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转录调控酶试剂盒Takara Clontech

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转录调控
品牌 Code No. 产品名称 包装量 价格（元） 说明书 数量
Clontech 635057 A/C Heterodimerizer 500 μl ￥1,558 转录调控 转录调控 转录调控
Clontech 635056 A/C Heterodimerizer 5 × 500 μl ￥9,701 转录调控 转录调控 转录调控
Clontech 635081 iDimerize Regulated Transcription System Each ￥17,601 转录调控 转录调控 转录调控
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■ 制品说明
iDimerize技术可以通过化学诱导DNA结合结构域和转录激活结构域的二聚化来严格控制靶基因的转录激活。使用iDimerize方法用于转录调控的一个关键优势是它的低背景，因为在添加二聚体配体之前，转录激活结构域（activation domain, AD）是与DNA物理分离的。
转录因子是一种双功能蛋白质，它可以识别靶基因附近的特定DNA序列（通过DNA结合结构域），然后招募细胞的转录机制来激活转录过程（通过转录激活结构域）。虽然这两个结构域是作为单独的蛋白质表达并由A/C异源二聚体配体结合在一起的，但是它们仍然可以一起工作来激活转录过程。
 
A/C Heterodimerizer Ligand
A/C异源二聚体是一种人工合成的细胞渗透性配体，可用于诱导两种融合蛋白质的异源二聚化。例如，当与本试剂盒（Code No. 635081）一起使用时，A/C异源二聚体可诱导DmrC标记的转录AD与DmrA标记的DNA结合结构域发生二聚化反应。
 
调控转录过程
依次转染您感兴趣的细胞：
1. 表达转录激活结构域和DNA结合结构域的质粒（pHet-Act1-2）
2. 您感兴趣的基因克隆在PZI-1可诱导启动子的下游（pZFHD1-2）
DNA结合部分始终与启动子结合，但只有通过DmrA和DmrC结构域与转录激活部分相互作用，才能激活转录。当加入A/C异源二聚体时，两种组分相互作用，您感兴趣的基因就会从PZI-1启动子转录出来。
 
■ 制品特点
1. 应用iDimerize技术严格调控转录过程
2. 通过剂量依赖性小分子调控转录过程
3. 在加入二聚体配体之前，激活结构域与DNA物理分离，实现低背景
 
■ 制品应用
1. 以配体依赖的方式诱导基因表达
2. 分析促进细胞死亡、阻断细胞周期或其他有毒的基因
3. 功能基因组学研究
 
■ 保存
－20℃
 
■ 参考文献
Pomerantz, J. L., Sharp, P. A., & Pabo, C. O. Structure-based design of transcription factors. Science 267(5194), 93-96 (1995).
 
 
产品详情请点击：转录调控
 
 

M-MulV 反转录酶 货 号 #M0253L-NEB酶试剂 New England Biolabs

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M-MulV 反转录酶                              收藏

M-MulV 反转录酶 货 号 #M0253L M-MulV 反转录酶 货 号 #M0253L

货 号
规 格
价 格(元)
北京库存
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#M0253L
50,000 units
2,709.00
有
有
有
有
有

#M0253S
10,000 units
679.00
有
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特性

 合成 cDNA
 RNA 测序
 RT-PCR 

概述

莫洛尼氏鼠白血病病毒（M-MuLV）反转录酶是一种 RNA 介导的 DNA 聚合酶。该酶能以 RNA（合成 cDNA 时）或单链 DNA 做模板由引物起始合成一条互补的 DNA。M-MuLV 反转录酶无 3´→5´ 核酸外切酶活性。 

来源

重组 E. coli 菌株，携带有从 M-MuLV 中克隆的反转录酶基因。 

反应条件

1X M-MuLV 反转录酶反应缓冲液
[50 mM Tris-HCl (pH 8.3 @ 25℃)，75 mM KCl，3 mM MgCl2，10 mM DTT]，加入 dNTPs（不随酶提供），37-42℃ 温育。
热失活：65℃ 20 分钟。 

质保声明

无核酸内切酶、外切酶和 RNase 污染。 

单位定义

1 单位指以 poly(rA) 为模板、oligo(dT) 为引物，在 37℃ 条件下，10 分钟内催化 1 nmol 的 dTTP 掺入形成酸不溶性沉淀物所需要的酶量。单位活性检测条件请登陆 www.neb-china.com 或  

浓度

200,000 units/ml。 

参考文献

有关该产品特性和应用的参考文献请联系我们。  

模板置换反转录酶混合液 货 号 #M0466L-NEB酶试剂 New England Biolabs

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产品资料 – RNA 试剂 – cDNA 合成

模板置换反转录酶混合液                              收藏

货 号
规 格
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北京库存
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苏州库存

#M0466L
100 reactions
4,319.00
无
无
无
有
无

#M0466S
20 reactions
1,079.00
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有

