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品牌：FUJIFILM Wako
CAS No.： 储存条件：2-10℃ 纯度：– |
| 产品编号
(生产商编号) |
等级 | 规格 | 运输包装 | 零售价(RMB) | 库存情况 | 参考值 |
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299-75104 |
for Blotting | 5000 cm2 | – |
替代品：295-72404 |
– | – |
* 干冰运输、大包装及大批量的产品需酌情添加运输费用
* 零售价、促销产品折扣、运输费用、库存情况、产品及包装规格可能因各种原因有所变动，恕不另行通知，确切详情请联系上海金畔生物科技有限公司。
VWR艾万拓703级印迹纸
VWR艾万拓703级印迹纸适合用作蛋白和核酸印迹中的芯体。为印迹夹层中缓冲液通过凝胶流向转移膜提供了均匀的流速。另外，还适用于从玻璃支撑件中移除凝胶。
VWR艾万拓703级印迹纸 732-0591
英国whatman层析纸3MM杂交用纸
英国whatman层析纸3MM杂交用纸【实验目的】掌握RNA印迹技术的基本原理，学习RNA印迹技术的操作方法，了解RNA印迹技术的意义与应用。
英国whatman层析纸3MM杂交用纸 3030-861
【实验目的】
掌握RNA印迹技术的基本原理，学习RNA印迹技术的操作方法，了解RNA印迹技术的意义与应用。
【实验原理】
将RNA变性及电泳分离后，转移到固相支持物上，用于与DNA探针杂交以鉴定其中特定RNA分子的大小与含量。基本原理与Southern印迹相同，但RNA变性方法与DNA不同，不能用碱变性，因为碱会导致RNA的水解。
Northern印迹主要用于组织细胞靶基因表达水平的研究以及对同一组织细胞的不同基因间的表达水平进行比较，或者对不同组织细胞间相同基因的表达水平进行比较。
【实验对象】
待测RNA样品。
【试剂与器材】
1． 焦碳酸二乙酯 （DEPC）。
2． 甲醛变性琼脂糖凝胶电泳所需试剂。
3． 0.5 mol ／ L乙酸铵（NH4Ac）。
4． 溴化乙啶 （EB）：0.5μg／ml，溶于0.5mol／L乙酸铵中。
5． 0.05mol ／ L NaOH／1.5mol／L NaCI（选用）。
6． 0.5mol ／ L Tris·CI （pH 7.4） ／1.5mol／L NaCl（选用）。
7． 20×SSC、6×SSC和2×SSC。
8． 亚甲蓝（终浓度为0.03％），溶于0.3mol ／ L （pH 5.2）的乙酸钠缓冲液中 （选用）。
9． *纤维素 （NC） 膜或尼龙膜。
【实验方法与步骤】
1. RNA甲醛变性凝胶电泳（5V/cm, 3h）,（见附录三）。
电泳结束后用EB染色：取出凝胶，切下需要染色的泳道，放置于无RNA酶的玻璃平皿，加入0.5mol ／L乙酸铵浸泡20min。换液再浸泡20min以除去甲醛，将凝胶转入含0.5（g ／ ml EB的0.5mol ／L乙酸铵溶液中染色40min，必要时，以0.5mol ／ L乙酸铵脱色1h。
3．在紫外透射仪中使凝胶中的RNA显迹，沿凝胶的边缘放一把尺子拍照，以便随后能确定膜中的条带。
4．将非染色的部分凝胶放置于无RNA酶的玻璃平皿中，加足够的DEPC处理的去离子水浸洗几次以除去甲醛。
5. 凝胶浸泡在10倍体积的0.05mol/L NaOH ／ 1.5mol/LNaCl中30min，使RNA部分水解。接着浸泡于10倍体积的0.5mol/L Tris·C1（pH 7.4） ／ 1.5mol/LNaCl缓冲液中和30min （可选）, 将胶的多余部分切除，并切边标记。
6． 将溶液换成10倍体积的20×SSC，浸泡45min。
7． 在一玻璃或塑料平皿中放置-块比凝胶略大的有机玻璃作为平台（必要时，可并排放两块或更多） ，加入足够的20×SSC以使平台半淹没在液体中。
8． 构筑转移平台，剪3张与平台同样大小的Whatman 3MM滤纸，放在平台表面，以20×SSC润湿。把凝胶置于滤纸表面，用玻棒滚动表面以压挤去除气泡。切4条塑料保鲜膜覆盖在凝胶的边缘。
9．剪一片与凝胶暴露面积大小相当的尼龙膜或NC膜，在一个无RNA酶的玻璃平皿中加入约0.5mm深的用DEPC处理的去离子水，将膜漂在水面使之润湿，直至膜沉没在水中。如果是尼龙膜，只需让膜在水中泡上5min，如果是NC膜，则换成20×SSC再浸泡10min。
