5-甲基化-dCTP 货 号 #N0356S-NEB酶试剂 New England Biolabs

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#N0356S
1 μmol
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概述

dNTP 套装:
四种独立包装的超纯脱氧核苷三磷酸的溶液(dATP、dCTP、dGTP 和 dTTP)。每种的浓度为 100 mM。

dNTP 混合液:
含相同摩尔数的超纯 dATP、dCTP、dGTP 和 dTTP。每种的浓度为 10 mM。

rNTP 套装:
四种独立包装的核苷三磷酸溶液(ATP、CTP、GTP 和 UTP),pH 7.5,以钠盐形式存在。

rNTP 混合液:
含相同摩尔数的四种核苷三磷酸:rATP、rCTP、rGTP 和 rUTP。每种浓度为 25 mM(rNTP 总浓度相当于 100 mM)。

7-去氮-dGTP:
含有 5 mM 7-去氮-dGTP 的二锂盐溶液。

5-甲基-dCTP:
10 mM 溶液,pH 7.0。

dATP 溶液:

含有 100 mM dATP,pH 7.4 的钠盐溶液。

acyNTP 套装:
四种独立包装的 acyNTP (acyATP、acyCTP、acyGTP 和 acyTTP)。以干粉形式提供,加入 50 μl 蒸馏水或去离子水(Milli-Q®)后,acyNTP 的终浓度为 10 mM。

acyNTP 可作为链终止基团,因而可用于一般采用 ddNTP 的实验,如 DNA 测序和 SNP 分析。acyNTP 尤其适用于古生菌 DNA 聚合酶的反应,特别是 Therminator DNA 聚合酶。Therminator DNA 聚合酶经过基因工程改造后,拥有更强的掺入核苷酸类似物的能力,这些类似物的糖环发生了改变,如 rNTP,ddNTP,2´ 脱氧核苷酸,特别是 acy 碱基类似物。  

参考文献

有关该产品特性和应用的参考文献请登陆 www.neb-china.com,www.neb.com。  

dATP 溶液 货 号 #N0440S-NEB酶试剂 New England Biolabs

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dATP 溶液                              收藏

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#N0440S
25 μmol
659.00

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概述

dNTP 套装:
四种独立包装的超纯脱氧核苷三磷酸的溶液(dATP、dCTP、dGTP 和 dTTP)。每种的浓度为 100 mM。

dNTP 混合液:
含相同摩尔数的超纯 dATP、dCTP、dGTP 和 dTTP。每种的浓度为 10 mM。

rNTP 套装:
四种独立包装的核苷三磷酸溶液(ATP、CTP、GTP 和 UTP),pH 7.5,以钠盐形式存在。

rNTP 混合液:
含相同摩尔数的四种核苷三磷酸:rATP、rCTP、rGTP 和 rUTP。每种浓度为 25 mM(rNTP 总浓度相当于 100 mM)。

7-去氮-dGTP:
含有 5 mM 7-去氮-dGTP 的二锂盐溶液。

5-甲基-dCTP:
10 mM 溶液,pH 7.0。

dATP 溶液:

含有 100 mM dATP,pH 7.4 的钠盐溶液。

acyNTP 套装:
四种独立包装的 acyNTP (acyATP、acyCTP、acyGTP 和 acyTTP)。以干粉形式提供,加入 50 μl 蒸馏水或去离子水(Milli-Q®)后,acyNTP 的终浓度为 10 mM。

acyNTP 可作为链终止基团,因而可用于一般采用 ddNTP 的实验,如 DNA 测序和 SNP 分析。acyNTP 尤其适用于古生菌 DNA 聚合酶的反应,特别是 Therminator DNA 聚合酶。Therminator DNA 聚合酶经过基因工程改造后,拥有更强的掺入核苷酸类似物的能力,这些类似物的糖环发生了改变,如 rNTP,ddNTP,2´ 脱氧核苷酸,特别是 acy 碱基类似物。  

参考文献

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dGTP 溶液 货 号 #N0442S-NEB酶试剂 New England Biolabs

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dGTP 溶液                              收藏

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#N0442S
25 umol
759.00

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特性

 Ÿ   HPLC 纯度≥99%

Ÿ   应用于不依赖连接的克隆(LIC

Ÿ   本产品也在以下两种剂型中提供:dNTP 混合液(NEB #N0447)及 dNTP 套装(NEB #N0446

产品说明

 dGTP 溶液为 100 mM 超纯 dGTP 的钠盐溶液,pH 7.5,共 0.25 ml

稀释液

可使用无菌蒸馏水稀释,Milli-Q® 水稀释更佳,也可使用无菌 TE 稀释(10 mM Tris-HCl1 mM EDTApH 7.5))稀释。

dNTP 套装 货 号 #N0446S-NEB酶试剂 New England Biolabs

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dNTP 套装                              收藏

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#N0446S
每种 25 μmol
2,299.00

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概述

dNTP 套装:
四种独立包装的超纯脱氧核苷三磷酸的溶液(dATP、dCTP、dGTP 和 dTTP)。每种的浓度为 100 mM。

dNTP 混合液:
含相同摩尔数的超纯 dATP、dCTP、dGTP 和 dTTP。每种的浓度为 10 mM。

rNTP 套装:
四种独立包装的核苷三磷酸溶液(ATP、CTP、GTP 和 UTP),pH 7.5,以钠盐形式存在。

rNTP 混合液:
含相同摩尔数的四种核苷三磷酸:rATP、rCTP、rGTP 和 rUTP。每种浓度为 25 mM(rNTP 总浓度相当于 100 mM)。

7-去氮-dGTP:
含有 5 mM 7-去氮-dGTP 的二锂盐溶液。

5-甲基-dCTP:
10 mM 溶液,pH 7.0。

dATP 溶液:

