315S OneTaq® 一步法 RT-PCR 试剂盒                货   号                  #E5315S

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相关产品

ProtoScript II cDNA 第一链合成试剂盒  

ProtoScript II 反转录酶
小鼠 RNase 抑制剂
Quick-Load 紫色 2-Log DNA Ladder
OneTaq 热启动 DNA 聚合酶

概述

OneTaq 一步法 RT-PCR 试剂盒为终点检测RNA 提供了高效、灵敏的检测方法。使用基因特异性的引物,将 cDNA 合成和 PCR 反应放在单管中完成,大大简化 RT-PCR 操作步骤。试剂盒包含三个优化的混合液:OneTaq 一步法酶混合液、OneTaq 一步法反应混合液和 OneTaq 一步法 Quick-Load 反应混合液。酶混合液包含 ProtoScriptII 反转录酶、小鼠 RNase 抑制剂和 OneTaq热启动 DNA 聚合酶。ProtoScript II 反转录酶是 MMuLV反转录酶的突变体,其降低 RNase H 活性且提高热稳定性。OneTaq 热启动 DNA 聚合酶是热启动 Taq DNA 聚合酶和一个有校读功能的 DNA 聚合酶混合液,无需优化就可得到高产量扩增产物。OneTaq 一步法 RT-PCR 试剂盒最长扩增长度达 9 kb。试剂盒配有两个优化的反应混合液:OneTaq 一步法反应混合液和 Quick-Load OneTaq 一步法反应混合液。反应混合液为 cDNA 合成和 PCR 扩增提供稳定的反应条件。独特的 Quick-Load OneTaq 一步法反应混合液包含染料,不仅在建立反应时起到指示作用,还可直接凝胶上样。总 RNA 或 mRNA 都可作为模板。单次反应能检测到低至 0.1 pg 的 GAPDH 基因。检测靶 RNA 长达 9kb。OneTaq 一步法 RT-PCR 试剂盒一次可以检测 2或 3 个靶基因.

OneTaq 一步法 RT-PCR 试剂盒组成:

– OneTaq 一步法酶混合液
– OneTaq 一步法反应混合液
– Quick-Load OneTaq 一步法反应混合液
– 无核酸酶污染的水
OneTaq® 一步法 RT-PCR 试剂盒                货   号                  #E5315S
 
检测不同长度的 RNA 模板。在 50 μl 反应体系中加入
约 100 ng 来源于 Jurkat 总 RNA,按照标准操作流程进
行反应。目标序列大小为 Lane 1:0.7 kb、Lane 2:1.1
kb、Lane 3:1.9kb、Lane 4:2.3 kb、Lane 5:2.5 kb、Lane
6:5.5 kb、Lane 7:7.6 kb 和 Lane 8:9.3 kb。Marker M 为
Quick-Load 2-Log DNA ladder(NEB # M0469)

 
 

Luna® 探针一步法 RT-qPCR 试剂盒(无 ROX) 货 号 #E3007E-NEB酶试剂 New England Biolabs

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#E3007E
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特性

 使用探针法 qPCR,快速、灵敏、精准的对目标 RNA 进行检测和定量

 选择更简单
 ·适用于不需要 ROX 染料校正的仪器
 ·预混液试剂和便捷的操作的流程使反应体系的建立更便捷
 ·无干扰的可见示踪染料可避免加样错误
     
        产品性能优异

 · Luna® 系列产品均经过严格测试,以优化产品的特异性、灵敏度、准确性和重复性
 · 该产品对于不同来源的样品性能稳定
 · 通过与市面上其它 qPCR 和 RT-qPCR 试剂的综合评测,展现了 Luna 产品的卓越性能
 
        使用 Luna 温启动反转录酶优化您的 RT-qPCR 实验
 · 新型、热稳定反转录酶(RT)有效改善实验表现
 · 温启动反转录酶和热启动 Taq 酶共同提升反应特异性和功效

 

