转铁蛋白的概念及作用

转铁蛋白是血浆中主要的含铁蛋白质，转铁蛋白分子量约7.7万，为单链糖蛋白，含糖量约6%。

转铁蛋白的概念：

铁蛋白又名运铁蛋白（transferrin，TFR，siderophilin），负责运载由消化管吸收的铁和由红细胞降解释放的铁。

血浆中转铁蛋白水平可用于贫血的诊断和对治疗的监测。在缺铁性的低血色素贫血中转铁蛋白的水平增高（由于其合成增加），但其铁的饱和度很低（正常值在30%-38%）。相反，如果贫血是由于红细胞对铁的利用障碍（如再生障碍性贫血），则血浆中TRF正常或低下，但铁的饱和度增高。在铁负荷过量时，TRF水平正常，但饱和度可超过50%，甚至达90%。

转铁蛋白是一类广泛存在于脊椎动物体液及其细胞中的Ⅱ类跨膜糖蛋白家族，主要有血清运铁蛋白、卵运铁蛋白和乳转铁蛋白3种类型，不同种类的转铁蛋白有不同的物理、化学和免疫特性，但均由两个三价铁离子结合位点。这类物质大量存在于人血管中，是体液中不可缺少的成分，不仅参与铁的运输与代谢，参与呼吸、细胞增殖和免疫系统的调节，还能调节铁离子平衡和能量平衡，更具有抗菌杀菌的保护功能。

转铁蛋白的作用：

转铁蛋白以TRF-Fe3+的复合物形式进入骨髓中，供成熟红细胞的生成。转铁蛋白分子量约7.7万，为单链糖蛋白，医学|教育网搜集整理含糖量约6%.TRF可逆地结合多价离子，包括铁、铜、锌、钴等。每一分子TRF可结合两个三价铁原子。TRF主要由肝细胞合成，半寿期为7天。血浆中TRF的浓度受铁供应的调节，在缺铁状态时，血浆TRF浓度上升，经铁有效治疗后恢复到正常水平。

lb培养基是什么培养基

培养基（Medium）是供微生物、植物组织和动物组织生长和维持用的人工配制的养料。那么LB培养基是什么培养基？LB一般被解释为Luria-Bertani，然而根据其发明人贝尔塔尼(Giuseppe Bertani)的说法，这个名字来源于英语lysogeny broth，即溶菌肉汤。LB培养基是近年来用于培养基因工程受体菌(大肠杆菌)的常用培养基之一。

LB培养基是一种培养基的名称，是微生物学实验中最常用的培养基，生化分子实验中一般用该培养基来预培养菌种,使菌种成倍扩增,达到使用要求.可分为液体培养基和固体培养基。

LB培养基是一种应用最广泛和最普通的细菌基础培养基，有时又称普通培养基，含有酵母提取物、胰化蛋白胨和NaCl。

酵母提取物：酵母经破壁后将其中蛋白质、核酸、维生素等抽提，再经生物酶解的富含小分子的氨基酸、肽、核苷酸、维生素等天然活性成分的淡黄色粉末，其中氨基酸含量30%以上，总蛋白50%以上，核苷酸10%以上，广泛用作生物培养基和食品调味品制造原料。

胰化蛋白胨：一种优质蛋白胨，是以新鲜牛肉和牛骨经胰酶消化，浓缩干燥而成的白色粉末，含有丰富的氮源、氨基酸等。

酵母提取物为微生物提供碳源、能源、磷酸盐、生长因子、维生素等;蛋白胨主要提供氮源;NaCl主要提供微生物生长环境(如渗透压)，其次是提供无机盐。

在配制固体培养基时还要加入一定量琼脂作凝固剂。琼脂在常用浓度下96℃时溶化，一般实际应用时在沸水浴中或垫以石棉网直接煮沸溶化。琼脂在40℃时凝固，通常不被微生物分解利用。固体培养基中琼脂的含量根据琼脂的质量和气温的不同而有所不同。

由于这种培养基多用于培养细菌，因此，要用稀酸或稀碱将其pH调至中性或微碱性，以利于细菌的生长繁殖。

LB培养基用途

用于一般细菌培养，特别用于分子生物学试验中大肠杆菌的保存和培养。
LB培养基使用原理：
蛋白胨、酵母膏粉提供氮源、维生素和生长因子;氯化钠维持均衡的渗透压;葡萄糖提供碳源;琼脂是培养基的凝固剂。
LB培养基配制方法

配制每升培养基，应该在950 ml去液态lb培养基离子水中加入：胰化蛋白胨10g 酵母提取物5g NaCl 10g 摇动容器直至溶质溶解。用5mol/LNaOH调pH至7.0。用去离子水定容至1L。在15psi高压下蒸汽灭菌20min。
LB固体培养基1L和液体一样，加15g琼脂粉，一定要在温度降下之前加好抗固态LB培养基生素，并且倒好板。
LB固体培养基倒板
1.配制：100ml LB培养基加入1.5g琼脂粉。
2.抗生素的加入：高压灭菌后，将融化的LB固体培养基置与55℃的水浴中，待培养基温度降到55℃时(手可触摸)加入抗生素，以免温度过高导致抗生素失效，并充分摇匀。
3.倒板：一般10ml倒1个板子。培养基倒入培养皿后，打开盖子，在紫外下照10-15分钟。
4.保存：用封口胶封边，并倒置放于4℃保存，一个月内使用。 配400ml的话成分按比例减少就行了，pH还是要按规定的。
LB培养基设计不同的离子对大肠杆菌生长状况的影响

