PrimeScript™ RT Master Mix (Perfect Real Time)酶试剂盒Takara Clontech

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PrimeScript RT Master Mix (Perfect Real Time)
品牌 Code No. 产品名称 包装量 价格(元) 说明书 数量
Takara RR036Q PrimeScript RT Master Mix (Perfect Real Time) 20 Rxns ¥263 PrimeScript™ RT Master Mix (Perfect Real Time) PrimeScript™ RT Master Mix (Perfect Real Time) PrimeScript™ RT Master Mix (Perfect Real Time)
Takara RR036A PrimeScript RT Master Mix (Perfect Real Time) 200 Rxns ¥1,963
¥1,178
PrimeScript™ RT Master Mix (Perfect Real Time) PrimeScript™ RT Master Mix (Perfect Real Time) PrimeScript™ RT Master Mix (Perfect Real Time)
Takara RR036B (A × 4) PrimeScript RT Master Mix (Perfect Real Time) 200 Rxns × 4 ¥7,456
¥4,474
PrimeScript™ RT Master Mix (Perfect Real Time) PrimeScript™ RT Master Mix (Perfect Real Time) PrimeScript™ RT Master Mix (Perfect Real Time)

*红字为促销价格,促销时间: 2022年9月1日-2022年10月31日

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PrimeScript™ RT Master Mix (Perfect Real Time) PrimeScript™ RT Master Mix (Perfect Real Time) PrimeScript™ RT Master Mix (Perfect Real Time) PrimeScript™ RT Master Mix (Perfect Real Time) PrimeScript™ RT Master Mix (Perfect Real Time)
 
 
■ 制品内容 (Code No.: RR036A: 10 μl反应×200次量) PrimeScript™ RT Master Mix (Perfect Real Time)
5X PrimeScript RT Master Mix (for Real Time)*1 400 μl
RNase Free dH2O 1 ml ×2 支
EASY Dilution (for Real Time PCR)*2 1 ml
 
*1 含有PrimeScript RTase、RNase Inhibitor、Random 6 mers、Oligo dT Primer、dNTP Mixture、反应Buffer (含有Mg2+) 。
*2 制作标准曲线时梯度稀释cDNA或RNA标准品的稀释液。模板DNA或RNA如果用水或TE Buffer稀释时,由于受Microtube吸附作用等的影响,往往不能准确地进行稀释,导致实验结果精度降低。使用本制品时,即使稀释至低浓度也能够进行准确地稀释,容易在宽广范围内获得准确定量的标准曲线。本制品不影响反转录和PCR反应,用其稀释后的样品可直接使用。EASY Dilution (for Real Time PCR) 也可以单独购买 (Code No.: 9160/9160Q)。
注意:EASY Dilution请与本公司Real Time PCR试剂组合使用,对于其他公司的同类制品的适用性本公司尚未进行确认。
 
■ 制品说明
本制品是2 Step Real Time RT-PCR用的理想反转录反应试剂。5×PrimeScript RT Master Mix中含有定量RT-PCR的反转录反应所需的所有试剂 (PrimeScript RTase、RNase Inhibitor、Random 6 mers、Oligo dT Primer、dNTP Mixture、反应Buffer),加入模板RNA和水即可迅速进行反应。使用具有较强延伸能力的PrimeScript RTase,与制品PrimeScript RT reagent Kit (Perfect Real Time)(Code No.: RR037Q/A/B) 相同,可以在较短时间内高效合成Real Time PCR用模板cDNA。 本制品合成的cDNA可以用于嵌合法和探针法qPCR分析,可以根据实验目的与TB Green® Premix Ex Taq II (Tli RNaseH Plus) (Code No. RR820Q/A/B)* 、TB Green Fast qPCR Mix (Code No. RR430S/A/B)* 和Probe qPCR Mix (Code No. RR391S/A/B) 等定量试剂配合使用,能够进行高性能的基因表达分析。
*:Takara嵌合法Real Time PCR(qPCR)产品的名称从2017年12月下旬开始,将逐步变更为「TB Green系列」。产品Code、性能和原有产品相比没有变化,请继续放心使用。
产品名称将随新lot的产品逐步变更,产品网页或操作说明书可能会先于产品标签变更,望知悉!
 