概述

 Luna 通用探针一步法 RT-qPCR 试剂盒(无 ROX)经过优化,适用于水解探针法的 RNA 实时定量。一步法 RT-qPCR 为 RNA 检测和定量提供了一种便捷、强大的方法。在同一管中,RNA 首先由反转录酶转化为 cDNA,然后使用 DNA 依赖型 DNA 聚合酶扩增 cDNA,从而可以进行 qPCR 定量。基于探针法的 qPCR / RT-qPCR 原理是利用聚合酶的 5´ → 3´ 外切酶活性,将淬灭的目标特异性探针切断发出荧光,并实时监测荧光值的增加,以测量 PCR 每个循环中的 DNA 扩增。在荧光信号显著超过背景荧光的位置,可以确定 Cq 值。Cq 值可用于评估两个或多个样品的靶基因相对丰度,通过已知稀释浓度样品的标准曲线,可对靶基因进行绝对定量。

 
在 Luna 通用探针一步法 RT-qPCR 试剂盒(无 ROX)中,热启动 Taq DNA 聚合酶与新型温启动反转录酶联合使用,利用可逆结合的核酸适配体抑制剂控制这两种酶的活性。这种温度依赖型激活可避免热循环之前的非特异性扩增,从而可以放心的在室温下建立反应体系。改造过的 Luna 温启动反转录酶的热稳定性比许多其它反转录酶更高,其最佳反应温度为 55℃。对于困难模板,可以升高反应温度至 60°C,且不会影响 Luna 性能。
 
注意:为确保 Luna 温启动反转录酶的完全激活,建议孵育温度不低于 50℃
 
Luna 通用探针一步法 RT-qPCR 试剂盒(无 ROX)浓度为 2×,包含热启动 Taq DNA聚合酶、dNTP 和所有必需的缓冲液成分。配方中不含校正染料,与不需要 ROX 校正的仪器兼容(如果需要 ROX 校正,可自行添加 ROX 染料)。反应预混液中的 dUTP 用于防止模板残留污染,非荧光可见示踪染料让反应的建立可视化。该可见染料与 qPCR 常用荧光基团的光谱没有重叠,因此不会干扰 qPCR 检测。
 
Luna 温启动反转录酶预混液的浓度为 20×,其中包含 Luna 温启动反转录酶以及用于防止 RNA 降解的小鼠 RNase 抑制剂(详情请见产品手册中的模板制备)。适用于各种 RNA 样品类型(总 RNA,poly(A)-RNA 等)和来源
 
图 1:Luna RT-qPCR 产品具有更高灵敏度、可重复性及更优异的表现。
 

 Luna® 探针一步法 RT-qPCR 试剂盒(无 ROX)            货   号                  #E3007E
使用 Luna 通用探针一步法 RT-qPCR 产品检测人 GAPDH 基因,模板为 8 个 10 倍梯度稀释的
Jurkat 总 RNA(1 μg– 0.1 pg),每个浓度的样品做 8 个重复。实验按照试剂盒建议的操作流程进行,反应中包含一个 55℃ 温育 10 分钟的反转录步骤以便于 Luna WarmStart 反转录酶发挥作用。NTC = 无模板对照。
 
图 2:NEB 的 Luna RT-qPCR 产品在多重检测中功效强大
Luna® 探针一步法 RT-qPCR 试剂盒(无 ROX)            货   号                  #E3007E
 使用 Luna Universal Probe One-Step RT-qPCR Kit 分别检测 GAPDH 基因、核糖体蛋白 L32g 和 PI-3 激酶相关的 SMG1 基因的表达情况。模板为 7 个分别 10 倍稀释的 Jurkat 总 RNA (1 μg – 1 pg),每个浓度的样品做 4 个重复。实验结果如上图所示,左边是叠加的结果,右边是每个基因单独的检测结果。无论是单重还是多重 qPCR,低拷贝的模板(SMG1)使用的引物浓度为 0.4 μM,高拷贝的模板(L32G 和 GAPDH)使用的引物浓度为 0.2 μM。单重 qPCR 可以直接比较,多重 qPCR 可以比较拷贝数的差异。NTC = 阴性对照
 
