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SNAP-捕获 Pull-Down 树脂 货 号 #S9144SNEB酶试剂 New England Biolabs

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#S9144S
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特性

 从溶液中选择性捕获 SNAP-tag 融合蛋白
 适用于蛋白质 pull-down 实验或蛋白质组学分析

概述

SNAP- 捕获产品是耦联有苄基鸟嘌呤底物的琼脂糖或磁性琼脂糖珠，可用于从溶液中选择性捕获和固定   SNAP-tag 融合蛋白。这些微珠对 SNAP-tag 融合蛋白结合容量很高，对复杂的细胞裂解液中的蛋白表现出极低的非特异性结合。这些特点使得该产品适于进行 pull-down 实验。

 
SNAP-捕获 Pull-Down 树脂 货 号 #S9144S 

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SNAP-Cell 430                              收藏

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#S9109S
50 nmol
4,219.00
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特性

 荧光标记 SNAP-、CLIP- 或 ACP-tag 融合蛋白，用于细胞成像
 标记物的荧光光谱波长范围从紫外（360 nm）至远红外（647+ nm）
 有细胞通透性和非通透性两种标记物
 
SNAP-Cell 430 货 号 #S9109S

概述

NEB 提供大量的用于标记 SNAP-、CLIP- 和 ACP-tag 融合蛋白的荧光底物供研究者选择。SNAP-tag 底物是由染料及通过苄基键耦联到染料上的鸟嘌呤或氯嘧啶构成；CLIP-tag 底物是由染料及通过苄基耦联至染料上的胞嘧啶构成。这些底物无需酶促反应，即可自我标记相应的 tag 标签。细胞通透性底物（SNAP- 和 CLIP-Cell）不仅能标记细胞内部也能标记细胞表面，而细胞非通透性底物（SNAP- 和 CLIP-Surface）仅能特异性的标记在细胞表面表达的融合蛋白。
 
ACP-tag 的标记基团与辅酶 A（CoA）的磷酸泛酰巯基乙胺耦联，在 ACP 或 SFP 合成酶作用下，完成标记反应。标记反应仅特异地发生在细胞表面表达的融合蛋白上。使用同种底物标记 ACP-tags；用于标记的合成酶标记决定反应特异性（见 292 页）。
 

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In-Fusion Snap Assembly Master Mix酶试剂盒Takara Clontech

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In-Fusion Snap Assembly Master Mix
品牌 Code No. 产品名称 包装量 价格（元） 说明书 数量
Clontech 638947 In-Fusion® Snap Assembly Master Mix 10 Rxns ￥1,155
￥866 		In-Fusion Snap Assembly Master Mix In-Fusion Snap Assembly Master Mix In-Fusion Snap Assembly Master Mix
Clontech 638948 In-Fusion® Snap Assembly Master Mix 50 Rxns ￥5,204
￥3,903 		In-Fusion Snap Assembly Master Mix In-Fusion Snap Assembly Master Mix In-Fusion Snap Assembly Master Mix
Clontech 638949 In-Fusion® Snap Assembly Master Mix 250 Rxns ￥20,747
￥15,560 		In-Fusion Snap Assembly Master Mix In-Fusion Snap Assembly Master Mix In-Fusion Snap Assembly Master Mix

*红字为促销价格，促销时间: 2022年9月1日-2022年10月31日

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In-Fusion Snap Assembly Master Mix
In-Fusion Snap Assembly Master Mix  
In-Fusion Snap Assembly Master Mix
 
 
效率更高、重复性更好的无缝克隆试剂登场了！
In-Fusion Snap Assembly Master Mix是在In-Fusion HD Cloning Kit基础上升级的新产品，与其他公司同类产品相比克隆效率更高。
In-Fusion HD Cloning Kit与其他公司同类产品对比数据参见：In-Fusion与其他公司的无缝克隆产品对比有何不同？
 
■ 制品说明
In-Fusion Snap Assembly是Takara推出的新一代无缝克隆试剂，延续了上一代HD系列产品的优点，仅通过15分钟反应，即可将1个或多个PCR片段按照设计要求插入到任意载体的任意位置，对于待克隆的PCR片段，不需要进行限制酶酶切、磷酸化及末端平滑化等处理。Snap Assembly系列的实验效率和一致性均超过HD系列产品，更擅长多片段克隆以及高通量实验。
 
■ 制品内容
· 5X In-Fusion Snap Assembly Master Mix
· linearized pUC19 Control Vector
· 2 kb Control Insert
※ PCR产物纯化需要另外准备纯化试剂，例如可使用TaKaRa MiniBEST Agarose Gel DNA Extraction Kit Ver.4.0（Code No. 9762）纯化柱。
※ 试剂盒中不附带感受态细胞，转化实验请使用高效率的感受态细胞，例如 E. coli HST08 Premium Competent Cells（Code No. 9128）或 Stellar感受态细胞。
※ 扩增目的片段及对载体进行反向PCR时建议使用高保真酶 PrimeSTAR Max DNA Polymerase（Code No.：R045A/B）。
 
