上海金畔生物科技有限公司福林酚的制备及应用

 福林酚的制备：

向2000mL的磨口回流瓶中加入100g钨酸钠、25g钼酸钠及700mL的去离子水，再加入50mL85%的磷酸及l00mL浓盐酸，充分混合后，接上回流冷凝管，以小火回流10小时，结束后再加入150g的硫酸锂(Li2SO4)、50mL去离子水及数滴液溴，再继续沸腾15分钟，以驱除过量的溴，冷却后滤液呈黄绿色(如仍呈绿色，需再重复滴加溴水的步骤)，加去离子水定容至1000mL，过滤，滤液置于棕色试剂瓶中，贮于冰箱中可长期保存备用。此溶液使用时可按1:3比例用去离子水稀释。

福林酚的原理：

蛋白质与福林酚试剂反应，生成深蓝色复合物，蓝色的深浅与蛋白质含量成正比。可用分光光度计于500nm波长下进行测定。与标准曲线对照，而确定蛋白质含量。试剂中的 W6+在碱性条件下，与体系中存在的酚羟基发生反应，得到呈现蓝色的W5+。

福林酚的应用：

福林酚适用于对体系中存在酚羟基化合物其含量的比色法、分光光度法。用于蛋白质含量的测定，蛋白的颜色反应，浓度的测定.蛋白质分子中有含酚基的氨基酸(如酪氨酸、色氨酸等)与福林酚反应，生成深蓝色复合物，蓝色的深浅与蛋白质含量成正比。

福林酚的操作方法：

1、标准曲线的制作：   取14支试管分成两组，分别加入0、0.1、0.2、0.4、0.6、0.8、1mL标准蛋白质溶液(250μg/mL)，用水补足到1mL，加入5mL试剂甲，混匀，于20-25℃放置10分钟，再加入0.5mL试剂乙，立即摇匀，在20-25℃保温30分钟，然后于500nm处比色。测定光密度值，取两组测定的平均值，以蛋白质浓度为横座标，光密度值为纵座标，绘制标准曲线值为定量的依据。

2、样品测定：    取1mL样品溶液（约合20-250μg/多肽或蛋白质）加入5mL试剂甲混匀，于20-25℃放置10分钟，再加0.5mL试剂乙（Folin-酚），立即摇匀，在20-25℃保温30分钟，然后于500nm处比色，以1mL水代替样品作空白对照。测定后，可以在标准曲线中查出未知样品的浓度。若用0.5cm光程的比色杯进行比色，可按下面方法进行操作：取0.2mL样品溶液（约含5-100μg多肽或蛋白质）加入1mL试剂甲（可选用0.3-0.5cm直径的小试管）混匀，10分钟以后，再加入0.1mL试剂乙 ，立即混匀，30分钟后比色。一般来说，若多肽或蛋白质的浓度在2-25μg，测波长755nm,，而25μg以上则采用500nm比色为宜。

使用福林酚的注意事项：

1、FolIn试剂显色反应由酪氨酸、色氨酸、半胱氨酸引起，因此样品中若含有酚类、柠檬酸和巯基化合物，均有干扰作用。

2、福林酚仅在酸性条件下稳定，所以加入试剂乙后要立即混匀，在试剂乙被破坏之前完成反应，否则显色程度减弱。用该方法测定蛋白浓度会受到蛋白质的特异性影响，即不同蛋白质因络氨酸、色氨酸含量的不同而使显色强度稍有不同，标准曲线也不是严格的直线形式。

上海金畔生物科技有限公司是生化试剂供应商，专业生产销售生化试剂、生物试剂、细胞培养基、实验耗材等产品。福林酚为上海金畔生物科技有限公司自产产品，其货号为F8060。

封片剂的使用方法

封片剂：一般是指在涉及载玻片和盖玻片的实验中需要用到的一种粘稠剂。方便标本样品的保存和信号的保留，具有隔绝空气的作用。一般我们用到的有普通封片剂和抗荧光淬灭的封片剂。下面以一个例子来讲讲吧。