图 3:通过与市场上探针法 RT-qPCR 试剂相比,Luna 产品展现出更好的稳定性和特异性
Luna® 探针一步法 RT-qPCR 试剂盒(无 ROX)            货   号                  #E3007E
使用市售的 RT-qPCR 试剂对 7 个靶标(丰度、长度和 GC 含量不同)进行测试。测试均根据产品说明书进行,数据来源于两个实验人员。实验结果对扩增效率、低起始量和缺乏无模板对照的扩增进行了评估(ΔCq = 无模板对照的平均 Cq – 最低起始量的平均 Cq)。此外,还评估了稳定性、可重复性、所有扩增曲线质量(质量分数)。柱状图展示了达到可接受的性能标准的目标百分比。图中展示了 NEB 和其它供应商的结果:Quanta,qScript™ XLT 1-Step RT-qPCR ToughMix®;ABI,TaqMan® RNA-to-Ct 1-Step Kit;QIAGEN,QuantiFast® Probe RT-PCR Kit;Bio-Rad,iTaq™ Universal Probes One-Step Kit;Promega®,GoTaq® Probe 1-Step RT-qPCR System。NEB 的 Luna 通用探针一步法 RT-qPCR 试剂盒*性能优于其它测试试剂。


*数据来源于 Luna 通用探针一步法 RT-qPCR 试剂盒(NEB #E3006)。Luna 通用探针一步法 RT-qPCR 试剂盒(无 ROX)(NEB #E3007)的性能与之相同

 

试剂盒组分

 以下试剂随产品提供

 

储存温度 °C

浓度

Luna® Probe One-Step Reaction Mix No ROX

-20

2 X

Luna® WarmStart® RT Enzyme Mix

-20

20 X

Nuclease-free Water

-20

 

储存温度

 -20°C

Luna® 通用一步法 RT-qPCR 试剂盒 货 号 #E3005E-NEB酶试剂 New England Biolabs

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Luna® 通用一步法 RT-qPCR 试剂盒                              收藏

Luna® 通用一步法 RT-qPCR 试剂盒                 货   号                  #E3005E Luna® 通用一步法 RT-qPCR 试剂盒                 货   号                  #E3005E Luna® 通用一步法 RT-qPCR 试剂盒                 货   号                  #E3005E Luna® 通用一步法 RT-qPCR 试剂盒                 货   号                  #E3005E Luna® 通用一步法 RT-qPCR 试剂盒                 货   号                  #E3005E

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#E3005E
2500次反应
20,609.00

#E3005L
500次反应
5,349.00

#E3005S
200次反应
2,379.00

#E3005X
1000次反应
9,269.00

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相关产品

南极热敏 UDG

特性

Luna® 通用一步法 RT-qPCR 试剂盒                 货   号                  #E3005E

概述

一步法 RT-qPCR 为 RNA 检测和定量提供了方便、强大的方法。首先,RNA 在反转录酶的作用下被反转录为 cDNA,然后 cDNA 在 DNA 聚合酶的扩增作用下通过 qPCR 完成定量检测,而这一切都是在一管内完成。
Luna RT-qPCR 试剂盒包含一种新型的、应用核酸适配体技术设计的反转录酶,经基因工程改造提高其反应能力。Luna 温启动反转录酶及 Taq 热启动 DNA 聚合酶以及其试剂盒利用一种对温度敏感、可逆的适配体,在低于 45℃ 条件下,抑制其活性。因此,可以在室温下建立反应并抑制非特异性扩增。此外,温启动反转录酶具有更高的热稳定性,提升了在高温中的反应性能。
NEB Luna 通用一步法 RT-qPCR 试剂盒经过优化,可以对目标 RNA 序列进行染料法实时荧光定量检测,该试剂盒适用于具有 SYBR/FAM 通道的大部分 qPCR 仪器。
NEB Luna 通用探针一步法 RT-qPCR 试剂盒经过优化,使用水解探针法对目标 RNA 序列进行实时荧光定量检测。
Luna RT-qPCR 试剂盒中含有热启动 Taq DNA 聚合酶及独特校正染料,与多种 qPCR 仪器兼容,包括需要 ROX 校正的仪器,实验操作过程中不需要额外添加染料。预混液中包含 dUTP,qPCR 前使用NEB 的南极热敏 UDG 进行预处理以防止产物残留污染。预混液中还加有肉眼可见的蓝色染料,在向透明多孔 PCR 板中加样时起指示作用。快速、灵敏、精确的 Luna qPCR 产品必将成为您实时定
量实验的首选。

 

Luna 通用一步法 RT-qPCR 试剂盒组成:

Luna 通用一步法反应混合液
– Luna WarmStart 反转录酶混合液
– 无核酸酶污染的水

Luna探针一步法 RT-qPCR 4X 预混液,含 UDG(无 ROX) 货 号 #M3029E-NEB酶试剂 New England Biolabs

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Luna探针一步法 RT-qPCR 4X 预混液,含 UDG(无 ROX)                              收藏