以下方法仅供参考：
1.首先养几个平板固体培养基培养的大肠杆菌，保证这些细菌来自于同一个克隆;
2.采用液体培养并用分光光度计测定浊度来评价大肠杆菌生长。
3.盐可选择氯化钠、氯化钾、氯化镁、氯化锌、铵盐、磷酸盐等;
4.浓度差别可做，可不做;
5.因为分光光度计的准确性有一定要求，培养时间就不能太长，最多8小时;
根据这些条件设计实验就容易了。大体上是，先配制好各种液体培养基;然后从1中挑一个菌落放到一个起始的基本LB液体培养基，培养到稍微有点浑时，就可以向各种培养基中加同样体积的细菌;最后就是测定OD值了。记得每个培养基做3个重复管。

常用的刚果红培养基，你知道属于哪一类培养基吗？

培养基是供微生物、植物组织和动物组织生长和维持用的人工配制的养料。一般分为天然培养基、组合培养基、固体培养基、液体培养基等，那我们常用的刚果红培养基属于哪一类的？

刚果红培养基属于哪一类培养基：

刚果红培养基属于固体培养基,因为最后能在培养基上看到因分解纤维素形成的透明圈,在液体培养基中不可能形成透明圈.

是鉴定培养基,因为该培养基上也能生长其他微生物,例如有些自养型微生物就能在该培养基上生存；不过只有纤维素分解菌周围才会形成透明圈,从而将该菌落鉴定出来.

也是区分选择培养基,例如在配置培养基的时候不添加氮源,那么该培养基上只有有固氮作用的微生物才能生存!

刚果红培养基的原理：

刚果红培养基中刚果红染料移动,刚果红染料进入产纤维素酶真菌,产纤维素酶真菌首先分解纤维素物质为含有葡聚糖等结构的多聚糖类物质,多聚糖与刚果红形成多聚糖-刚果红复合物,复合物不仅被吸附在菌丝外,而且能被进一步转运吸收至菌丝内部.通过进一步的降解,多聚糖被分解而加以利用,而刚果红则被保留在菌丝体内,使菌落呈现红色.所以,纤维素-刚果红培养基可作为分离、筛选纤维素分解真菌的特异性培养基.

刚果红培养基的配方及原理

纤维素刚果红培养基用于纤维素分解菌的分离和鉴别，纤维素分解菌周围有红色分解圈。

刚果红培养基的配方：

硝酸钠                         1.0

磷酸氢二钠                   1.2

磷酸二氢钾                   0.9

硫酸镁                         0.5

氯化钾                         0.5

酵母浸出粉                   0.5

酸水解酪蛋白                0.5

刚果红                         0.2

纤维素粉                      5.0

琼脂                            15.0

pH值7.0 ± 0.1 25℃

刚果红培养基的用法：

称取本品25.3g,加热溶解于 1000ml 蒸馏水中,分装,121℃高压灭菌 15 分钟,备用。

纤维素刚果红培养基筛选菌种的原理:

1、刚果红可以跟大分子多糖牢固结合。

2、纤维素是大分子多糖，跟刚果红牢固结合。

3、纤维素酶降解平板中的纤维素成小分子糖，那么刚果红无法与小分子糖结合，就被洗脱下来，呈现透明圈。

4、在通常的纤维素刚果红培养基筛选菌种的程序中，先用含有纤维素的平板培养菌，等菌长出来后，把菌体刮离，然后加入刚果红染色10-15分钟，再用NaCl冲洗2-3次，产生透明圈的就是能水解纤维素的菌。也可以把刚果红直接加到平板中，菌在生长过程中也会逐渐形成透明圈，不过前面的方法更为灵敏。

纤维素刚果红培养基是鉴定培养基,因为该培养基上也能生长其他微生物,例如有些自养型微生物就能在该培养基上生存；!不过只有纤维素分解菌周围才会形成透明圈,从而将该菌落鉴定出来.

TTC染色液的原理及作用

        TTC染色液的原理及作用：2,3,5-氯化三苯基四氮唑 (TTC)是脂溶性光敏感复合物，常用于检测种子的生存能力以及检测哺乳动物组织的缺血梗塞。它是呼吸链中吡啶—核苷结构酶系统的质子受体，能与正常组织中的脱氢酶反应而呈红色。正常脑组织和有活力种子胚组织活细胞中的脱氢酶可以将TTC还原成不溶性的红色稳定的三苯基甲臢(TTF)，如果脑组织细胞或胚种细胞死亡或生活力衰退，则不能染色或染色较浅。因此可以根据染色部位和染色深浅程度来鉴定脑组织或者种子的活力。 

结果判断：

正常组织被染成红色，脑梗死区不被染色。

TTC染色液的优点：

① 方法简便易行。取材于新鲜组织, 方便易行；而常规 HE 染色则需要固定及包埋标本, 并且经切片后才能染色。

② 节省时间。TTC 染色的全过程约 15～30min，远远优于 HE 染色。

③ 所需仪器设备简单。与 HE 染色所需的切片机、包埋盒等相比，TTC 染色几乎不需要特殊的实验器材。

④ TTC染色液可重复使用。在 3 天时间内，10 ml 的 TTC 染液可重复使用 2～3 次，大约能染 18 张切片。

注意事项：

1.TTC溶液若变成红色则不可再用。 

2.显色时要使组织切片全部浸入TTC染色液中。

3.TCC染色后应立即观察，不可久放。 

4.为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。

    北京上海金畔生物科技有限公司科技有限公司自产产品TTC染色液，分为0.4% TTC染色液和2% TTC染色液两种不同的浓度，货号分别为G3004和G3005，常用于生化实验中检测种子的生存能力以及检测哺乳动物组织的缺血梗塞。