10．将润湿的膜放在凝胶表面，用干净刀片切去滤膜一角，使其与凝胶的切角相对应，排去气泡，以20×SSC漂洗膜表面。切 3张与膜大小相当的湿润的Whatman3MM滤纸，放于膜的表面。赶出气泡。然后将与膜大小相当的纸巾整齐地堆放在滤纸的表面，高约4cm。
11． 在纸堆的顶部放一块玻璃平板，压一重物 （0.2～0.4kg），放置12h左右。
12．拆卸转移装置，回收膜和压扁了的凝胶。在膜上用铅笔标上加样孔的位置和方向。
13．用2×SSC洗膜，然后放于滤纸上，让膜于室温干燥30分钟。NC膜则应夹于2张Whatman 3MM滤纸之间，80℃真空干烤2h。将干的转印膜置于可透过紫外线的塑料保鲜膜中，带有RNA的一面朝下，置于紫外透射仪（波长在254nm）上，以合适的照射强度进行紫外线交联,以固定RNA。备作核酸杂交。
14． 凝胶可按步骤2，用EB染色以检查转印效率。
【注意事项】
1．为了抑制RNA酶的活性，所有用于Northern印迹的溶液，均须用经DEPC处理过的无菌去离子水配制。DEPC是一种致癌剂，须小心操作。尤其在用DEPC处理乙酸铵时，因为DEPC能与铵离子反应产生氨基甲酸乙酯（一种潜在的致癌剂），故在以DEPC处理乙酸铵时，更须分外小心。
2．RNA极易被环境中存在的RNA酶降解，因此须特别警惕RNA酶的污染
用途：本品仅供科研，不得用于其它用途。
英国whatman层析纸3MM杂交用纸 3030-861 订货信息：
密理博PVDF转印膜 孔径0.22um
密理博PVDF转印膜 孔径0.22um Millipore 提供三种不同的 Immobilon PVDF 膜，是针对不同的蛋白质印迹应用的理想选择。 现在我们还 提供采用按规格裁切的印迹方片膜和两层过滤纸组成的印迹三明治。
密理博PVDF转印膜 孔径0.22um ISEQ00010
Millipore 提供三种不同的 Immobilon PVDF 膜，是针对不同的蛋白质印迹应用的理想选择。 现在我们还 提供采用按规格裁切的印迹方片膜和两层过滤纸组成的印迹三明治。
与硝酸纤维素膜相比，Immobilon 膜具有多种优点。 它们不易破裂或卷 曲，便于裁剪且在切割过程中不会碎裂。 它们还有低背景、广泛溶剂相容性以及优异的着色能力。 此外，它们可以重复检测。
Immobilon-P 膜
· 0.45μm 孔径
· 建议用于大多数免疫印迹，特别在蛋 白质大于 20kDa 时
· Millipore 的快速免疫检测实验方法不需要膜封闭并缩短洗涤时间，将检测时间至少减少了两个小时，而不致降低灵敏 度或特异性
用于高通量实验室的印迹三明治
· 当您需要处理多个印迹时，印迹三明治是一种便利省时的选择。 我们的印迹三明 治包含多片 Immobilon-P 膜，其中插入了按规格裁切的多张层析级印迹纸。
转印滤纸
· 按照大多数免疫印迹尺寸进行裁切的层析级转印滤纸。
Immobilon-PSQ 膜
· 0.2μm 孔径和大的内表面面积
· 较其它膜具有更高的 蛋白质吸附率和测序得率
· 建议用于小于 20kDa 的印迹蛋白质
· 防止小分子量的蛋白质的渗漏
Immobilon-FL 膜
· 针对荧光应用进行优化的转印膜
· 极低的背景提高了所 有荧光检测实验的灵敏度
· 与所有常用的荧光探针（所有激发和发射波长）兼容
· 是多态性检测和化学荧光应用的理想选择
密理博PVDF转印膜 孔径0.22um ISEQ00010
产品详情：
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品牌：FUJIFILM Wako
CAS No.： 储存条件：2-10℃ 纯度：– |
| 产品编号
(生产商编号) |
等级 | 规格 | 运输包装 | 零售价(RMB) | 库存情况 | 参考值 |
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291-55203 |
for Blotting | 5000cm2 | – | 8,760.00 | – | – |
* 干冰运输、大包装及大批量的产品需酌情添加运输费用
* 零售价、促销产品折扣、运输费用、库存情况、产品及包装规格可能因各种原因有所变动，恕不另行通知，确切详情请联系上海金畔生物科技有限公司。