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概述

 模板置换反转录酶和其相应的反应缓冲液能够在反转录反应中有效地实现模板置换。混合液中含有独特的反转录酶和小鼠 RNase 抑制剂。与竞争对手的反转录酶产品不同，NEB 的产品不需要添加任何添加剂（如 PEG 或甜菜碱）来优化性能，从而简化了反应建立流程。与模板置换寡核苷酸（TSO）搭配使用， 合成的 cDNA 3’端可以选择性地加入已知序列。由此获得的 cDNA 可进行 PCR 扩增，也可作为 5’RACE（ cDNA 末端快速扩增）或第二链 cDNA 合成的模板。

特性

  以极低起始量模板（单细胞/细胞核或 2 pg 总 RNA）制备 RNA-seq 文库

以最低起始量为 10 ng 的总 RNA 进行 5’RACE
降低 RNA-seq 或 5’RACE 的背景
该酶混合液包含小鼠 RNase 抑制剂，不需要额外添加
兼容各种模板置换寡核苷酸（TSOs）、反转录引物和 DNA 聚合酶,用于扩增全长 cDNA
与其他的 RNA-seq 方法（例如:Smart-Seq）相比，操作更快捷
 
模板置换反转录酶混合液中的反转录酶（RT）在其到达 RNA 模板的 5’末端后会添加几个非模板源的核苷酸。这几个非模板源的核苷酸可以与已知序列的模板置换寡核苷酸（TSO）退火，促使反转录酶从 RNA 模板上切换到 TSO 上。得到的 cDNA 含有 3’末端添加有已知序列（TSO 的互补序列）。该特征可用于多种下游应用，例如 cDNA 扩增、5’RACE（cDNA 末端快速扩增）和第二链 cDNA 合成。说明书中有优化的实验流程。
 
图 1：模板置换流程概览
 
 模板置换反转录酶混合液 货 号 #M0466L
 
当到达 RNA 模板的 5’端时，反转录酶会在 cDNA 的 3’端添加几个非模板源的核苷酸。这些非模板源的核苷酸可以与包含已知序列的模板置换引物退火,从而促使反转录酶从 RNA 模板上切换到 TSO 上。所得到的 cDNA 在 3′ 端包含一个通用序列（TSO 的互补序列）
 
图 2：在单细胞 RNA-seq 实验中,模板置换反转录酶混合液相对于 Smart-seq2 方法的优势
 
模板置换反转录酶混合液 货 号 #M0466L
 
gA.模板置换介导的 cDNA 扩增概述。反转录引物含有 5’接头，它与 TSO 一起在 cDNA 的 5’和 3’末端添加接头。之后可用识别接头序列的引物 PCR 扩增全部反转录产物。

B-D.使用 NEB 模板置换反转录酶混合液或 Smart-seq2 方法(Picelli, S. et al.(2014). Nat. Protoc. 9, 171-81)，用 10 μg Universal Human Reference（UHR） RNA （Agilent）与 ERCC RNA Spike-In Mix I（Thermo Fisher Scientific）生成 cDNA 文库。然后使用 NEBNext® Ultra™ II FS DNA 文库制备试剂盒（NEB＃E7805）将每个 cDNA 文库制成 Illumina 文库，并在 Nextseq 500 上使用 2 x 75 个循环测序。将测序采样 2 x 1.2 M 个 reads（除非另有说明），去掉接头 reads，并且使用 Prinseq 过滤。B.显示的是样品总 reads（Total reads）、去掉接头的 reads（Trimmed reads）和通过 Prinseq 过滤的 reads（Filtered reads）。插图列举了每种方法制备的 cDNA 文库的 Agilent Bioanalyzer 2100 结果。虚线框标注了非特异片段。C.使用 Salmon 将过滤的 reads 与 GENCODE 28 和 ERCC 转录物比对。图中的点表示从每个文库检测到的 TPM（每百万转录数）≥1 的转录物的数量作为测序深度。 D.使用 Hisat 2.0.7 将过滤的读数与 hg19 人参考基因组比对，并使用 Picard SAM / BAM RNA Seq Metrics 工具计算 RNA-seq 指标。该图显示了分布于外显子（红色），rRNA（橙色），内含子（绿色），基因间区域（蓝色）的匹配 reads 和不匹配 reads（灰色）的百分比。
 
 图 3：模板置换反转录酶混合液在 5’RACE 的实验中操作简单,性能优异
 
模板置换反转录酶混合液 货 号 #M0466L

A.模板置换介导的 5’RACE 概述。在模板置换反转录反应后，用反向基因特异性引物和正向 TSO 特异性引物进行 5’RACE PCR。
B.使用 NEB 模板置换反转录酶混合液 5’RACE 方案（左）或 Clontech SMARTer 5’/3’RACE 试剂盒（右）对多种 RNA 靶标的 5’RACE 产物进行琼脂糖凝胶分析。加入 1 μg 的 Jurkat 总 RNA，10 pg 的 8 kb 合成 RNA 和 10 ng 的 ERCC RNA Mix 1，用于评估作为转录物长度和拷贝数的性能。在 NEB 的反应中，反转录引物为 oligo (dT)40 VN，TSO 为 GCTAATCATTGCAAGCAGTGGTATCAACGCAGAGTACATrGrGrG，TSO 中特异性 PCR 引物用下划线标注。两种方法使用相同的基因特异性 PCR 引物。靶标名称和预期片段长度如图所示。
 
