Ligation Pack DNA连接试剂 品牌:Nippon Gene


Ligation Pack

DNA连接试剂

品牌:Nippon Gene
CAS No.:
储存条件:-20℃
纯度:
产品编号

(生产商编号)

等级 规格 运输包装 零售价(RMB) 库存情况 参考值

310-01471

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Quick Ligation™ 快速连接试剂盒 货 号 #M2200L-NEB酶试剂 New England Biolabs

上海金畔生物科技有限公司代理New England Biolabs(NEB)酶试剂全线产品,欢迎访问官网了解更多产品信息和订购。

产品资料 – DNA修饰酶与克隆技术 – DNA 连接酶

Quick Ligation 快速连接试剂盒                              收藏

Quick Ligation™ 快速连接试剂盒               货   号                  #M2200L Quick Ligation™ 快速连接试剂盒               货   号                  #M2200L Quick Ligation™ 快速连接试剂盒               货   号                  #M2200L

货 号
规 格
价 格(元)
北京库存
上海库存
广州库存
成都库存
苏州库存

#M2200L
150 次反应
4,589.00

#M2200S
30 次反应
1,069.00

Download:       

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  • compatible ends     | 
  • single letter code

特别提供

快速末端平齐化™ 和快速连接试剂盒
#E0542S 20 次反应 . . . . . .¥1,809
#E0542L 100 次反应 . . . . . .¥7,199

特性

 5 分钟快速连接粘性末端或平末端
 室温下即可进行连接反应
 T/A 克隆
 dsDNA 切刻修复 

Quick Ligation™ 快速连接试剂盒               货   号                  #M2200L

概述

本试剂盒在室温(25℃)反应 5 分钟,即可完成 DNA 粘性末端或平末端的连接反应。 

快速连接试剂盒组份

– 快速 T4 DNA 连接酶(重组酶)
– 2X 快速连接反应缓冲液 

2X 快速连接反应缓冲液

132 mM Tris-HCl,20 mM MgCl2,2 mM DTT,2 mM ATP,15% 聚乙二醇(PEG 6000),pH 7.6 @ 25℃。 

质保声明

该试剂盒经过严格的质量控制检测,以确保该产品的最高纯度和效率。详情请登陆www.neb.com 或 www.neb-china.com。

注意事项

用快速连接试剂盒能使大多数连接反应在 25℃ 条件下 5 分钟甚至更短时间内达到反应终点,增加反应时间不会提高反应效率。事实上,连接 1 小时后转化效率会降低,如果 25℃ 过夜反应,转化效率会下降 75%。
电转化可以使转化效率提高几个数量级。在用快速连接反应产物做电转化前,一定要降低 PEG 浓度。推荐使用柱离心式 DNA 纯化方法,或选择电转连接酶(NEB #M0369)。 |

Quick Ligation™ 快速连接试剂盒               货   号                  #M2200L

快速连接进程曲线:LITMUS 28i 载体经 EcoRV 切割(平齐末端)或 HindIII 切割(粘性末端)后,用小牛肠碱性磷酸酶(CIP)处理,胶回收纯化。插入片段来自 HaeIII 消化的 φX174 DNA 产物(平齐末端)或HindIII 消化的 λDNA 产物(粘性末端),插入片段和载体的比例为 3:1,使用快速连接试剂盒进行连接。连接产物转化入化学方法制备的大肠杆菌感受态细胞,在 LB-amp 平板上 37℃ 过夜培养。

DNA Ligation Kit Ver.2.1酶试剂盒Takara Clontech

上海金畔生物科技有限公司代理Takara Clontech酶试剂盒全线产品,欢迎访问官网了解更多产品信息和订购。

DNA Ligation Kit Ver.2.1
品牌 Code No. 产品名称 包装量 价格(元) 说明书 数量
Takara 6022Q DNA Ligation Kit Ver.2.1 1 Kit ¥200 DNA Ligation Kit Ver.2.1 DNA Ligation Kit Ver.2.1 DNA Ligation Kit Ver.2.1
Takara 6022 DNA Ligation Kit Ver.2.1 1 Kit ¥501
¥401
DNA Ligation Kit Ver.2.1 DNA Ligation Kit Ver.2.1 DNA Ligation Kit Ver.2.1