含有 100 mM dATP,pH 7.4 的钠盐溶液。

acyNTP 套装:
四种独立包装的 acyNTP (acyATP、acyCTP、acyGTP 和 acyTTP)。以干粉形式提供,加入 50 μl 蒸馏水或去离子水(Milli-Q®)后,acyNTP 的终浓度为 10 mM。

acyNTP 可作为链终止基团,因而可用于一般采用 ddNTP 的实验,如 DNA 测序和 SNP 分析。acyNTP 尤其适用于古生菌 DNA 聚合酶的反应,特别是 Therminator DNA 聚合酶。Therminator DNA 聚合酶经过基因工程改造后,拥有更强的掺入核苷酸类似物的能力,这些类似物的糖环发生了改变,如 rNTP,ddNTP,2´ 脱氧核苷酸,特别是 acy 碱基类似物。  

参考文献

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dUTP 溶液 货 号 #N0459S-NEB酶试剂 New England Biolabs

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dUTP 溶液                              收藏

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#N0459S
25 μmol
769.00

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浓度

 A260 吸光度测定 dUTP 溶液浓度为 100 mM(+/- 5 mM)。

特性

  • HPLC 分析纯度 ≥99%
  • 可与 Taq DNA 聚合酶(NEB#M0273)或 Q5U® 热启动超保真 DNA 聚合酶(NEB#M0515)联合使用
  • 与南极热敏 UDG(NEB#M0372)联合使用时,可以防止 PCR 和 qPCR 等相关应用中引入残留污染

概述

该产品包含 100 mM 的超纯 dUTP 共 0.25 ml。dUTP 可以完全替代 dTTP,也可以添加到常规 dNTP 中使用。dUTP 可与聚合酶家族 A(例如 Taq 酶)或经修饰的聚合酶家族 B(例如 Q5U 热启动超保真 DNA 聚合酶)一起使用。Q5U 在尿嘧啶结合域中有一个突变,从而能够读取和扩增包含尿嘧啶和次黄嘌呤的模板。

 
简单操作方案:将 dUTP 以与其它核苷酸相同的浓度添加到扩增体系中(例如:dA/dC/dG/dT/dU=1:1:1:1:1)。
 
如实验需要其它摩尔比例(最高至 dU 完全取代 dT),则应根据反应需求配制核苷酸混合液。我们建议在使用 Taq 酶和 Q5U DNA 聚合酶时,每种 dNTP 的浓度至少是 0.2 mM。
 
随产品提供:
钠盐形式的超纯水,pH 7.5。
 
稀释液兼容性:
可使用无菌蒸馏水、最好是 Milli-Q® 水进行稀释,也可使用无菌TE[10 mM Tris HCl,1 mM EDTA(pH 7.5)]稀释。
 
 储存温度:
-20°C
 

acyNTP 套装 货 号 #N0460S-NEB酶试剂 New England Biolabs

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acyNTP 套装                              收藏

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#N0460S
每种 0.5 μmol
849.00

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概述

dNTP 套装:
四种独立包装的超纯脱氧核苷三磷酸的溶液(dATP、dCTP、dGTP 和 dTTP)。每种的浓度为 100 mM。

dNTP 混合液:
含相同摩尔数的超纯 dATP、dCTP、dGTP 和 dTTP。每种的浓度为 10 mM。

rNTP 套装:
四种独立包装的核苷三磷酸溶液(ATP、CTP、GTP 和 UTP),pH 7.5,以钠盐形式存在。

rNTP 混合液:
含相同摩尔数的四种核苷三磷酸:rATP、rCTP、rGTP 和 rUTP。每种浓度为 25 mM(rNTP 总浓度相当于 100 mM)。

7-去氮-dGTP:
含有 5 mM 7-去氮-dGTP 的二锂盐溶液。

5-甲基-dCTP:
10 mM 溶液,pH 7.0。

dATP 溶液:

含有 100 mM dATP,pH 7.4 的钠盐溶液。

acyNTP 套装:
四种独立包装的 acyNTP (acyATP、acyCTP、acyGTP 和 acyTTP)。以干粉形式提供,加入 50 μl 蒸馏水或去离子水(Milli-Q®)后,acyNTP 的终浓度为 10 mM。
acyNTP 可作为链终止基团,因而可用于一般采用 ddNTP 的实验,如 DNA 测序和 SNP 分析。acyNTP 尤其适用于古生菌 DNA 聚合酶的反应,特别是 Therminator DNA 聚合酶。Therminator DNA 聚合酶经过基因工程改造后,拥有更强的掺入核苷酸类似物的能力,这些类似物的糖环发生了改变,如 rNTP,ddNTP,2´ 脱氧核苷酸,特别是 acy 碱基类似物。 

参考文献

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3´-Biotin-GTP 货 号 #N0760S-NEB酶试剂 New England Biolabs

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3´-Biotin-GTP                              收藏

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#N0760S
0.5 μmol
3,929.00

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Description:

 3´-Biotin-GTP can be used with the Vaccinia Capping System (NEB #M2080),to cap 5´ ends of tri- or di- phosphorylated RNA (1). This enables capture of the RNA 5´ ends using streptavidin.