■ 保存
-20℃。
 
■ 试剂盒特长
1. 制品为预先混好的Premix形式,只需加入模板RNA和水便可以开始反应。
2. 可以在较短时间内高效合成Real Time PCR用cDNA,是进行2 Step Real Time RT-PCR反应的理想试剂。
3. 使用了Random 6 mers和Oligo dT Primer 2种反转录引物,可以合成适合Real Time PCR用cDNA。
4. Real-time RT PCR定量需要建立标准曲线,建立标准曲线的条件就是需要将总RNA和反转录cDNA稀释到较低的浓度。如果用水或TE Buffer稀释时,由于模板浓度低不稳定,因而会缩小曲线范围,结果准确度降低。本制品中附加了标准曲线制作用稀释液EASY Dilution (for Real Time PCR),将Total RNA或cDNA稀释至低浓度时也能够进行准确稀释,容易在宽广范围内获得准确定量的标准曲线。
 
■ 注意事项
1. 5X PrimeScript RT Master Mix在使用前要小心地离心收集到反应管底部。由于5X PrimeScript RT Master Mix粘度高,用移液枪慢慢反复吸打充分混匀后使用。
2. 分装试剂时务必使用新的枪头 (Tip),以防止样品间污染。
3. 本制品中已经加入了反转录Primer(Oligo dT Primer 和Random 6 mers),如果要使用Gene Specific Primer进行反转录反应,则不能使用本制品。
 
 
Technote:
  An efficient method for quantification of human gene expression
  levels using PrimeScript reverse transcriptase
   
 
  Monitoring siRNA knockdown: Quantifying transient knockdown of
  LEDGF/p75 in docetaxel-resistant prostate cancer PC-3-DR cells
 

PrimeScript™ II High Fidelity RT-PCR Kit酶试剂盒Takara Clontech

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PrimeScript II High Fidelity RT-PCR Kit
品牌 Code No. 产品名称 包装量 价格(元) 说明书 数量
Takara R023A PrimeScript II High Fidelity RT-PCR Kit 50 Rxns ¥1,472 PrimeScript™ II High Fidelity RT-PCR Kit PrimeScript™ II High Fidelity RT-PCR Kit PrimeScript™ II High Fidelity RT-PCR Kit
Takara R023B (A × 4) PrimeScript II High Fidelity RT-PCR Kit 50 Rxns × 4 ¥5,297 PrimeScript™ II High Fidelity RT-PCR Kit PrimeScript™ II High Fidelity RT-PCR Kit PrimeScript™ II High Fidelity RT-PCR Kit
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PrimeScript™ II High Fidelity RT-PCR Kit PrimeScript™ II High Fidelity RT-PCR Kit PrimeScript™ II High Fidelity RT-PCR Kit PrimeScript™ II High Fidelity RT-PCR Kit
 
 
■ 制品内容 (50 次量*1)
PrimeScript II RT Enzyme Mix 50 μl
5×PrimeScript II Buffer 200 μl
dNTP Mixture (10 mM each) 100 μl
Oligo dT Primer (50 μM) 50 μl
Random 6 mers (20 μM) 50 μl
PrimeSTAR GXL for RT-PCR 100 μl
5×PrimeSTAR GXL Buffer 500 μl
Control F-1 Primer*2 (20 μM) 10 μl
Control R-1 Primer*3 (20 μM) 10 μl
Positive Control RNA (2×105 copies/μl) 20 μl
RNase Free dH2O 1ml
   
*1 反转录反应20 μl、PCR反应50 μl,2 Step RT-PCR时可使用50次。
*2 Positive Control RNA用上游引物。
*3 Positive Control RNA用下游引物。
 
