NEBuffer 2 货 号 #B7002SNEB酶试剂 New England Biolabs

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#B7002S
5 ml
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Description

NEBuffer 2:
50 mM NaCl, 10 mM Tris-HCl, 10 mM MgCl2, 1 mM dithiothreitol (pH 7.9 @ 25℃)。

 

几丁质树脂 货 号 #S6651L-NEB酶试剂 New England Biolabs

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几丁质树脂                              收藏

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#S6651L
100 ml
5,269.00

#S6651S
20 ml
1,329.00

#S6651V
10 ml
699.00

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Description:

An affinity matrix for the isolation of target proteins fused to an intein-chitin binding domain fusion (1)

Proterties and Usage

 Storage Temperature
4°C

Binding Capacity

2.0 mg maltose-binding protein/ ml bed volume released from the resin after cleavage of the fusion protein expressed from pMYB5.

Can be Regenerated

Yes

NEBuffer 4 货 号 #B7004SNEB酶试剂 New England Biolabs

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#B7004S
5 ml
359.00

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Description

NEBuffer 4:
50 mM potassium acetate, 20 mM Tris-acetate, 10 mM magnesium acetate, 1 mM dithiothreitol (pH 7.9 @ 25℃)。
 

 

酵母碳基础培养基 货 号 #B9017S-NEB酶试剂 New England Biolabs

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产品资料 – 蛋白表达和纯化技术 – 表达系统 :酵母

酵母碳基础培养基                              收藏

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#B9017S
12 g
569.00

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相关产品

K. lactis 蛋白表达试剂盒 .  
SacII.  
K. lactis GG799 感受态细胞  
酵母碳基础培养基

特性

 可克隆和表达对大肠杆菌有毒性的基因
 可同时表达多个基因
 无需昂贵的抗生素或甲醇
 易操作的实验步骤,适用于无酵母表达经验者
 有吸引力的商业授权 

pKLAC2 载体限制性酶切图谱请参见 351 页,序列信息请登陆 www.neb-china.com,www.neb.com 查询。  

概述

K. lactis 蛋白表达试剂盒提供了一种在乳酸克鲁维酵母(Kluyveromyces lactis)中表达目的基因的简便方法。目的基因克隆到 pKLAC 系列整合载体中,既可表达胞内蛋白,亦可表达分泌型蛋白。与其它酵母和细菌表达系统相比,K. lactis 蛋白表达系统有着诸多优点。首先,乳酸克鲁维酵母具有高培养密度及整合多拷贝质粒的能力,使其可成功制备大量的高表达蛋白质;其次,pKLAC1 系列载体使用强 LAC4 启动子,该启动子经修饰,在大肠杆菌中无背景表达,因此,可用于对大肠杆菌有毒性的基因表达;再有,试剂盒提供高效转化的 K. lactis 感受态细胞,使得该系统适用于需要大量转化子的实验,比如利用 cDNA 文库进行表达克隆;另外,酵母转化子的筛选不需要昂贵的抗生素,培养基中也不需要甲醇;最后,K. lactis 细胞表达的蛋白质可以进行翻译后修饰,因而可成为细菌表达系统的有用替代。

pKLAC2 属于通用表达载体。利用这些载体既可使重组蛋白在细胞内表达,也能通过与 K. lactis α-factor 的融合实现分泌表达。pKLAC2 的多克隆位点与 NEB 其它表达系统相兼容。

GG799 是 K. lactis 蛋白表达试剂盒中提供的基础菌株。其特点是细胞生长密度与异源蛋白表达效率极高,GG799 细胞未经遗传修饰。

酵母碳基础培养基            货   号                  #B9017S 
蛋白质的分泌过程。在细胞核中,整合表达载体编码了一个含有 ɑ-MF 结构域(蓝色)和目的蛋白(黑色)的融合蛋白。融合蛋白表达后,位于 ɑ-MF 上的信号肽就会指导融合蛋白转运至内质网(ER),信号肽即被信号肽酶(SP)切除。融合蛋白质转运至高尔基体,Kex 蛋白酶在此将 α-MF 结构域切除。随后,目的蛋白质被分泌到细胞外。