3´-Biotin-GTP            货   号                  #N0760S

 

  • Supplied in: Ultrapure water as a Triethylammonium salt at pH 7.0
    Molecular Formula: C31H50N11O19P3S
    Molecular Weight: 1005.78 g/mol
    Extinction Coefficient: λ260 = ~11,700 Lmol-1 cm-1 

 

Proterties and Usage

 Storage Temperature

  -20°C 

SARS-CoV-2 阳性对照(N 基因) 货 号 #N2117S-NEB酶试剂 New England Biolabs

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产品资料 – DNA聚合酶与扩增技术 – 阳性对照品

SARS-CoV-2 阳性对照(N 基因)                              收藏

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#N2117S
50 ul
839.00

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产品特点

·包含完整的核衣壳蛋白基因(N gene)
·含有 T7 RNA 启动子序列,可产生 RNA 转录本
·质粒骨架为 pUC19,可在大肠杆菌中增殖
·为 Luna® SARS-CoV-2 多重 RT-qPCR 检测试剂盒(NEB #E3019)的组分之一
 

产品描述

 SARS-CoV-2 阳性对照(N 基因)以质粒形式提供,其中含 SARS-CoV-2 N-基因(GenBankMN908947.3),以及 T7 RNA 启动子序列,如有需要可生成 RNA 转录本。该产品用于靶向 N 基因的 SARS-CoV-2 检测方法(如:RT-qPCRLAMP 等)的验证。浓度为 1,000,000 拷贝/μl

注意:在绝对定量实验中,不建议将该阳性对照的浓度作为绝对拷贝数。

链霉亲和素 货 号 #N7021S-NEB酶试剂 New England Biolabs

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产品资料 – DNA聚合酶与扩增技术 – DNA 处理(DNA 标记、末端平齐化等)

链霉亲和素                              收藏

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#N7021S
1 mg
779.00

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Description

A 52.8 kDa non-glycosylated protein with a very high affinity for biotin. Due to its high affinity for biotin, it is used to bridge biotinylated probes and biotinylated enzymes. 

Properties and Usage

Usage Concentration

1 mg/ml

Excitation

0nm

Storage Temperature

-20°C

Storage Conditions

140 mM NaCl
8 mM sodium phosphate
2 mM potassium phosphate
10 mM KCl

pH 7.4 @ 25°C 

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  • Phototope®-Star Detection Kit

M13KO7 辅助噬菌体 货 号 #N0315S-NEB酶试剂 New England Biolabs

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产品资料 – DNA修饰酶与克隆技术 – 其它

M13KO7 辅助噬菌体                              收藏

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#N0315S
1.8 ml
1,339.00

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特性

产生用于测序和突变的单链噬菌粒 DNA 

概述

 
M13KO7 是 M13 噬菌体。其具有 P15A 的复制起点和 Tn903 卡那霉素抗性基因,这两个片段插入 M13 的复制起点。 M13KO7 在没有噬菌粒 DNA的条件下也能复制。当存在一个携带有野生型的M13 或 f1 复制起点的噬菌粒时,单链噬菌粒可以完整包装,并分泌到培养基中。该特性使其便于生产用作突变和测序的单链噬菌粒 DNA。 M13KO7携带卡那霉素抗性标记。

来源

M13KO7 噬菌体上清按照标准程序分离自受侵染的 E. coli ER2738。 

浓度

1.0 X 1011 pfu/ml。 

注意事项

NEB 不推荐将 M13KO7 作为一个克隆载体使用。构建噬菌体展示文库,推荐使用 Ph.D.™ 肽库展示克隆系统(详见 251 页)。 

相关产品

抗 M13 pIII 单克隆抗体

M13mp18 单链 DNA 货 号 #N4040S-NEB酶试剂 New England Biolabs

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产品资料 – DNA修饰酶与克隆技术 – 克隆质粒 & DNA

M13mp18 单链 DNA                              收藏

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#N4040S
10 μg
519.00

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浓度

250 μg/ml 

分子量/长度

7,249 bases

HIPOLYPEPTON NS 大豆源多聚蛋白胨NS 品牌:Nihon Pharm


品牌:Nihon Pharm
CAS No.:
储存条件:室温
纯度:
产品编号

(生产商编号)

等级 规格 运输包装 零售价(RMB) 库存情况 参考值

393-02101

300 g 咨询


* 干冰运输、大包装及大批量的产品需酌情添加运输费用


* 零售价、促销产品折扣、运输费用、库存情况、产品及包装规格可能因各种原因有所变动,恕不另行通知,确切详情请联系上海金畔生物科技有限公司。

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HIPOLYPEPTON NS 大豆源多聚蛋白胨NS 品牌:Nihon Pharm


品牌:Nihon Pharm
CAS No.:
储存条件:室温
纯度:
产品编号

(生产商编号)

等级 规格 运输包装 零售价(RMB) 库存情况 参考值

391-02107

10 kg 咨询


* 干冰运输、大包装及大批量的产品需酌情添加运输费用


* 零售价、促销产品折扣、运输费用、库存情况、产品及包装规格可能因各种原因有所变动,恕不另行通知,确切详情请联系上海金畔生物科技有限公司。

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pMAL-c6T 载体 货 号 #N0378S-NEB酶试剂 New England Biolabs