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#M3029E
2000 rxns
26,279.00

#M3029L
500 rxns
8,379.00

#M3029S
200 rxns
3,719.00

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特性

 Luna 探针一步法 RT-qPCR 4X 预混液,含 UDG(无 ROX)可精准检测目标 RNA,多重扩增检测性能优异,一次可检测多达 5 个靶标。

        特性
适用于不需要 ROX 参比染料的仪器
4X 浓度的预混液可增加样品加入量,提高 RT-qPCR 灵敏度
一次可检测多达 5 个靶标,增加检测通量
Luna 温启动反转录酶与 Taq 热启动 DNA 聚合酶联合使用,提高反应特异性及稳定性,并可室温建立体系
预混液中包含热敏 UDG 和 dUTP,防止模板残留污染
无干扰的可见示踪染料避免加样错误
点击 COVID-19 research 了解 NEB 如何将多种 RT-qPCR 病毒检测方法用于新冠研究
 

概述

 Luna 探针一步法 RT-qPCR 4X 预混液,含 UDG(无 ROX)用于探针法实时荧光定量检测靶标 RNA。首先反转录酶将 RNA 转化为 cDNA,然后 DNA 聚合酶对 cDNA 进行扩增,完成靶标的实时荧光定量 PCR(qPCR),整个过程在单管内一次性完成。基于探针法的 qPCR / RT-qPCR 原理是利用聚合酶的 5´ → 3´ 外切酶活性,将淬灭的目标特异性探针切断发出荧光,并实时监测荧光值的增加,以测量每个循环中的 DNA 扩增。在荧光信号显著超过背景荧光的位置,可以确定 Cq 值。Cq 值可用于评估两个或多个样品的靶基因相对丰度。

 
Luna 探针一步法 RT-qPCR 预混液,含 UDG(无 ROX)为 4X 浓度,因此在靶标 RNA 量极低的应用中(例如:病原体检测),可提高样品加入量。通过对 5 个靶标进行不同浓度的线性、灵敏度检测,显示该产品在多重检测中性能更优。该预混液将一步法 RT-qPCR 所需组分整合到单个试管中,包括:Luna 温启动反转录酶、Taq 热启动 DNA 聚合酶、dNTP 和小鼠 RNase 抑制剂。Taq 热启动 DNA 聚合酶与新型温启动反转录酶联合使用,可通过基于适配体的可逆抑制来双重控制酶的活性。这种温控活化机制可避免热循环前的非特异扩增,从而让室温建立体系更安全。经改造的 Luna 温启动反转录酶具有更高的热稳定性,最佳反应温度为 55°C。该剂型不含参比染料,适用于不需要 ROX 参比染料的仪器(如需 ROX 矫正,可添加 ROX)。
 
RT-qPCR 的高灵敏度使得避免 DNA 污染尤为重要。由于先前扩增产物可作为后续反应的底物,因此反应体系加入 dUTP 和热敏 UDG 可防止模板残留污染。热敏 UDG 超过 50°C时会完全失活,因此对 qPCR 性能没有影响。
 
图 1:使用 Luna 探针一步法 RT-qPCR 4X 预混液,含 UDG(无 ROX)检测病毒 RNA
 
Luna探针一步法 RT-qPCR 4X 预混液,含 UDG(无 ROX)            货   号                  #M3029E
使用 Luna 探针一步法 RT-qPCR 4X 预混液,含 UDG(无 ROX)对 SARS-CoV-2(N1 基因)、Zika(POLY 基因)、Dengue(E 基因)、Chikungunya(E2 糖蛋白基因)进行 RT-qPCR 检测。配制 20 ul 反应体系,对 5-log 浓度梯度样品(100,000–10 拷贝/反应)进行扩增性能评估,实验仪器为 Bio-Rad® CFX96 实时荧光定量仪。扩增模板为:新冠状病毒(SARS-CoV-2)合成 RNA Control 2(Twist Biosciences,SKU:102024)、寨卡病毒(ZIKV)合成 RNA(ATCC® VR-3252SD™)、2 型登革热病毒(Dengue)合成 RNA(ATCC VR-3229SD™),基孔肯雅病毒(Chikungunya)合成 RNA(ATCC VR-3246SD™),上述模板分别稀释于 10 ng Jurkat 总 RNA(BioChain,#R1255815-50)中。结果显示:所有病毒靶基因扩增的灵敏度和线性度都非常理想。
 
