上海金畔生物科技有限公司代理Takara Clontech酶试剂盒全线产品，欢迎访问官网了解更多产品信息和订购。
| 逆转录病毒滴度测定 | ||||||
| 品牌 | Code No. | 产品名称 | 包装量 | 价格（元） | 说明书 | 数量 |
| Clontech | 631453 | Retro-X qRT-PCR Titration Kit | 200 Rxns | ￥6,010 |  |
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| 腺病毒滴度测定 | ||||||
| 品牌 | Code No. | 产品名称 | 包装量 | 价格（元） | 说明书 | 数量 |
| Clontech | 632270 | Adeno-X GoStix | 20 Tests | ￥4,794 | |
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| Clontech | 632250 | Adeno-X Rapid Titer Kit | 120 Ttitrations | ￥6,575 | |
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| Clontech | 632252 | Adeno-X qPCR Titration Kit | Each | ￥5,815 | |
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| · Adeno-X Rapid Titer Kit是一种功能滴度测定方法，基于腺病毒六邻体蛋白质进行测定。 · Adeno-X qPCR Titration Kit是一种使用定量PCR技术测定腺病毒滴度的方法，快速、简单、高效。 · Adeno-X GoStix是一种即时灵敏的腺病毒滴度测定方法，可以在病毒扩增过程中提早检测腺病毒，确定收获病毒的理想时间。 |
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| Adeno-X Rapid Titer Kit | ||
| 该试剂盒中包含一种六邻体蛋白质特异性抗体，用于标记感染细胞。六邻体蛋白质由腺病毒基因组编码，是腺病毒衣壳的重要组成部分，为腺病毒复制所需要，但是它的表达需要依赖于E1基因产物。因此，像HEK 293这样的E1基因反式互补细胞类型，可以用来测定腺病毒感染活性，原因是只有细胞被感染才能表达六邻体蛋白质。这种快速测定方法需要先花费1-2小时建立体系，两天后再花费大约3小时对细胞进行标记、染色和计数。每个染色细胞对应一个感染单位。这种检测方法可与1型、2型、5型和6型人腺病毒相兼容。我们已经对基于5型人腺病毒的Adeno-X病毒进行了验证，Adeno-X病毒由Takara Adeno-X腺病毒载体系统所制备。 | ||
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| Adeno-X qPCR Titration Kit | ||
| 这种测定方法可以用于检测所有Ad5-based腺病毒载体，当然也可以检测使用Takara Adeno-X腺病毒载体系统所制备的重组腺病毒。结合使用了qPCR和TB Green，这样就可以依据校准的DNA标准曲线来确定腺病毒制剂（如粗裂解液或纯化病毒粒子）中的病毒基因组拷贝数。这种测定方法只需要大约4小时就可得出检测结果，而由于qPCR滴定花费时间短，所以实验人员在收获病毒的同一天，就可以使用经过准确滴定的病毒去感染目标细胞。 | ||
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| Adeno-X GoStix | ||
| 这是一种即时灵敏 (～10 min)的腺病毒滴度测定方法，让您可以对腺病毒是否制备完毕迅速做出判断以做好使用准备，也是确定扩增后收获病毒最佳时间的理想选择。只需要将20 μl培养液上清添加至GoStix检测板上样孔中，随后滴加4滴缓冲液，等待2-20分钟，检测板上的检测窗口会出现一条带。在上清液中检测到的腺病毒数量与细胞内产生的腺病毒是密切相关的。每次测试都可以保证足够高的灵敏度，使用少量病毒上清液就可以进行检测，也可以用于确保在腺病毒扩增过程中获得尽可能大的病毒收量（我们使用这些检测板来确定从感染细胞中收获病毒的最佳时间）。感染HEK293细胞后，每天只需要取20 μl上清液进行检测。检测窗口出现一条颜色很深的Test条带，可以确保在产毒高峰时期收获高滴度的腺病毒。 | ||
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| Overview | ||
| · 使用Adeno-X Rapid Titer Kit (六邻体检测) 或者Adeno-X qPCR Titration Kit (基因组检测)在4小时内获得功能滴度 · 与空斑形成试验或者终点稀释法相比，更准确、更省时 · 使用Adeno-X GoStix在10分钟内定性测定腺病毒滴度 · 使用Adeno-X GoStix快速确定最佳病毒收获时间 |
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| TECH NOTE | ||
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| FAQs | ||
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| 慢病毒滴度测定 p24 ELISA | ||||||
| 品牌 | Code No. | 产品名称 | 包装量 | 价格（元） | 说明书 | 数量 |
| Clontech | 632200 | Lenti-X p24 Rapid Titer Kit | 96 Rxns | ￥7,076 ￥5,661 |