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产品资料 – 蛋白表达和纯化技术 – 表达系统 :大肠杆菌

pMAL-c6T 载体                              收藏

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#N0378S
10 µg
1,739.00

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特性

 ·pMAL-c6T 是 NEBExpress® MBP 融合表达及纯化系统(NEB#E8201)中推荐的载体

 ·目标蛋白与 MBP 融合表达可显著增强其在大肠杆菌中的溶解度和正确折叠(1)
 ·载体包含 His-tag 和 TEV 蛋白酶识别位点,使用 TEV 蛋白酶(NEB#P8112)可将目标蛋白从 MBP 上切下来
 ·两步纯化:Amylose 树脂洗脱后进行 TEV 蛋白酶切割和 Ni 树脂分离,终产物为高纯度、无标签的靶蛋白
 ·经设计改造,MBP 可更紧密的结合到 Amylose 树脂上。
 ·具有氨苄青霉素抗性
 

概述

 pMAL-c6T 载体提供了一种从克隆基因或开放阅读框到蛋白表达的方法。克隆基因插入到大肠杆菌的 malE 基因下游,malE 基因编码麦芽糖结合蛋白(MBP),从而使 MBP 融合蛋白在细胞质中表达(1,2)。MBP 经设计改造,可更紧密的结合到 Amylose 树脂上。该方法利用 “tac” 强启动子和 malE 翻译起始信号,使克隆序列得到高水平表达(3,4),同时可利用 MBP 对麦芽糖的亲和力,一步纯化融合蛋白(5)。该载体表达 N 端六组氨酸标记的 malE 基因(缺少分泌信号序列),随后是包含 TEV 蛋白酶识别序列的多克隆酶切位点,以及三位终止密码子。从而可在纯化后,使用 TEV 蛋白酶将 MBP 从目标蛋白上切下来。该载体还携带 lacIq 基因,该基因编码 Lac 阻遏蛋白。在没有 IPTG 诱导的情况下,可使 Ptac 低水平表达

pMAL-c6T 载体            货   号                  #N0378S

pMAL-c6T 载体的 malE 基因上具有明确的信号序列缺失,箭头指示转录方向,多克隆酶切位点(MCS)中标注了限制性内切酶位点

产品来源
NEB-10 beta competent E. coli (pMAL-c6T)

亲和标记
麦芽糖结合蛋白(MBP)
 
储存温度
-20°C
 
序列信息
Fasta GenBank
 

pTXB1 载体 货 号 #N6707S-NEB酶试剂 New England Biolabs

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产品资料 – 蛋白表达和纯化技术 – 表达系统 :大肠杆菌

pTXB1 载体                              收藏

货 号
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#N6707S
10 μg
1,669.00

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相关产品

IMPACT™ 试剂盒
pTXB1 载体
pTYB21 载体
几丁质树脂
抗 CBD 单克隆抗体

特性

 单柱纯化且无需使用蛋白酶
 目的蛋白质不含来自载体的氨基酸
 可融合到目的蛋白的 N 端或 C 端
 重组蛋白的连接或标记
 可分离有或无 N 端甲硫氨酸的蛋白 

关于产品详细描述和 pTXB1 和 pTYB21 载体图谱,包括 MCS(多克隆酶切位点),请见目录 355-356 页。载体序列文件请登陆 www.neb-china.com,www.neb.com 查询。
 

概述

IMPACT(Intein Mediated Purificaiton with an Affinity Chitin-binding Tag)试剂盒利用经改良过的蛋白剪接元件(内含肽)进行一步亲和纯化重组蛋白(图1)。该系统与其它蛋白融合表达系统的主要区别在于:无需蛋白酶作用,即可将重组蛋白与其亲和标签(Tag)分离。

IMPACT 试剂盒能够融合表达含有内含肽及几丁质结合结构域(CBD)的蛋白,融合标签可以融合到目标蛋白的 C 端(pTXB1)或 N 端(pTYB21)(图 2)。在硫醇试剂(如 DTT)的参与下,内含肽进行特异性的自我剪切,释放出目的蛋白。pTXB1 载体还可用于表达和纯化 C 端含硫脂键的蛋白,并用于内含肽介导的蛋白连接(IPL,图 3)。IPL 反应,即表达蛋白连接,可通过一种天然肽键将 N 端为半胱氨酸的多肽或蛋白和一段细菌表达出的 C 端硫脂键蛋白连接起来,此反应可用于蛋白标记或半合成。有关 IMPACT 系统和 IPL 的更多信息请登陆 www.neb-china.com,www.neb.com 查询。

pTYB21 的内含肽标签包含酿酒酵母(Sce)VMA1 内含肽和几丁质结合域融合在目的蛋白的 N 末端。

pTXB1 是大肠杆菌表达载体,携带有一个小的蛋白自剪切元件即来自 Mycobacterium xenopi gyrA 基因的 mini 内含肽[Mxe GyrA 内含肽,22 kDa]。蛋白自剪切元件经修饰后与来自芽孢杆菌(Bacillus circulans)的几丁质结合域(CBD)一起共同形成一个内含肽标签。该标签可与几丁质珠(NEB #S6651)结合。使用硫醇试剂(如 DTT)或 MESNA(2-mercaptoethanesulfonic acid)(后续连接用)诱导内含肽自我剪切并释放出目的蛋白。

