上海金畔生物科技有限公司代理Takara Clontech酶试剂盒全线产品，欢迎访问官网了解更多产品信息和订购。
*红字为促销价格，促销时间: 2022年9月1日-2022年10月31日
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| ■ 制品内容 (Code No.: 6023) |
| Ligation Mix |
150 μl × 5 |
| 按每次反应使用7.5 μl 进行计算，可使用100次。 |
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| ■ 制品说明 |
DNA片段连接反应频繁用于基因工程实验操作中。DNA的连接通常使用T4 DNA Ligase，但DNA片段的末端形状对T4 DNA Ligase连接反应速度影响很大。因此，根据DNA片段末端形状需要调整酶的添加量和反应时间。本公司研发的DNA Ligation Kit，不需要调整酶添加量和反应时间，可简便、快速地进行DNA连接反应。
DNA Ligation Kit〈Mighty Mix〉是以往DNA Ligation Kit 的升级产品，连接效率高。本制品具有以下特点：
1) 预混型
是酶和Buffer的预混型试剂，只需在DNA中加入Ligation Mix溶液即可高效完成连接反应，操作简便。本制品反复冻融后，反应性能仍然稳定。
2) 也适用于平滑末端和TA克隆
不仅适用于粘性末端连接，也可以高效地进行平滑末端的DNA连接和TA克隆。
3) 连接反应仅需5分钟
25℃反应5分钟即可完成插入片段与质粒载体的连接，节省实验时间。
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| DNA Ligation Kit的反应液量和反应条件 |
| 克隆编号 |
DNA溶液：Ligation Mix (体积比) |
反应条件 |
[1] 质粒载体中插入外源DNA片段
[标准操作流程]
[快速操作流程] |
1：1 |
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| [2] PCR产物的T载体克隆 |
1：1 |
16℃，30分钟 |
| [3] 线性DNA的分子内连接 (自身环化) |
1：1 |
16℃，30分钟 |
| [4] Linker Ligation，Adaptor Ligation质粒载体中插入linker DNA cDNA与连头 (Linker、 Adaptor) 连接 |
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16℃，30分钟 |
| [5] λ噬菌体中插入外源DNA片段(体外包装) |
1：2 |
26℃，10分钟 |
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| * 说明书提供的实验结果是表中使用DNA Ligation Kit获得的实验数据，仅供参考。 |
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| ■ 保存 |
| -20℃。使用前在冰上融化 (5-10分钟)，吸打混匀。已证实反复冻融50次对反应性能没有影响。 |
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| ■ DNA Ligation Kit的操作原理图 |
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| ■ 使用注意 |
1. DNA Ligation是-20℃保存的冷冻品，反复冻融不会失活。使用前在冰上融化，吸打混合。
2. 使用本试剂盒获得的DNA连接反应液，可直接用于琼脂糖凝胶电泳。如果进行聚丙烯酰胺凝胶电泳时，建议乙醇沉淀后再进行电泳。
3. DNA连接反应液直接进行苯酚抽提时，反应液会出现白色浑浊。
4. DNA连接反应后进行乙醇沉淀处理时，向反应液中加入1/10体积的3 M CH3COONa (pH5.2) 或1/20体积的5 M NaCl和2-2.5倍体积的无水乙醇，-20℃静置20分钟或-80℃静置10分钟后，4℃离心回收DNA。DNA含量较少时，加入Carrier使沉淀效果更好。 |
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