酵母碳基础培养基            货   号                  #B9017S
K. lactis 的蛋白表达。SDS-PAGE 电泳分离检测分泌性表达的重组麦芽糖结合蛋白(MBP),菌体生长在富含蛋白胨(peptone)的培养基中,直接上样检测。考马斯亮蓝染色鉴定。泳道 1:蛋白分子量 Marker;泳道 2:野生型 K. lactis 细胞培养液(15 μl);泳道 3:整合有大肠杆菌 malE 基因表达框的 K. lactis 细胞培养液(15 μl)。

K. lactis 蛋白表达试剂盒包括

– pKLAC2 载体和 pKLAC1-malE 对照质粒
– SacII
– 整合测序引物套装
– K. lactis GG799 感受态细胞和转化试剂
– 酵母碳基础培养基与乙酰胺溶液   

参考文献

关于这些产品特点与应用的参考文献请登陆 www.neb-china.com,www.neb.com。   

热敏磷酸酶 货 号 #M0289L-NEB酶试剂 New England Biolabs

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产品资料 – DNA修饰酶与克隆技术 – DNA 磷酸酶 & 硫酸化酶

热敏磷酸酶                              收藏

热敏磷酸酶                货   号                  #M0289L 热敏磷酸酶                货   号                  #M0289L 热敏磷酸酶                货   号                  #M0289L 热敏磷酸酶                货   号                  #M0289L

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#M0289L
5,000 units
3,209.00

#M0289S
1,000 units
769.00

#M0289V
500 units
409.00

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特性

 DNA 和 RNA 的去磷酸化

 克隆载体去磷酸化,防止载体自连
 测序或 SNP 分析前除去 PCR 反应中dNTP 和焦磷酸盐
 T4 PNK 标记 5´ DNA 末端前的去磷酸化

概述

热敏磷酸酶催化 DNA 和 RNA 5´ 和 3´ 磷酸单脂的去磷酸化反应。另外,热敏磷酸酶水解核糖和脱氧核糖核苷三磷酸(NTP 和 dNTP)。热敏磷酸酶在分子生物学研究中应用广泛,如去除 DNA 和 RNA 末端的磷酸基团,用于后续的克隆和探针末端标记。在克隆中,对线性载体去磷酸化,防止自连。该酶可以作用于 5´ 突出端、凹陷端和平末端。热敏磷酸酶也可以用来降解 PCR 反应中的游离 dNTP,用于制备测序模板和 SNP 分析。热敏磷酸酶 在 70℃ 温育 5 分钟即可完全的、不可逆的失活,因此,在连接或末端标记之前,可以不用去除热敏磷酸酶。 

来源

克隆有 TAB5 AP 基因的 E. coli 菌株,该基因最初克隆于质粒 pNI 中,后来重新克隆于质粒 pEGTAB7-4.1 中。 

反应条件

1X 热敏磷酸酶反应缓冲液
[50 mM Bis Tris-丙烷 HCl,1 mM MgCl2,0.1 mM ZnCl2(pH 6.0 @ 25℃)],37℃ 温育。
热失活:80℃ 加热 2 分钟。 

质保声明

热敏磷酸酶经过严格的质控检测,确保该产品具有最高的活性和纯度。详情请登陆 www.neb.com 或 www.neb-china.com。 

单位定义

 
1 μg 经内切酶消化产生 5´ 凹陷末端的 pUC19 DNA 去磷酸化所需的酶量。去磷酸化标准是指在自连接反应中能抑制 > 95% 的 DNA 再环化(通过转化 E. coli 细胞来检测)。单位活性检测条件请登陆 www.neb.com 或 www.neb-china.com。
 

浓度

5,000 units/ml。 

参考文献

关于该酶性质和产品应用的参考文献,请登陆 www.neb.com 或 www.neb-china.com。