*红字为促销价格,促销时间: 2022年9月1日-2022年10月31日

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DNA Ligation Kit Ver.2.1 DNA Ligation Kit Ver.2.1 DNA Ligation Kit Ver.2.1 DNA Ligation Kit Ver.2.1 DNA Ligation Kit Ver.2.1
 
DNA Ligation Kit Ver.2.1
DNA Ligation Kit Ver.2.1  
DNA Ligation Kit Ver.2.1
 
 
■ 制品内容 (Code No.: 6022:100 次)
Solution Ⅰ:Enzyme Solution 3 × 250 μl
Solution Ⅱ:Concatenation Buffer 1 × 750 μl
Solution Ⅲ:Transformation Enhancer 1 × 200 μl
 
* 如果每次使用7.5 μl Solution Ⅰ则可反应100次。
 
■ 制品说明
本试剂盒是用于快速DNA连接反应的简易系统。在本试剂进行连接反应时,只需要加入一种包含T4 DNA Ligase和最适buffer的酶溶液,终反应液体积小。因为反应高效,大多数连接反应只需3分钟,较难的反应也可在30分钟内完成。
转化之前在连接混合液中加入Solution III(转化增强剂)有助于提高转化效率。如果目的DNA含量低或预期的连接效率较低,建议使用Solution III。连接反应液不必经过DNA纯化,可直接用于细菌的转化。
 
保存
-20℃。Solution融化后室温保存,如果产生沉淀,可涡旋数分钟溶解。
 
■ Ligation Kit 的操作示意图及连接效率图
 
DNA Ligation Kit Ver.2.1
 
使用注意
1. 试剂盒中的Solution Ⅰ和Solution Ⅱ建议-20℃保存,反复冻融不会失活。Solution Ⅰ因含有T4 DNA Ligase,使用前请在冰中融化并轻柔混匀。Solution Ⅱ可在室温融化并混匀。Solution Ⅲ一旦融化,就应于室温保存,若有沉淀,使用前请涡旋溶解。
2. DNA连接液可直接用于琼脂糖凝胶电泳。如要进行聚丙烯酰胺凝胶电泳时,建议使用乙醇沉淀法*浓缩 DNA,请不要用苯酚抽提DNA连接液。
* 乙醇沉淀法:
1) 在反应液中加入1/10体积的3 M CH3COONa (pH5.2) 或1/20体积的5 M NaCl和2-2.5倍体积的无水乙醇。
2) -20℃静置20分钟或-80℃静置10分钟。
3) 4℃离心收集DNA。当DNA的含量较少时,可加入carrier使沉淀效果更好。
3. 如果在反应液中加入苯酚,则会出现类似沉淀物的白色浑浊,将不能用于连接反应。
 
 

TaKaRa DNA Ligation Kit LONG酶试剂盒Takara Clontech

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TaKaRa DNA Ligation Kit LONG
品牌 Code No. 产品名称 包装量 价格(元) 说明书 数量
Takara 6024 TaKaRa DNA Ligation Kit LONG 1 Kit ¥631 TaKaRa DNA Ligation Kit LONG TaKaRa DNA Ligation Kit LONG TaKaRa DNA Ligation Kit LONG
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■ 制品内容 (50 次量)*
DNA Ligase 50 μl
10×LONG Ligation Buffer 300 μl
Control Vector (pUC118/Hind III/BAP) 10 μl
Control Insert DNA/Hind III (18 kb) 30 μl
dH2O 1 ml×2
* 本试剂盒对粘性末端的连接反应为50次量,对平末端的连接反应为10次量,反应体积均为50 μl。
 
■ 制品说明
TaKaRa DNA Ligation Kit LONG是对长链DNA片段进行高效连接的试剂盒,对10 kb以上的长片段DNA连接特别有效,特别适用于BAC Library的构建。本试剂盒适用于以下实验:
1) 插入长片段DNA的载体构建。
2) BAC Library的构建。
3) 长链cDNA的克隆。
转化实验推荐使用Stellar Competent Cells (Code No. 636763/636766) 和Stellar Electrocompetent Cells(Code No. 636765),这些感受态细胞对于构建插入长片段DNA或cDNA的克隆有优势。
 
保存
-20℃。
 
 