 
■ 制品说明
PCR (Polymerase Chain Reaction;聚合酶链式反应) 是一种使用两种引物扩增目的DNA的方法。虽然原理上PCR法是扩增DNA,RNA不能直接被扩增,但是经过反转录酶的作用将RNA反转录成cDNA后扩增 (RT-PCR),PCR法便可应用于RNA的解析了。目前,此方法已广泛应用于RNA的构造解析、cDNA的克隆及RNA水平上的表达解析等多种领域。
PrimeScript II High Fidelity RT-PCR Kit是一种对长链RNA及富含GC序列的RNA合成cDNA时具有高保真性的RT-PCR用试剂盒。
本试剂盒中使用的PrimeScript II反转录酶是改良型的PrimeScript RTase,可在合成长链cDNA时发挥效力,同时PCR时使用了对长链及富含GC序列的cDNA扩增时具有高保真性的DNA聚合酶PrimeSTAR GXL DNA Polymerase。因PrimeScript II RTase可很好地抑制由于引物错配引起的非特异性扩增,即使使用高浓度的Oligo dT Primer进行反转录反应也不会导致cDNA合成时的阻害作用,因此使用高浓度的RNA作为模板也可进行良好的反转录反应。
本试剂盒中使用PrimeScript II RTase与RNase Inhibitor的混合型PrimeScript II RT Enzyme Mix。另外,PrimeSTAR GXL DNA Polymerase克服了以往的高保真酶由于核酸浓度过高而存在的反应阻害性,在高浓度核酸存在条件下也能发挥其效力,可以在更宽广的RNA模板范围内获得cDNA扩增产物。 本试剂盒具有以下优点:
1. 能够从长链RNA及富含GC序列的RNA中获得错配率很低的cDNA扩增产物。
2. 在42℃条件下反转录反应也可以使具有复杂结构的RNA进行良好的延伸。
3. 反应体系中Total RNA的使用范围非常宽广,便于使用。
本试剂盒含有反转录反应及PCR扩增反应所需要的全部试剂。并且,也可以进行1 Step RT-PCR反应。
 
■ 各种引物的序列
引物名称 各引物序列
Random 6 mers Pd (N)6
Oligo dT Primer Takara独自开发的dT区域的序列
Control F-1 Primer 5′-CTGCTCGCTTCGCTACTTGGA-3′
Control R-1 Primer 5′-CGGCACCTGTCCTACGAGTTG-3′
 
 
■ Positive Control RNA
本试剂盒中的Control RNA是以pSPTet3质粒 (质粒中的SP6启动子下游插入长约1.4 kb的pBR322来源的DNA片段,DNA片段上含有抗四环素基因) 为模板由SP6 RNA聚合酶经体外转录而得到的。
 
PrimeScript™ II High Fidelity RT-PCR Kit
图1. Control RNA:使用Control Primer时所能扩增的DNA片段
 
■ 保存
-20℃。
 
■ 使用注意
1. 当同时需要进行数次RT-PCR反应时,应先配制各种试剂的混合液 (Master Mix;其中包括RNase Free dH2O、Buffer、dNTP Mixture等),然后再分装到每个反应管中。这样,可使所取的试剂体积更准确,减少试剂损失,避免重复分取同一试剂。同时也可以减少实验操作或实验之间产生的误差。
2. 使用PrimeScript II RT Enzyme Mix、PrimeSTAR GXL for RT-PCR等酶类产品时,应轻轻混匀,避免起泡;分取之前要小心地离心收集到反应管底部;由于酶保存液中含有50%的甘油,粘度高,分取时应慢慢吸取。
3. 酶制品应在实验前才从-20℃中取出,使用后也应立即放入-20℃保存。
4. 为了防止Positive Control RNA分解,应尽量避免反复冻融。有条件的实验室最好保存于-70℃~-80℃。
5. 分装试剂时务必使用新的枪头 (Tip),以防止样品间污染。