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品牌：Adipogen
CAS No.： 储存条件：-20°C 纯度：– |
| 产品编号
(生产商编号) |
等级 | 规格 | 运输包装 | 零售价(RMB) | 库存情况 | 参考值 |
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AG-25T-0112-R100 |
– | 100 µl | – | 3,600.00 | – | – |
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上海金畔生物科技有限公司代理Takara Clontech酶试剂盒全线产品，欢迎访问官网了解更多产品信息和订购。
| 磷蛋白富集试剂盒 | ||||||
| 品牌 | Code No. | 产品名称 | 包装量 | 价格（元） | 说明书 | 数量 |
| Clontech | 635624 | Phosphoprotein Enrichment Kit | 6 Preps | ￥4,262 |  |
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| Clontech | 635666 | Phosphoprotein Enrichment Starter Kit | 1 Purification | ￥956 | |
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| Clontech | 635626 | Phosphoprotein Kit-Buffer A | 500 ml | ￥2,173 | |
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| ■ 产品描述 | |||||||||
| 本制品基于亲和原理，为从哺乳动物细胞和组织中提取磷酸化蛋白质提供了有效方法。富集试剂盒中包含了一整套的buffer和6个高结合力的柱子，用于富集胞质中和膜结合的磷酸化蛋白质，无需考虑例如丝氨酸、酪氨酸或苏氨酸等的氨基酸修饰。 | |||||||||
| 这种富集方法的优势： | |||||||||
| · 实验操作快速，从细胞到样品纯化的平均时间少于2 h。 · 操作简单直接，包括4步，将提取/上样buffer加到细胞或组织沉淀中来提取细胞总蛋白质， 然后将提取产物加到亲和纯化柱上，洗涤，最后使用不含清洁剂的Elution Buffer将结合的磷酸化 蛋白质洗脱下来。 |
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| · 一种Buffer多个用途，Extraction/Loading Buffer可以用于蛋白质提取和纯化步骤， 而不需要更换缓冲液，这样便节省了时间也防止样品丢失。 · 实验过程是非变性的，所以整个过程中磷酸化蛋白质是保持折叠构象的，包括提取和洗脱的步骤。 |
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| 每个纯化柱的最大结合能力约为4 mg磷酸化蛋白质。 | |||||||||
| 高选择性富集磷酸化蛋白质 | |||||||||
| 本富集试剂盒可以用于任何类型的哺乳动物细胞。已做过测试的细胞系包括NIH 3T3，HEK 293，HeLa，Cos-7和Jurkat细胞。富集效率很高，已经过Western Blotting分析证实。通过使用磷酸盐比色检测法，可以发现大部分的磷酸化蛋白质都在洗脱液中，在洗涤步骤的组分中只检测到痕量，可以忽略。 使用本试剂盒得到的磷酸化蛋白质是浓缩液，可以使用多种不同的方法进行分析，包括质谱、二维聚丙烯酰胺凝胶电泳（2D-PAGE）等。 |
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| ■ 特点 | |||||||||
| · 非变性条件下操作，可保持蛋白质的构象和溶解性 · 适用于质谱和2D-PAGE等多种下游应用 · 提高磷酸化检测实验的灵敏度 |
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| ■ 应用 | |||||||||
| · 质谱样品制备 · 磷酸化分析 · 2D-PAGE样品制备 |
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| ■ 实验例 | |||||||||
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| 使用本制品可以高效富集磷酸化蛋白质。提取HEK 293细胞的总蛋白质，取大约3 mg加入到本制品提供的磷酸化蛋白质亲和纯化柱上。Lane1是提取产物，Lane2是流穿液，Lane3是洗涤组分，Lane4是洗脱组分，然后分别使用特异性结合磷酸化AKT、PTEN和GSK3β蛋白质的抗体经Western Blotting检测，结果分别如图A、B、C所示，可以看出在洗脱液部分清晰地检测到了磷酸化蛋白质。请注意，样品在凝胶上样之前没有被稀释或浓缩。 | |||||||||
产品详情请点击： |
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| 磷蛋白磁珠试剂盒 | ||||||
| 品牌 | Code No. | 产品名称 | 包装量 | 价格（元） | 说明书 | 数量 |
| Clontech | 635641 | TALON PMAC Magnetic Phospho Enrichment Kit | Each | ￥5,651 | |
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| ■ 产品描述 | |||||
| 本产品结合了TALON-磷酸化蛋白质富集试剂盒的磷酸特异性和磁珠分离法的便利性，与磁力架搭配使用，可为从哺乳动物细胞和组织中提取mg量的磷酸化蛋白质提供了简单快速的基于金属亲和的方法。 | |||||
| 分离胞质蛋白质和膜结合蛋白质 | |||||
| 试剂盒中包含磷酸化蛋白质富集磁珠和一整套的buffer，能够对含有磷酸化氨基酸侧链（包括丝氨酸，酪氨酸或苏氨酸）的所有类型磷酸化蛋白质（包括细胞质蛋白质和膜结合蛋白质）进行组特异性富集。 | |||||
| 提取/上样buffer中含有非离子型去污剂用于提取胞内蛋白质，洗涤buffer和洗脱buffer不含去污剂。如果需要，可以使用pH9.0的buffer洗脱磷酸化蛋白质，这对有些类型的下游应用更加合适。。 | |||||
| 小体积洗脱液的微量蛋白质纯化 | |||||
| 试剂盒中的磁珠是以5%悬液的形式提供的，已经证实每ml悬液可结合400 μg的α-酪蛋白。磁珠的用量需要根据起始样品的浓度进行调节，富集的磷酸化蛋白质可以通过小体积的洗脱液(50-200 μg)洗脱，以便获得较高浓度的产物。 | |||||
| 对磷酸化蛋白质的高选择性 | |||||
| 在细胞的所有蛋白质中，只有少部分蛋白质会被磷酸化，因此在进行研究之前对磷酸化蛋白质进行富集是非常有必要的。TALON® PMAC Magnetic Phospho Enrichment Kit可用于任何种类的哺乳动物或组织样品，实际得到的磷酸化蛋白质的产量根据细胞系的不同而不同。 | |||||
| ■ 产品特点 | |||||
| · 用于微量磷酸化蛋白质纯化的金属亲和方法，操作简单 · 可以从任意种类的细胞或组织样品中简便快速的进行富集操作 · 非变性的实验条件维持了蛋白质的构象和溶解性 · 洗脱得到的产物是小体积应用的理想选择 |
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| ■ 应用 | |||||
| 提取和富集所有种类的磷酸化蛋白质 | |||||
| ■ 实验例 | |||||
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| 使用TALON PMAC Magnetic Phospho Enrichment Kit可以高效富集磷酸化蛋白质。使用含蛋白酶抑制剂和磷酸酶抑制剂（10 mM氟化钠）的提取/上样buffer从HEK 293细胞中提取蛋白质，然后与200 μl的磁珠混悬液室温混合30 min，洗涤、洗脱。将各组分电泳并使用对应的磷酸化蛋白质特异性抗体（图A是AKT (Ser 473)，图B是P-AKT (Thr 308) ，图C是P-PTEN (Ser 380) ，图D是P-GSK3 beta (Ser 9)）做Western Blotting检测，Lane1是提取产物，Lane2是流穿液，Lane3是洗脱液。图D的51 kDa条带是由于抗体与P-GSK3a交叉反应的结果。 | |||||
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