图 4：模板置换反转录酶混合液在第二链 cDNA 合成中操作简单，且可捕获完整的 5’末端转录产物
 

模板置换反转录酶混合液 货 号 #M0466L
A.模板置换介导的第二链 cDNA 合成概述。在反转录反应后，RNA 模板水解，使用 TSO 作为引物延伸合成第二链 cDNA。
 
B.使用 1 kb 的合成 RNA 作为模板，使用 poly（dT）40 VN 作为第一链 cDNA 合成的反转录引物。使用模板置换介导的方法或 Gubler 在文献中描述的方法—R and Hoffman,BJ.(1983) Gene,25,263-269，对第二链 cDNA 合成进行三个平行实验。所得到的双链 cDNA 产物使用反向引物用 Sanger 法对第二链 cDNA 进行测序。结果显示模板含有转录起始位点（TSS），并标注出了匹配序列。 添加到 cDNA 末端的 TSO 序列用灰色标注。未通过 Gubler 和 Hoffman 方法检测到的序列用蓝色标注。不可信读序区用黄色标注。
随产品提供的试剂
 
 
 

储存温度(℃)

浓度

模板置换反转录缓冲液

-20

4 X

 
 
产品类别：
cDNA合成和反转录产品
PCR，qPCR 和 扩增技术产品
 
应用
cDNA 合成
RNA 分析
 
储存温度
-20°C 
 

 

BIOARRAY HIGHYIELD RNA transcript labeling kit (T7) BioArray HighYield RNA 转录标记试剂盒 （T7） 品牌：Enzo

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品牌：Enzo
CAS No.：
储存条件：-20℃
纯度：–
产品编号

(生产商编号)

 等级 规格 运输包装 零售价(RMB) 库存情况 参考值

ENZ-42655-40

 – 40 Reactions –

BIOARRAY HIGHYIELD RNA transcript labeling kit (T7) BioArray HighYield RNA 转录标记试剂盒 （T7） 品牌：Enzo

 – –


* 干冰运输、大包装及大批量的产品需酌情添加运输费用


* 零售价、促销产品折扣、运输费用、库存情况、产品及包装规格可能因各种原因有所变动，恕不另行通知，确切详情请联系上海金畔生物科技有限公司。

产品描述相关资料下载相关产品浏览记录 RNA转录标记试剂盒 用于微阵列的转录标记的金标准 组分:10×HY Reaction Buffer
10×Biotin-Labeled Ribonucleotides
10×DTT
10×Rnase Inhibitor Mix
20×T7 RNA Polymerase

ProtoScript® II cDNA 第一链合成试剂盒 货 号 #E6560L-NEB酶试剂 New England Biolabs

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产品资料 – RNA 试剂 – cDNA 合成

ProtoScript® II cDNA 第一链合成试剂盒                              收藏

ProtoScript® II cDNA 第一链合成试剂盒 货 号 #E6560L

货 号
规 格
价 格(元)
北京库存
上海库存
广州库存
成都库存
苏州库存

#E6560L
150 次反应
6,319.00
无
有
有
无
无

#E6560S
30 次反应
1,579.00
有
有
有
无
无

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相关产品

 mRNA 磁性分离试剂盒
小鼠 RNase 抑制剂
随机引物混合液

特性

 提供酶混合液与反应混合液，建立反应更加便捷
 适合各种需求的 PCR
 不同起始量的 RNA 都能高效反转录
 合成至少 10 kb 长度的 cDNA
 2 管装混合液方便使用 

概述

ProtoScript II cDNA 第一链合成试剂盒含有两种经过优化的混合液，ProtoScript II 酶混合液与 ProtoScript II 反应混合液。酶混合液含 ProtoScript II 反转录酶和小鼠 RNase 抑制剂；反应混合液含 dNTPs 与经过优化的缓冲液。ProtoScript II 反转录酶是重组的 M-MuLV 反转录酶，降低了 RNase H 活性且提高了热稳定性。与野生型 M-MuLV 反转录酶相比，ProtoScript II 可在更高的温度下合成第一链 cDNA。该酶活性温度高达50℃，且具有特异性高、cDNA 产量高的特点。
该试剂盒还提供两种优化的反转录引物和无核酸酶污染的水。Oligo-dT 引物 [d(T)23VN] 能与 polyA 尾的起始端退火；优化的随机引物混合液能随机并持续性的与整个 RNA 模板配对，包括 mRNA 和无 poly A 尾的 RNA。第一链 cDNA 合成长度可达 10 kb。 

ProtoScript II cDNA 第一链合成试剂盒组份

– 10X ProtoScript II 酶混合液
– 2X ProtoScript II 反应混合液
– 随机引物混合液（60 μM）、Oligo d(T)23VN 引物（50 μM）**、无核酸酶污染的水

**Oligo d(T)23 VN 和随机引物混合液包含 1 mM dNTP 

如需稳定扩增不同种类的 DNA 模板，推荐使用 OneTaq® DNA 聚合酶或 Q5® 超保真 DNA 聚合酶。