Lambda DNA (Klenow Fragment treated) 噬菌体DNA(Klenow片段处理) 品牌:Nippon Gene


Lambda DNA (Klenow Fragment treated)

噬菌体DNA(Klenow片段处理)

品牌:Nippon Gene
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314-05293

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DNA 聚合酶 I 大片段(Klenow) 货 号 #M0210L-NEB酶试剂 New England Biolabs

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产品资料 – DNA聚合酶与扩增技术 – DNA 处理(DNA 标记、末端平齐化等)

DNA 聚合酶 I 大片段(Klenow)                              收藏

DNA 聚合酶 I 大片段(Klenow)                 货   号                  #M0210L DNA 聚合酶 I 大片段(Klenow)                 货   号                  #M0210L DNA 聚合酶 I 大片段(Klenow)                 货   号                  #M0210L DNA 聚合酶 I 大片段(Klenow)                 货   号                  #M0210L DNA 聚合酶 I 大片段(Klenow)                 货   号                  #M0210L

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#M0210L
1,000 units
2,699.00

#M0210M
高浓度(10X)1,000 units
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#M0210S
200 units
679.00

#M0210V
100 units
359.00

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特性

·用随机引物制备探针
·切除 3´ 突出端或补平 5´ 突出端,形成平末端

·cDNA 第二条链的合成 

概述

DNA 聚合酶 I,大片段(Klenow 片段)是 E. coli DNA 聚合酶 I 的蛋白水解产物,具有 DNA 聚合酶活性和 3´→5´ 核酸外切酶活性,但缺失了 5´→3´ 核酸外切酶活性。Klenow 既保留了全酶的高保真性,又不会降解 DNA 5´ 末端。

来源

重组 E. coli 菌株,携带有 E. coli polA 基因,该基因去除了 5´→3´ 核酸外切酶结构域。 

浓度

5,000 和 50,000 units/ml。 

热失活

75℃ 20 分钟。 

使用注意事项

由于该酶具有 3´→5´ 核酸外切酶活性,升高反应温度、加入过量的酶、未加入 dNTP 或反应时间过长均会导致 DNA 末端碱基被切除形成凹陷。 

参考文献

Klenow 片段(3’→5’exo-) 货 号 #M0212L-NEB酶试剂 New England Biolabs

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产品资料 – DNA聚合酶与扩增技术 – DNA 处理(DNA 标记、末端平齐化等)

Klenow 片段(3’→5’exo-)                              收藏

Klenow 片段(3’→5’exo-)                 货   号                  #M0212L Klenow 片段(3’→5’exo-)                 货   号                  #M0212L Klenow 片段(3’→5’exo-)                 货   号                  #M0212L Klenow 片段(3’→5’exo-)                 货   号                  #M0212L Klenow 片段(3’→5’exo-)                 货   号                  #M0212L

货 号
规 格
价 格(元)
北京库存
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广州库存
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#M0212L
1,000 units
2,699.00

#M0212M
高浓度(10X)1,000 units
2,699.00

#M0212S
200 units
679.00

#M0212V
100 units
359.00

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特性

 用随机引物制备探针
 随机引物法标记

 cDNA 第二条链的合成 

概述

Klenow 片段(3´→5´ exo)是 DNA 聚合酶 I 的 N 末端截短物,它保留了 DNA 聚合酶活性,但失去了 5´→3´ 核酸外切酶活性。该酶经突变(D355A,E357A)去除了其 3´→5´ 的核酸外切酶活性(1)。 

来源

重组 E. coli 菌株,其携带的质粒上含有 E.coli polA (D355A,E357A)基因的片段,片段起始位置在密码子 324 处。 

浓度

5,000 和 50,000 units/ml。 

热失活

75℃ 20 分钟。 

使用注意事项

Klenow 片段(3´→5´ exo)因去除了 3´→5´ 核酸外切酶的活性,故不适用于生成平末端的反应。 

参考文献

 

Klenow Fragment酶试剂盒Takara Clontech

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Klenow Fragment
品牌 Code No. 产品名称 包装量 价格(元) 说明书 数量
Takara 2140A Klenow Fragment (Large Fragment E. coli DNA Polymerase I) 200 U ¥220 Klenow Fragment Klenow Fragment Klenow Fragment
Takara 2140B (A × 5) Klenow Fragment(Large Fragment E. coli DNA Polymerase I) 200 U × 5 ¥1,005 Klenow Fragment Klenow Fragment Klenow Fragment
Takara 2140AK Klenow Fragment(Large Fragment E. coli DNA Polymerase I) (2 U/μl) 200 U ¥171 Klenow Fragment Klenow Fragment Klenow Fragment
Takara 2140BK (AK × 5) Klenow Fragment(Large Fragment E. coli DNA Polymerase I) (2 U/μl) 200 U × 5 ¥771 Klenow Fragment Klenow Fragment Klenow Fragment
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■ 制品内容
Code No.: 2140A
Klenow Fragment (5 U/μl) 200 U
10X Klenow Fragment Buffer 1 ml
 
Code No.: 2140AK Klenow Fragment
Klenow Fragment (2 U/μl) 200 U
 
■ 制品说明
本酶在DNA模板和引物存在的条件下,选择性地催化底物dNTP沿5’→3’方向合成与模板互补的DNA。本酶是从大肠杆菌中纯化得到,其中克隆了2/3的E.coli DNA polymerase I基因片段 (3’端计算) 。因此具有3’→5’外切酶活性但是没有5’→3’外切酶活性。2140AK/BK制品是Kilo-Sequencing Deletion Kit(Code No.: 6030)的组份之一。
 
■ 保存
-20℃。
 
■ 用途
1. 双脱氧法DNA序列测定 (Sanger法)。
2. 双链DNA 5’突出末端的平滑化。
3. 寡核苷酸定向诱变 (Oligonucleotide directed mutagenesis) 中双链DNA的合成。
4. 使用随机引物进行DNA标记。
 
■ 使用注意
1. 本酶有高度稳定性,稀释时不失活,但剧烈搅拌会失活。
2. 由于不含有5’→3’的外切核酸酶活性,因此不表现切口平移活性。适合双链DNA末端以及缺口 (Gap) 的修复。
3. 与T4 DNA Polymerase相比,对模板高级结构的抵抗性能较好。
4. 由于对DNA的亲和性较强,过量使用易发生凝集作用 (Aggregation) 从而抑制反应进行。
5. 若用于5’突出末端的修饰时,补平后有时会多加一个碱基。
6.E.coli DNA Polymerase I相同,ddNTPs的掺入不受底物抑制。