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*红字为促销价格，促销时间: 2022年9月1日-2022年10月31日
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| 杆状病毒滴度测定 | ||||||
| 品牌 | Code No. | 产品名称 | 包装量 | 价格（元） | 说明书 | 数量 |
| Clontech | 631406 | BacPAK™ Baculovirus Rapid Titer Kit | 5 Assays | ￥5,852 | |
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| Clontech | 631414 | BacPAK™ qPCR Titration Kit | 200 Rxns | ￥5,985 | |
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| 产品介绍 |
| 本试剂盒提供了一种快速简单的方法来确定杆状病毒种群的滴度。使用标准免疫测定法在48小时内即可准确测定杆状病毒滴度，而斑块和终点稀释测定法通常需要5-10天。 在BacPAK杆状病毒表达系统中，感染细胞在斑块形成前长时间表达病毒抗原。BacPAK快速滴定测定法可以在短暂的潜伏期后用于滴度测定。此外，得到的滴度与通过其它方法获得的滴度相当。该试剂盒适用于滴度大于104 pfu/ml的任何病毒库，并且与所有常用（基于AcMNPV）的杆状病毒表达系统兼容。 本试剂盒使用的一抗是针对AcMNPV包膜糖蛋白质（gp64）的单克隆抗体，用来准确鉴定病毒感染的细胞。二抗偶联了HRP，可以通过光学显微镜观察感染的细胞，并且确定病毒滴度。最近我们将操作流程进行了升级，为鉴定细胞提供更好的信噪比。 |
| BacPAK qPCR Titration Kit |
| 本试剂盒为测定病毒种群滴度提供了非常快速和简单的方法，在使用qPCR和绿色嵌合染料技术确定病毒基因组的内容之前，可快速进行DNA纯化。实验操作仅需4 h，并且与基于AcMNPV的任意的杆状病毒载体兼容。通过qPCR的方法，实验人员可以在同一天内完成病毒收获和靶细胞感染。因而可以避免因操作时间过长导致的病毒感染性降低，同时可以用已知的多重感染（MOI）影响靶细胞从而获得更一致的结果。 BacPAK qPCR滴定通过校准的DNA标准曲线确定杆状病毒制剂中的病毒基因组拷贝数。过程比较简单：将病毒DNA和BacPAK对照DNA连续稀释并进行qPCR绘制标准曲线。然后通过将每个病毒的Ct值带入标准曲线中，即可算出病毒DNA的拷贝数。 BacPAK qPCR滴定试剂盒具有简便，重复性好和处理时间短等特点，是测定杆状病毒DNA滴度的理想选择。 |
| 为什么要知道滴度？ |
| ● 确认包装反应成功，以免浪费时间 ● 确保实验的一致性 ● 确保足够的MOIs，以实现100%的细胞转导 ● 控制拷贝数，进而控制表达水平 |
| 产品特点 |
| ● 节省时间，将杆状病毒表达实验的时间控制在6天以内 ● 无需麻烦的斑块测定 ● 与任意基于AcMNPV的杆状病毒表达系统兼容 ● 快速测定病毒滴度 ● 收获、滴定和感染可在一天内完成 ● 准确的滴度产生一致的感染结果 |
| 应用 |
| 确定杆状病毒滴度，以优化重组蛋白质表达 |
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| 慢病毒滴度测定 10分钟快速测定 | ||||||
| 品牌 | Code No. | 产品名称 | 包装量 | 价格（元） | 说明书 | 数量 |
| Clontech | 631280 | Lenti-X GoStix Plus(20) | 20 Tests | ￥5,811 ￥4,649 |
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| Clontech | 631281 | Lenti-X GoStix Plus(50) | 50 Tests | ￥11,811 | |
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*红字为促销价格，促销时间: 2022年9月1日-2022年10月31日
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| 10分钟定量慢病毒滴度测试— Lenti-X GoStix Plus | |||||||||||||
| Lenti-X GoStix Plus提供了一种快速、简便、有效的方法，可以在非常短的时间内检测包装细胞上清液中的慢病毒滴度。这种检测方法包括将20 μl上清液添加到GoStix cassette中，等10分钟以等待表明慢病毒p24蛋白质存在的条带出现。我们早期的GoStix提供的是定性检测结果，而升级后的Lenti-X GoStix Plus的检测结果可以使用智能手机免费app进行分析，可以通过该应用程序比较条带强度来量化慢病毒滴度。 Lenti-X GoStix app的定量检测结果（称为GoStix值或GV）可用于比较不同包装系统所产生的病毒量，其方式类似于ELISA方法，但比ELISA要更简便和快捷得多，可借助参考病毒计算出实际的IFU/ml。访问我们的FAQs页面，了解如何下载和使用智能手机app的相关信息。通过简便快速的慢病毒定量方式，Lenti-X GoStix Plus可以使您的转导实验方案差异更小化，确保每次实验可以达到更为一致的转导效果。 |
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| ■ Overview | |||||||||||||
| · 使用简单的智能手机app在10分钟内量化慢病毒滴度* · 确定收集慢病毒上清液的理想时机 · 确保实验达到一致的转导效果 |