pTXB1 载体            货   号                  #N6707S 
图 1:单柱亲和纯化麦芽糖结合蛋白。泳道 1:未诱导细胞提取物。泳道 2:诱导表达融合蛋白细胞提取物。泳道 3:4℃ 过夜诱导裂解得到麦芽糖结合蛋白。泳道 4:麦芽糖结合蛋白偶联到含有 N 端半胱氨酸的肽链上。Marker M:蛋白分子量标准(NEB #P7703)。

pTXB1 载体            货   号                  #N6707S
图 2:IMPACT 系统流程图

pTXB1 载体            货   号                  #N6707S
图 3:内含肽介导的蛋白连接(IPL)流程图。

表 1:IMPACT 载体及其应用。

pTXB1 载体            货   号                  #N6707S
a实际切割效率取决于临近的残基和融合蛋白的折叠。DTT 仅用于蛋白纯化。MESNA 可以使分离的蛋白拥有一个 C-末端的巯酯键,可用于连接、标记和环化。c 半胱氨酸可用来替代 DTT。

iMPACT 试剂盒组成

– 大肠杆菌表达载体:pTXB1、pTYB21 和 pMXB10 对照载体
– 几丁质珠:纯化融合蛋白的亲和基质(结合容量 = 2 mg/ml)
– 抗 CBD 单克隆抗体
– DTT 与 SDS 上样缓冲液   

参考文献

关于本产品特点与应用的参考文献请登陆 www.neb-china.com,www.neb.com。   

pTYB21 载体 货 号 #N6709S-NEB酶试剂 New England Biolabs

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相关产品

IMPACT™ 试剂盒
pTXB1 载体
pTYB21 载体
几丁质树脂
 

特性

 单柱纯化且无需使用蛋白酶
 目的蛋白质不含来自载体的氨基酸
 可融合到目的蛋白的 N 端或 C 端
 重组蛋白的连接或标记
 可分离有或无 N 端甲硫氨酸的蛋白 

关于产品详细描述和 pTXB1 和 pTYB21 载体图谱,包括 MCS(多克隆酶切位点),请见目录 355-356 页。载体序列文件请登陆 www.neb-china.com,www.neb.com 查询。
 

概述

IMPACT(Intein Mediated Purificaiton with an Affinity Chitin-binding Tag)试剂盒利用经改良过的蛋白剪接元件(内含肽)进行一步亲和纯化重组蛋白(图1)。该系统与其它蛋白融合表达系统的主要区别在于:无需蛋白酶作用,即可将重组蛋白与其亲和标签(Tag)分离。

IMPACT 试剂盒能够融合表达含有内含肽及几丁质结合结构域(CBD)的蛋白,融合标签可以融合到目标蛋白的 C 端(pTXB1)或 N 端(pTYB21)(图 2)。在硫醇试剂(如 DTT)的参与下,内含肽进行特异性的自我剪切,释放出目的蛋白。pTXB1 载体还可用于表达和纯化 C 端含硫脂键的蛋白,并用于内含肽介导的蛋白连接(IPL,图 3)。IPL 反应,即表达蛋白连接,可通过一种天然肽键将 N 端为半胱氨酸的多肽或蛋白和一段细菌表达出的 C 端硫脂键蛋白连接起来,此反应可用于蛋白标记或半合成。有关 IMPACT 系统和 IPL 的更多信息请登陆 www.neb-china.com,www.neb.com 查询。

pTYB21 的内含肽标签包含酿酒酵母(Sce)VMA1 内含肽和几丁质结合域融合在目的蛋白的 N 末端。

pTXB1 是大肠杆菌表达载体,携带有一个小的蛋白自剪切元件即来自 Mycobacterium xenopi gyrA 基因的 mini 内含肽[Mxe GyrA 内含肽,22 kDa]。蛋白自剪切元件经修饰后与来自芽孢杆菌(Bacillus circulans)的几丁质结合域(CBD)一起共同形成一个内含肽标签。该标签可与几丁质珠(NEB #S6651)结合。使用硫醇试剂(如 DTT)或 MESNA(2-mercaptoethanesulfonic acid)(后续连接用)诱导内含肽自我剪切并释放出目的蛋白。

pTYB21 载体            货   号                  #N6709S 
图 1:单柱亲和纯化麦芽糖结合蛋白。泳道 1:未诱导细胞提取物。泳道 2:诱导表达融合蛋白细胞提取物。泳道 3:4℃ 过夜诱导裂解得到麦芽糖结合蛋白。泳道 4:麦芽糖结合蛋白偶联到含有 N 端半胱氨酸的肽链上。Marker M:蛋白分子量标准(NEB #P7703)。

pTYB21 载体            货   号                  #N6709S
图 2:IMPACT 系统流程图

pTYB21 载体            货   号                  #N6709S
图 3:内含肽介导的蛋白连接(IPL)流程图。

表 1:IMPACT 载体及其应用。

pTYB21 载体            货   号                  #N6709S
a实际切割效率取决于临近的残基和融合蛋白的折叠。DTT 仅用于蛋白纯化。MESNA 可以使分离的蛋白拥有一个 C-末端的巯酯键,可用于连接、标记和环化。c 半胱氨酸可用来替代 DTT。

iMPACT 试剂盒组成

– 大肠杆菌表达载体:pTXB1、pTYB21 和 pMXB10 对照载体
– 几丁质珠:纯化融合蛋白的亲和基质(结合容量 = 2 mg/ml)
– 抗 CBD 单克隆抗体
– DTT 与 SDS 上样缓冲液   