DNA Ligation Kit <Mighty Mix>酶试剂盒Takara Clontech

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DNA Ligation Kit <Mighty Mix>
品牌 Code No. 产品名称 包装量 价格(元) 说明书 数量
Takara 6023Q DNA Ligation Kit <Mighty Mix> 1 Kit ¥150 DNA Ligation Kit <Mighty Mix> DNA Ligation Kit <Mighty Mix> DNA Ligation Kit <Mighty Mix>
Takara 6023 DNA Ligation Kit <Mighty Mix> 1 Kit ¥501
¥401
DNA Ligation Kit <Mighty Mix> DNA Ligation Kit <Mighty Mix> DNA Ligation Kit <Mighty Mix>

*红字为促销价格,促销时间: 2022年9月1日-2022年10月31日

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DNA Ligation Kit <Mighty Mix> DNA Ligation Kit <Mighty Mix> DNA Ligation Kit <Mighty Mix> DNA Ligation Kit <Mighty Mix> DNA Ligation Kit <Mighty Mix>
 
DNA Ligation Kit <Mighty Mix>
DNA Ligation Kit <Mighty Mix>  
DNA Ligation Kit <Mighty Mix>
 
 
■ 制品内容 (Code No.: 6023)
Ligation Mix 150 μl × 5
按每次反应使用7.5 μl 进行计算,可使用100次。
 
■ 制品说明
DNA片段连接反应频繁用于基因工程实验操作中。DNA的连接通常使用T4 DNA Ligase,但DNA片段的末端形状对T4 DNA Ligase连接反应速度影响很大。因此,根据DNA片段末端形状需要调整酶的添加量和反应时间。本公司研发的DNA Ligation Kit,不需要调整酶添加量和反应时间,可简便、快速地进行DNA连接反应。
DNA Ligation Kit〈Mighty Mix〉是以往DNA Ligation Kit 的升级产品,连接效率高。本制品具有以下特点:
1) 预混型
是酶和Buffer的预混型试剂,只需在DNA中加入Ligation Mix溶液即可高效完成连接反应,操作简便。本制品反复冻融后,反应性能仍然稳定。
2) 也适用于平滑末端和TA克隆
不仅适用于粘性末端连接,也可以高效地进行平滑末端的DNA连接和TA克隆。
3) 连接反应仅需5分钟
25℃反应5分钟即可完成插入片段与质粒载体的连接,节省实验时间。
 
DNA Ligation Kit的反应液量和反应条件
克隆编号 DNA溶液:Ligation Mix (体积比) 反应条件
[1] 质粒载体中插入外源DNA片段
[标准操作流程]
[快速操作流程]
1:1
 
16℃,30分钟
25℃,5分钟
[2] PCR产物的T载体克隆 1:1 16℃,30分钟
[3] 线性DNA的分子内连接 (自身环化) 1:1 16℃,30分钟
[4] Linker Ligation,Adaptor Ligation质粒载体中插入linker DNA cDNA与连头 (Linker、 Adaptor) 连接
 
1:1
1:2
16℃,30分钟
[5] λ噬菌体中插入外源DNA片段(体外包装) 1:2 26℃,10分钟
* 说明书提供的实验结果是表中使用DNA Ligation Kit获得的实验数据,仅供参考。
 
保存
-20℃。使用前在冰上融化 (5-10分钟),吸打混匀。已证实反复冻融50次对反应性能没有影响。
 
■ DNA Ligation Kit的操作原理图
 
DNA Ligation Kit <Mighty Mix>
 
使用注意
1. DNA Ligation是-20℃保存的冷冻品,反复冻融不会失活。使用前在冰上融化,吸打混合。
2. 使用本试剂盒获得的DNA连接反应液,可直接用于琼脂糖凝胶电泳。如果进行聚丙烯酰胺凝胶电泳时,建议乙醇沉淀后再进行电泳。
3. DNA连接反应液直接进行苯酚抽提时,反应液会出现白色浑浊。
4. DNA连接反应后进行乙醇沉淀处理时,向反应液中加入1/10体积的3 M CH3COONa (pH5.2) 或1/20体积的5 M NaCl和2-2.5倍体积的无水乙醇,-20℃静置20分钟或-80℃静置10分钟后,4℃离心回收DNA。DNA含量较少时,加入Carrier使沉淀效果更好。