图 2:Luna 探针一步法 RT-qPCR 4X 预混液,含 UDG,含或不含 ROX 剂型多重扩增性能一致
 
Luna探针一步法 RT-qPCR 4X 预混液,含 UDG(无 ROX)            货   号                  #M3029E
 
使用 Luna 探针一步法 RT-qPCR 4X 预混液,含 UDG,含或不含 ROX 剂型(NEB# M3019 和 NEB # M3029)对 5 log 浓度范围(100 ng至10 pg)的 Jurkat 总 RNA 进行多重 RT-qPCR,实验仪器为 Bio-Rad® CFX96 实时荧光定量仪。分别使用两种 Luna 试剂对 5 个人源靶基因制作扩增标准曲线。配制 20 μl 反应体系,其中引物和探针浓度均为 200 nM,使用产品推荐的循环条件。如 B 图所示,两种 Luna 试剂的 ACTIN(使用 Texas Red 标记探针)标准曲线重叠,这说明在没有 ROX 参比染料的情况下,扩增性能良好。如 C 图所示:针对 5 个靶基因的多重线性检测,均展现出良好的扩增效率和 R2 值。
 
图 3:探针一步法 RT-qPCR 4X 预混液,含 UDG,含或不含 ROX 剂型均可得到高质量结果
 
 Luna探针一步法 RT-qPCR 4X 预混液,含 UDG(无 ROX)            货   号                  #M3029E
两位实验人员分别按照操作说明书,使用 Bio-Rad CFX96 实时荧光定量仪器,用两种荧光定量试剂盒分别对 8 个不同丰度、长度和 GC 含量的靶标(通过不同颜色显示)进行一步法 RT-qPCR 测试。反应结果就以下方面进行评估:扩增效率、低样品量检测能力及无模板扩增值(ΔCq=无模板对照的平均 Cq-最低起始量的平均 Cq)。此外,基于前面的度量值(质量得分)还评估了扩增结果的一致性、可重复性和总体曲线质量。结果显示:Luna 探针一步法 RT-qPCR 4X 预混液,含 UDG(无 ROX)(NEB #M3029)和 Luna 探针一步法 RT-qPCR 4X 预混液,含 UDG(NEB #M3019)落在绿框里的结果数量相同,即两者检测性能一致。
 
该预混液包含无荧光的可见蓝色可见示踪染料,有助于透明管加样。该示踪染料与 qPCR 常用荧光基团的光谱没有重叠,也不会干扰实时检测。
 
图 4:Luna 探针一步法 RT-qPCR 4X 预混液,含 UDG(无 ROX)包含无干扰的可见蓝色示踪染料可避免加样错误

 
Luna探针一步法 RT-qPCR 4X 预混液,含 UDG(无 ROX)            货   号                  #M3029E

LunaScript® 一步法多重 RT-PCR 试剂盒 货 号 #E1555L-NEB酶试剂 New England Biolabs

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产品资料 – DNA聚合酶与扩增技术 – RT-PCR

LunaScript® 一步法多重 RT-PCR 试剂盒                              收藏

货 号
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#E1555L
250 reactions
9,629.00

#E1555S
50 reactions
2,479.00

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产品特性

·有独特的 Luna WarmStart 反转录酶和 Q5 热启动超保真 DNA 聚合酶
·可检测低至 0.01 pg 的人总 RNA
·多重检测能力适用于 ARTIC 测序方案
·适配体酶控技术为室温下建立反应体系及保持 24 小时的持久稳定打下基础
·在单独的闭合试管中一步完成 RT-PCR,即能节省时间、减少塑料用量,又能最大限度地减少污染。

产品概述

 LunaScript 一步法多重 RT-PCR 试剂盒为 cDNA 合成和 PCR 扩增提供了简化方案。其中的 5X 反应预混液含有 dNTPs,经优化适用于多重靶标检测,且操作便捷。其中的 25X 酶预混液含有 Luna WarmStart 反转录酶和 Q5 热启动超保真 DNA 聚合酶。适配体抑制酶活技术可对上述两种酶活进行双重温控,因此可室温建立反应体系,且预混体系可室温稳定保存 24 小时。该试剂盒具备强大的多重靶标扩增能力,适用于诊断、病原体检、病毒基因组测序等多种应用(例如:ARTIC SARS-CoV-2 测序方案,每个反应扩增 ~50 个扩增子)。