就来讲讲组化最后的事吧–封片。这个实验中我们可以选择的封片较多，可以用中性树脂和甘油明胶等。那就以甘油明胶来说吧。

首先将甘油明胶加热融化。因为在常温情况下，甘油明胶是半凝固状的，浓稠的粘稠体，不利于盖玻片的使用。

接下来就是利用移液枪或者干净的玻璃棒吸取或者沾取甘油明胶滴在组织上，观察液体表面是否有小气泡，若有，则尽量用一个盖玻片占去；若无，就直接用盖玻片和载玻片成一定角度（边缘靠近液滴）慢慢的靠近液滴，让液体慢慢的赶出盖玻片和载玻片之间的空气。

最后，只要将封好的片子晾干即可。

这里面需要注意的就是避免气泡出现在组织中，若不小心有气泡了，也要将气泡赶出组织的范围，不能影响观察结果和样品的保存。

标准品（标准物质）

 标准品即标准物质，是中药标准对照品研究中心代理的作为一种衡量标准；用做药物方面，则为含量测定中的标准含量。标准品包括化学计量标准品、冶金标准品和药检标准品。              

国家药品标准品是指国家药品标准中用于鉴别、检查、含量测定、杂质和有关物质检查等标准物质，它是国家药品标准不可分割的组成部分。国家药品标准物质是国家药品标准的物质基础，它是用来检查药品质量的一种特殊的专用量具；是测量药品质量的基准；也是做为校正测试仪器与方法的物质标准；在药品检验中，它是确定药品真伪优劣的对照，是控制药品质量必不可少的工具。     

中国药品生物制品检定所已能提供各类国家标准物质1242种，其中中药化学对照品288种，对照药材400种，两者占总数的一半以上，其制备与标定应符合“生物制品国家标准物质制备和标定规程”要求，并由国务院药品监督管理部门指定的机构分发。企业工作标准品或参考品必须经国家标准品或参考品标化后方能使用。          

北京上海金畔生物科技有限公司科技有限公司是长期从事生化试剂耗材生产和销售的厂家。备有大量现货标准品，既有实验常用的种类，例如： D(+)-无水葡萄糖、环丙沙星、维生素E等。也有特殊的标准品，例如：槲皮素-7-O-葡萄糖苷、喜树碱、川楝素等。供科研单位用于生物测定、抗生素或生化药品中含量或效价测定实验的使用。

醋酸钠的性质及用途

醋酸钠也叫乙酸钠，一般以带有三个结晶水的三水合乙酸钠形式存在。醋酸钠在水溶液中，是一种很弱的碱（pKb=9.24）。

醋酸钠的性质：

无色无味的结晶体，在空气中可被风化。 溶于水和乙醚，微溶于乙醇。

注意事项：

①醋酸钠晶体容易吸潮，药品量可适当增加。

②尘土亦能使过饱和溶液结晶，所以平底烧瓶要洁净，瓶口要盖严。

③晶种要细小，晶形要好，这样晶体生长缓慢，现象清晰。

醋酸钠的用途：

醋酸钠可用于测定铅、铜、镍和铁等，也是一种常用的缓冲剂。在核酸提取中，加入乙酸钠缓冲液，可调节盐离子的浓度，中和核酸分子的负电荷，便于加入乙醇后使DNA沉淀下来。

配制方法：

3 M 乙酸钠（pH=5.2）的配制：在800ml水中溶解408.1g三水乙酸钠，用冰醋酸调节pH值至5.2，加水定容至1L，分装后高压。

暗盒的使用方法及注意事项

规格：5*7和8*10

产品简介：

    暗盒是一种在避光条件下进行信号收集的工具，在暗室中操作，将胶片压入暗盒，能很好的固定膜和胶片的相对位置。让膜上的信号很好的反映在胶片上。是暗室曝光（western）中很好的帮手。

使用方法：

    第一步，信号源（膜）的放置：将用发光液孵育过的膜放置在暗盒的中间位置，将一层透明薄膜覆盖在膜上；

    第二步，调试适当的红外光强度，将暗室中其它的灯光关闭，使暗室中只存在红外光，在红外光的条件下取出胶片，裁剪合适大小，做好标示，正压在膜上，然后盖上暗盒，计时。

    第三步，取出暗盒中的胶片进行显影等操作。

注意事项：

    1、保持暗盒表面和内部的干净整洁，因为污物有可能会有荧光信号，对结果造成不利影响。

    2、暗盒的使用时注意白光和红外光的分段，在压胶片收集信号时，暗盒的放置位置尽可能的避免白光照射