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| *最初的Lenti-X GoStix（Code No. 631243和631244）不能使用智能手机app进行慢病毒定量，并且该产品在逐步淘汰过程中。库存销售完毕后，将不再销售这些产品。如果需要的话，Lenti-X GoStix Plus可以使用与原始Lenti-X GoStix相同的方式进行定性分析。 |
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| ■ 应用 | |||||||||||||
| · 确定慢病毒包装反应是成功的 · 比较不同包装系统所产生的病毒量 |
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| ■ 观看视频 | |||||||||||||
| Applying lentiviral supernatants |
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| 了解如何将样品正确添加至Lenti-X GoStix Plus cassette。 |
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| Calculating lentiviral titer |
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| 了解如何使用智能手机免费app扫描Lenti-X GoStix Plus cassette。 |
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| ■ 实验例 | |||||||||||||
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| 图1. 展示了慢病毒载体滴度测定的常用方法及其相关时间表（以小时为单位）。使用Lenti-X GoStix Plus进行滴度测定仅需要十分钟，其测定时间远远短于传统方法。Lenti-X GoStix Plus：一种基于侧向层析技术的检测方法，用于检测上清液中的慢病毒p24衣壳蛋白质。qRT-PCR：通过qRT-PCR方法定量病毒RNA基因组。ELISA：检测p24衣壳蛋白质的量。PCR：通过qPCR测定整合的DNA前病毒。IFU（FACS）：通过FACS分析RFP/GFP阳性细胞测定被感染靶细胞的百分比。IFU（筛选）：通过检测转导细胞群中抗药细胞克隆的数量来确定感染单位。 |
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| 图2. p24的产生，GoStix值和IFU/ml值都取决于收获病毒的时间。使用Lenti-X Single Shot按照制造商操作指导制备ZsGreen1慢病毒一式两份，并在指定时间收集病毒。在每个时间点，使用Lenti-X GoStix Plus分析样品的GV值，使用HT1080细胞测定病毒稀释液确定IFU/ml。检测结果除了表明GV（i.e., p24积累）和IFU/ml取决于收获时间之外，这些数据还表明GV和IFU/ml之间的比率随时间的变化而变化。 |
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| 图3. 使用Lenti-X GoStix Plus测定的病毒滴度与不同浓度病毒的转导滴度是有相关性的。使用Lenti-X Packaging Single Shots慢病毒包装系统制备Lenti-X ZsGreen1慢病毒。将制备出的病毒样品进行梯度稀释，添加到Lenti-X GoStix Plus cassettes中，进行密度分析测定滴度。另外，将每个梯度稀释液使用HT1080细胞测定实际的IFU/ml。未知样品的IFU/ml使用GV与IFU/ml的比值进行计算，该比值由使用与未知样品相同的包装系统和在相同的时间收集的参考病毒来确定。然后以使用Lenti-X GoStix Plus测定并计算出的IFU/ml与实际IFU/ml作图。 |
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| 图4. Lenti-X GoStix App通过测定测试（T）和对照（C）条带的相对强度来定量病毒滴度。Lenti-X GoStix App使用智能手机相机确定测试（T）和对照（C）条带的相对强度，并使用比率计算滴度。 |
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| 图5. 使用Lenti-X GoStix Plus测定的病毒滴度与不同包装系统的转导滴度是有相关性的。使用市面上销售的三种不同的慢病毒载体和包装系统制备ZsGreen1慢病毒。将所有制备样品稀释并添加到Lenti-X GoStix Plus cassettes中并进行分析。另外，将每个梯度稀释液使用HT1080细胞测定实际的IFU/ml。使用与未知样品相同的包装系统和在相同的时间收集的参考病毒所确定的GV与IFU/ml的比值，计算每个未知样品的IFU/ml。 |
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| 图6. 比较使用Lenti-X GoStix Plus测定的病毒滴度和基于ELISA方法测定的病毒滴度。Lenti-X GoStix Plus测定的病毒滴度可以与基于ELISA方法测定的病毒滴度以相同的方式使用Lenti-X Packaging Single Shots慢病毒包装系统制备Lenti-X ZsGreen1慢病毒。使用HT1080细胞测定转导细胞的百分比（％转导），然后进行FACS分析。此外，使用Lenti-X p24 Rapid Titer Kit测定病毒p24值，使用Lenti-X GoStix Plus确定GoStix值。以一定范围MOIs的病毒转导HT1080细胞，以其转导效率和等同的ELISA和GoStix值作图。转导后48小时拍摄转导细胞的荧光图像。 |
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