 
图 1:在单个 RT-PCR 反应中进行多重 RNA 靶标检测和鉴定
LunaScript® 一步法多重 RT-PCR 试剂盒            货   号                  #E1555L
LunaScript 一步法多重 RT-PCR 试剂盒 (NEB #E1555) 仅需添加 RNA 模板和基因特异性引物,即可在一次反应中对多个 cDNA 靶标进行合成和扩增。扩增后的 cDNA 产物可通过下游应用进行检测或鉴定,包括:二代测序、DNA 芯片、片段分析、电泳和传统的克隆/测序。
 
图 2:LunaScript 一步法多重 RT-PCR 试剂盒的灵敏度和多重检测性能卓越
LunaScript® 一步法多重 RT-PCR 试剂盒            货   号                  #E1555L
使用 LunaScript 一步法多重 RT-PCR 试剂盒 (NEB #E1555) 或 SuperScript IV One-Step RT-PCR System (Thermo Fisher Scientific) 对人脾总 RNA 的 7 个靶标(185–776 bp)进行扩增。取 40% 的 RT-PCR 反应产物进行琼脂糖凝胶(2%)电泳检测。LunaScript 使用标准反应条件:引物终浓度为 1 μM,退火时间为 1 分钟。SSIV 使用推荐反应条件无法扩增所有条带,因此还测试了其它关键参数:改变引物浓度和退火时间。结果显示:LunaScript 一步法多重 RT-PCR 试剂盒可成功扩增不同起始量 RNA 模板中的所有 7 个靶标,但 SuperScript IV One-Step RT-PCR System 经调整反应条件,甚至增模板量,都无法扩增所有靶标。
 
图 3:LunaScript 一步法多重 RT-PCR 试剂盒可完成 ARTIC SARS-CoV-2 测序方案
 LunaScript® 一步法多重 RT-PCR 试剂盒            货   号                  #E1555L
 使用 LunaScript 一步法多重 RT-PCR 试剂盒和来自 NEB (A) 或 IDT (B) ARTIC V3 引物进行多重扩增,扩增模板为 1000 拷贝 SARS-CoV-2 病毒 gRNA (ATCC VR-1986),该模板掺入到 100 ng 通用人类参考 RNA(Thermo Fisher Scientific®,QS0639)中使用。将 cDNA 合成体系一式两份成 12.5 μl 体系,分别使用引物库 1 和 2 进行扩增。反应条件为:55℃ 20 分钟(反转录),98℃ 1 分钟(RT 灭活/初始变性),之后进行 35 个循环的扩增:95℃ 15 秒,63℃ 5 分钟(退火和延伸)。

使用 NEBNext® ARTIC SARS-CoV-2 FS 文库制备试剂盒(适用于 Illumina 平台)和 1.3 μl 的上述扩增产物进行文库构建,使用 MiSeq® 仪器 (2X75 bp) 测序。为每个文库绘制每个扩增子的测序  Reads。使用 seqtk(250,000 read pairs)向下抽样 Reads 数,并使用 Bowtie 2 比对至 SARS-CoV-2 参考基因组(NCBI,NC_045512)。参考线表示 100 reads 的典型质量阈值。
 
图 4:试剂可室温放置长达 24 小时,RNA 的检测效果仍然灵敏和稳健
 LunaScript® 一步法多重 RT-PCR 试剂盒            货   号                  #E1555L
使用 LunaScript 一步法多重 RT-PCR 试剂盒 (NEB #E1555) 对 GAPDH 靶标(570 bp)进行扩增,样品为 0.01 ng-10 ng 的 Jurkat 总 RNA。反应体系在冰上建立并立即运行(对照)或在热循环前室温放置 1、4 或 24 小时。每种条件下都设有无模板对照(NTC)。结果显示:所有上样量均完成了高度灵敏和特异的靶标扩增,预混体系室温放置长达 24 小时后也达到了同样的效果。
 
图 5:LunaScript 与 OneTaq 一步法 RT-PCR 试剂盒的比较
 
 LunaScript® 一步法多重 RT-PCR 试剂盒            货   号                  #E1555L