参考文献

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pTWIN1 载体 货 号 #N6951S-NEB酶试剂 New England Biolabs

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#N6951S
10 μg
1,589.00

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Description:

 pTWIN1 is an E. coli expression vector which can be used with the IMPACT™ Kit (NEB #E6901). pTWIN vectors are designed for protein purification or for the isolation of proteins with an N-terminal cysteine and/or a C-terminal thioester (1). A polylinker in the vector is designed for the in-frame fusion of a target gene between the modified Ssp DnaB (2) and Mxe GyrA inteins (3,4). The presence of the chitin binding domain from Bacillus circulans (5,6) facilitates purification. The double-stranded vector is 7,375 base pairs in length.

 

Features

    A pBR322 derivative 

  • The SapI sites should be used for directional cloning of both the 5´ and 3´ ends of an insert
  • Expression of the fusion gene is under the control of the T7 promotor (8) and is regulated by IPTG due to the presence of a lacI gene
  • Expression requires an E. coli host that carries the T7 RNA Polymerase gene [e.g., T7 Express Competent E. coli (High Efficiency) (NEB #C2566) or BL21(DE3) Competent E. coli (NEB #C2527) and derivatives] (9)
  • Origin of DNA replication from the bacteriophage M13 allows for the production of single-stranded DNA by helper phage superinfection of cells bearing the plasmid
  • Thiol-induced cleavage of the Mxe GyrA intein is dependent on the amino acids adjacent to the intein. The amino acid residues M or Y at the C-terminus of the target protein is recommended for use with this intein
  • Controllable cleavage of the Ssp DnaB intein is dependent on the amino acids adjacent to the intein. The amino acid residues CRA or GRA at the N-terminus of the target protein is recommended for use with this intein
  • Ampicillin resistance

Properties and Usage

 

Affinity Tag

Chitin-Binding Domain (CBD)

Storage Temperature

-20°C

pMAL-c5X 载体(停产,有替代) 货 号 #N8108S-NEB酶试剂 New England Biolabs

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停产通知:

 产品于2020 年 6 月 30 日停产,替代产品为:pMAL-c6T 载体(N0378)

概述

pMAL 载体用于 pMAL 蛋白融合表达和纯化系统(NEB #E8200)。利用“Ptac”强启动子和 MBP 起始

翻译信号,目的基因与 malE 基因(编码 MBP 蛋白)融合表达。同时,它们含有与 NEB 其它表达系统

相兼容的多克隆位点。pMAL-c5 载体删除了malE信号序列,融合蛋白将在细胞质中表达。pMAL-p5X 载

体含有 malE 信号序列,它将引导融合蛋白穿越质膜。pMAL-c5XHis 载体可以在其目的蛋白的 C – 末端

添加 6个his 标签。所有的载体都含有一段特异性蛋白酶识别位点序列,融合蛋白纯化后,通过蛋白酶可

将目的蛋白与 MBP 切割分离。[载体 pMALc5E含有一个肠激酶(NEB #P8070)的特异性切割位点;载

体 pMAL-c5X ,pMAL-p5X 和 pMAL-p5XHis含有一个 Factor Xa 蛋白酶(NEB #P8010)的特异性切割

位点.

浓度

145 ~ 240 μg/ml。 

参考文献

关于本产品特点与应用的参考文献请登陆 www.neb-china.com,www.neb.com。

 

推荐用于测序的引物(不随产品提供)如下:

正向引物(24-mer,位于 malE 基因上游)
5´d(GGTCGTCAGACTGTCGATGAAGCC)3´

反向引物(24-mer,位于多克隆位点下游)

5´d(TGTCCTACTCAGGAGAGCGTTCAC)3´ 

pMAL-p5X 载体(停产) 货 号 #N8109S-NEB酶试剂 New England Biolabs

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pMAL-p5X 载体(停产)                              收藏

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#N8109S
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停产通知:

 产品于2020 年 6 月 30 日停产

概述

pMAL 载体用于 pMAL 蛋白融合表达和纯化系统(NEB #E8200)。利用“Ptac”强启动子和 MBP 起始

翻译信号,目的基因与 malE 基因(编码 MBP 蛋白)融合表达。同时,它们含有与 NEB 其它表达系统

相兼容的多克隆位点。pMAL-c5 载体删除了malE信号序列,融合蛋白将在细胞质中表达。pMAL-p5X 载

体含有 malE 信号序列,它将引导融合蛋白穿越质膜。pMAL-c5XHis 载体可以在其目的蛋白的 C – 末端

添加 6个his 标签。所有的载体都含有一段特异性蛋白酶识别位点序列,融合蛋白纯化后,通过蛋白酶可

将目的蛋白与 MBP 切割分离。[载体 pMALc5E含有一个肠激酶(NEB #P8070)的特异性切割位点;载

体 pMAL-c5X ,pMAL-p5X 和 pMAL-p5XHis含有一个 Factor Xa 蛋白酶(NEB #P8010)的特异性切割

位点。] 