■ 制品特点
· 可在任意载体的任意位置进行定向克隆
· 操作简单方便，无需进行反复的酶切连接
· 对于50 bp～15 kb的插入片段，克隆效率可超过95%
· 与现有的In-Fusion HD Cloning Kit相比，多片段克隆效率大幅提升
· 在高正确率的基础上，转化后得到的菌落数比其他公司的同类产品更多
 
■ In-Fusion原理
In-Fusion技术利用In-Fusion酶，通过识别DNA片段（例如PCR片段和线性化载体）末端15 bp的同源序列来实现高效、准确地融合。这15 bp的同源序列可在设计目的片段扩增引物时，使用我们的在线引物设计工具进行设计。In-Fusion酶从线性DNA链的3'末端切割核苷酸，这样，两个DNA片段之间便形成互补碱基对，可通过退火使片段连接起来。通过这一原理可将单个或多个片段克隆到载体中，而无需亚克隆。除此之外，In-Fusion技术还可以应用于突变导入、基因合成、特定基因结构域改变等。
 
In-Fusion Snap Assembly Master Mix
图1. In-Fusion克隆标准工作流程示意图（适用所有In-Fusion克隆试剂盒）。
 
■ In-Fusion引物设计
In-Fusion克隆用引物的设计与目的片段PCR扩增用引物的设计基本相同。不同之处是需要在特异性引物的5'末端添加15个与载体末端序列相同的碱基（参考下图）。Takara为您提供了方便的在线引物设计工具，欢迎使用。
In-Fusion Snap Assembly Master Mix
 
■ 对比实验例
实验例1
In-Fusion Snap Assembly Master Mix
图2. In-Fusion Snap Assembly和In-Fusion HD性能比较。分别使用In-Fusion Snap Assembly和In-Fusion HD将五个不同的插入片段（大小从405 bp到1,005 bp不等）同时克隆到一个经反向PCR线性化的2.7 kb的载体中，每组克隆反应重复三次。两个反应系统除了酶预混液不同之外，扩增引物和其他试剂全部相同。转化涂菌后显示Snap Assembly组长出的菌落数是HD组的4倍，挑取10个转化菌落，进一步使用Sanger测序法进行验证，结果显示二者正确率均超过90%。
 
实验例2
In-Fusion Snap Assembly Master Mix
数据来源于Takara Bio USA, Inc.
图3. In-Fusion Snap Assembly与其他公司同类产品A的比较（使用反向PCR的方法线性化载体）。 将3.8 kb的片段（图A）或34.2 kb的腺病毒片段（图B）克隆到通过反向PCR线性化的2.7 kb的载体中，每组克隆反应重复三次。引物按照所使用试剂厂家的要求进行设计。 转化涂菌后显示In-Fusion Snap Assembly组长出的菌落数是A产品组的2倍，各挑取20个转化菌落，再使用Sanger测序法和菌落PCR的方法分别进行验证，结果显示In-Fusion Snap Assembly的正确率超过95%。
 
实验例3
In-Fusion Snap Assembly Master Mix
数据来源于Takara Bio USA, Inc.
图4．In-Fusion Snap Assembly与其他公司同类产品A的比较（使用限制酶酶切的方法线性化载体）。将3.8 kb的片段克隆到通过限制酶酶切线性化的标准载体中，载体因使用不同的限制酶而产生三种不同末端，5'突出端（图A），平端（图B）和3'突出端（图C），每组克隆反应重复三次，引物按照所使用试剂厂家的要求进行设计。转化涂菌后显示In-Fusion Snap Assembly组长出的菌落数是A产品组的5-16倍，根据载体末端类型的不同而不同。各挑取20个转化菌落，进一步使用Sanger测序法进行验证，结果显示In-Fusion Snap Assembly的正确率超过95%。
 
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In-Fusion Snap Assembly Master Mix克隆产品选择指南
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In-Fusion Snap Assembly Master MixIn-Fusion克隆Tips
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2分钟了解In-Fusion的操作流程
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2分钟看懂In-Fusion作用机制的与众不同
 
 
产品详情请点击：In-Fusion Snap Assembly Master Mix

SNAP-Cell 阻断剂 货 号 #S9106S-NEB酶试剂 New England Biolabs

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货 号
规 格
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#S9106S
100 nmol
1,739.00
有
无
无
无
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特性

 不可逆阻断
 适用于脉冲追踪实验

概述

阻断剂是非荧光底物，在细胞内（SNAP-Cell Block和 CLIP-Cell Block）或活细胞表面（SNAP-Surface    Block 和 CLIP-Cell Block）阻断 SNAP- 或 CLIP-tag 的反应。在 SNAP- 或 CLIP-tag 融合蛋白的活细胞和体外标记实验中，可以用阻断剂制备无荧光对照。
 
SNAP- 和 CLIP-Cell 阻断剂可顺利透过细胞膜，一旦进入细胞，即与 SNAP- 或 CLIP-tag 反应，使之在后续的标记反应中不可逆地失活。
 
SNAP-Surface 阻断剂也与 SNAP-tag 发生不可逆反应，使之在随后的标记步骤中失活。该阻断剂不能透过细胞膜，仅可阻断暴露于细胞表面的SNAP-tag。

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