浓度

145 ~ 240 μg/ml。 

参考文献

关于本产品特点与应用的参考文献请登陆 www.neb-china.com,www.neb.com。

 

推荐用于测序的引物(不随产品提供)如下:

正向引物(24-mer,位于 malE 基因上游)
5´d(GGTCGTCAGACTGTCGATGAAGCC)3´

反向引物(24-mer,位于多克隆位点下游)

5´d(TGTCCTACTCAGGAGAGCGTTCAC)3´ 

5-甲基化-dCTP 货 号 #N0356S-NEB酶试剂 New England Biolabs

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产品资料 – 表观遗传学 – NEBNext ChIP-Seq文库制备试剂

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#N0356S
1 μmol (0.1 ml)
859.00

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特性

 生成胞嘧啶完全甲基化的 DNA

概述

胞嘧啶的甲基化修饰(C5)是一种非常重要的表观遗传学修饰。该修饰也被认为是TET(Ten-Eleven Tra-nslocation)家族蛋白及其协同的氧化途径的起始底物。5-甲基-dCTP 可以通过酶促反应将其自身掺入到  DNA 中,获得完全甲基化的胞嘧啶 DNA,该产品适用于各种生物化学及细胞学研究。
 
5-甲基-dCTP(2´ -脱氧-5-甲基胞苷 5´ 三磷酸)以溶液形式提供,浓度为 10 mM,pH 7。用 A260 测定核苷酸浓度。

分子式

C10H15N3O13P3(无酸)

浓度

10 mM 溶液。

分子量

481.1(按酸的形式)。

稀释兼容性

用无菌蒸馏水稀释,Milli-Q® 处理的水稀释最佳,或用无菌 TE [10 mM Tris-HCl,1 mM EDTA (pH 7.5)]。

质保声明

5-甲基-dCTP 不含核酸酶和磷酸酶。

核小体对照 DNA 货 号 #N1202S-NEB酶试剂 New England Biolabs

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产品资料 – 表观遗传学 – 组蛋白

核小体对照 DNA                              收藏

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#N1202S
0.2 nmol
1,519.00

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Description:

 Lytechinus variegatus 5SrDNA (1) of 208 bp is used for mononucleosome formation in a gel shift assay.

Source

 Plasmid (Litmus 29) containing five copies 5SrDNA is isolated from E. coli NEB 10-beta by a standard purification procedure, digested and 208 bp DNA purified

Proterties and Usage

Storage Temperature

-20°C

Storage Conditions

10 mM Tris-HCl 
1 mM EDTA 
pH 8.0 @ 25°C

 

HeLa 基因组 DNA 货 号 #N4006S-NEB酶试剂 New England Biolabs

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产品资料 – 表观遗传学 – 对照 DNA

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#N4006S
15 µg
1,299.00

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停产通知

 该产品于 2021 年 11 月 8 日停产

特性

 PCR
 SNP分析
 Southern 杂交
 基因组 DNA 文库构建
 甲基化特异性 PCR(MSP)
 重亚硫酸盐测序
 甲基化敏感的单核苷酸引物延伸(Ms-SNuPE)
 重亚硫酸结合限制分析(COBRA)
 重亚硫酸处理和 PCR 单链构象多态性分析(Bisulfite-PCR-SSCP/BiPS)

概述

NEB 提供一系列基因组 DNA(修饰和非修饰两种形式),可用作表观遗传学研究的对照品。所有对照     DNA 均遵循标准基因组纯化程序提取,不含蛋白和 RNA。所提供的对照 DNA 浓度为 100 μg/ml。

来源

HeLa(宫颈腺癌)细胞在 DMEM 和 10% 胎牛血清中培养至 100% 覆盖率时,使用标准基因组纯化方法提取基因组 DNA,酚抽提后,溶解于 10 mM Tris-HCl(pH 7.5)和 1 mM EDTA 溶液中。

A260/280

1.87

用途

基因组 DNA 底物

参考文献

有关该产品性质和应用的参考文献请登陆 www.neb-china.com,www.neb.com。

pCLuc-Basic 2 载体(已停产且无替代品) 货 号 #N0317S-NEB酶试剂 New England Biolabs

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产品资料 – 细胞分析 – Gaussia & Cypridina荧光素酶报告基因

pCLuc-Basic 2 载体(已停产且无替代品)                              收藏

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#N0317S
20 μg
.00

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克隆载体

pCLuc-Basic 2 载体不含启动子,将启动子或增强子克隆进入多克隆位点(MCS),便可进行启动子和/或增强子的活性测试。
 
pCLuc-Basic 2 携带有一个新霉素(Neomycin)抗性标记,用以产生稳定的转染细胞系。

对照质粒

pCMV-CLuc 2 对照质粒携带有一个组成型的巨细胞病毒(CMV)启动子,可在许多类型的细胞中启动高水平的表达。pCMV-CLuc 2 可以在转染实验中单独或与其它报告载体联合使用作为阳性对照。pCMV-CLuc 2 对照质粒也携带有一个新霉素(Neomycin)抗性标记,用以产生稳定的转染细胞系。
 
pSV40-CLuc 对照质粒在猿猴病毒 40(SV40)启动子控制下组成型表达 CLuc。可以作为转染实验中的阳性对照。该质粒不携带选择标记。

浓度

 500 μg/ml。

参考文献

关于该类产品性质和应用的文献,请登陆 www.neb-china.com,www.neb.com。

限制性酶切图谱

pCLuc-Basic 2 载体的详细描述和限制性酶切图谱请见 383 页。查看荧光素酶载体和对照质粒的序列文件,请登陆 www.neb-china.com,www.neb.com。

pSV40-CLuc 对照质粒(已停产且无替代品) 货 号 #N0318S-NEB酶试剂 New England Biolabs

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产品资料 – 细胞分析 – Gaussia & Cypridina荧光素酶报告基因

pSV40-CLuc 对照质粒(已停产且无替代品)                              收藏

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#N0318S
20 μg
.00

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克隆载体

pCLuc-Basic 2 载体不含启动子,将启动子或增强子克隆进入多克隆位点(MCS),便可进行启动子和/或增强子的活性测试。
 
pCLuc-Basic 2 携带有一个新霉素(Neomycin)抗性标记,用以产生稳定的转染细胞系。

对照质粒

pCMV-CLuc 2 对照质粒携带有一个组成型的巨细胞病毒(CMV)启动子,可在许多类型的细胞中启动高水平的表达。pCMV-CLuc 2 可以在转染实验中单独或与其它报告载体联合使用作为阳性对照。pCMV-CLuc 2 对照质粒也携带有一个新霉素(Neomycin)抗性标记,用以产生稳定的转染细胞系。
 
pSV40-CLuc 对照质粒在猿猴病毒 40(SV40)启动子控制下组成型表达 CLuc。可以作为转染实验中的阳性对照。该质粒不携带选择标记。 

浓度

500 μg/ml。

参考文献

关于该类产品性质和应用的文献,请登陆 www.neb-china.com,www.neb.com。

限制性酶切图谱

pCLuc-Basic 2 载体的详细描述和限制性酶切图谱请见 383 页。查看荧光素酶载体和对照质粒的序列文件,请登陆 www.neb-china.com,www.neb.com。
 

pCMV-CLuc 2 对照质粒(已停产且无替代品) 货 号 #N0321S-NEB酶试剂 New England Biolabs

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产品资料 – 细胞分析 – Gaussia & Cypridina荧光素酶报告基因

pCMV-CLuc 2 对照质粒(已停产且无替代品)                              收藏

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#N0321S
20 μg
.00

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克隆载体

pCLuc-Basic 2 载体不含启动子,将启动子或增强子克隆进入多克隆位点(MCS),便可进行启动子和/或增强子的活性测试。
 
pCLuc-Basic 2 携带有一个新霉素(Neomycin)抗性标记,用以产生稳定的转染细胞系。

对照质粒

pCMV-CLuc 2 对照质粒携带有一个组成型的巨细胞病毒(CMV)启动子,可在许多类型的细胞中启动高水平的表达。pCMV-CLuc 2 可以在转染实验中单独或与其它报告载体联合使用作为阳性对照。pCMV-CLuc 2 对照质粒也携带有一个新霉素(Neomycin)抗性标记,用以产生稳定的转染细胞系。
 
pSV40-CLuc 对照质粒在猿猴病毒 40(SV40)启动子控制下组成型表达 CLuc。可以作为转染实验中的阳性对照。该质粒不携带选择标记。

浓度

 500 μg/ml。

参考文献

关于该类产品性质和应用的文献,请登陆 www.neb-china.com,www.neb.com。

限制性酶切图谱

pCLuc-Basic 2 载体的详细描述和限制性酶切图谱请见 383 页。查看荧光素酶载体和对照质粒的序列文件,请登陆 www.neb-china.com,www.neb.com。

pSV40-GLuc 对照质粒(已停产且无替代品) 货 号 #N0323S-NEB酶试剂 New England Biolabs

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pSV40-GLuc 对照质粒(已停产且无替代品)                              收藏

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北京库存
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苏州库存

#N0323S
20 μg
.00

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概述

所有 GLuc 载体和质粒包含一个人源化的 Gaussia 荧光素酶编码序列,可以在哺乳动物细胞中进行最佳表达。

克隆载体

pGLuc-Basic 2 载体不含启动子,将启动子或增强子克隆进入多克隆位点(MCS),便可进行启动子和/或增强子的活性测试。
 
pGLuc-Basic 2 携带有一个新霉素(Neomycin)抗性标记,用以产生稳定的转染细胞系。

对照质粒

pCMV-GLuc 2 对照质粒携带有一个组成型的巨细胞病毒(CMV)启动子,可在许多类型的细胞中启动高水平的表达。pCMV-GLuc 2 可以在转染实验中单独或与其它报告载体联合使用作为阳性对照。
 
pSV40-GLuc 对照质粒在猿猴病毒 40(SV40)启动子控制下组成型表达 GLuc。可以作为转染实验中的阳性对照。该质粒不携带选择标记。

来源

GLuc 载体和对照质粒经过标准质粒纯化程序,分离自 E. coli 菌株 ER2272。

浓度

500 μg/ml。

参考文献

关于该类产品性质和应用的文献,请登陆 www.neb-china.com,www.neb.com。

限制性酶切图谱

pGLuc-Basic 2 载体的详细描述和限制性酶切图谱请见 384 页。查看荧光素酶载体和对照质粒的序列文件,请登陆 www.neb-china.com,www.neb.com。