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热启动 Taq DNA 聚合酶 货 号 #M0495L-NEB酶试剂 New England Biolabs

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#M0495L
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Taq 2X 预混液
Quick-Load Taq 2X 预混液
Taq 5X 预混液
多重 PCR 5X 预混液
 
 热启动 Taq 产品
Taq 热启动 DNA 聚合酶
Taq 热启动 2X 预混液
 

Taq DNA 聚合酶信息

热启动 Taq DNA 聚合酶 货 号 #M0495L

概述

Taq DNA 聚合酶是一种耐热聚合酶，具有 5´ →3´ 聚合酶活性和 5´ 结构特异性核酸内切酶活性。该酶是 PCR 中应用最广泛的酶。为了便于各种 PCR 反应，Taq DNA 聚合酶配套有不同的反应缓冲液。标准 Taq缓冲液专门针对已有的 PCR 平台所设计，它是 DHPLC 和高通量实验的理想选择。NEB 设计的 ThermoPol 缓冲液能够提高反应产量，即使是在苛刻的条件下也表现不凡。更为方便的是，Taq DNA 聚合酶还有试剂盒以及预混液两种剂型可供选择。此外还提供了 Quick-Load Taq 2X 预混液剂型，可用于直接凝胶上样。

Taq 热启动 DNA 聚合酶

超高的性价比、有吸引力的商业条款，NEB 的热启动 Taq 是分子诊断和其它应用的理想选择。与化学修饰或基于抗体结合的热启动聚合酶不同，NEB 的热启动 Taq 利用一种基于核酸适配体（aptamer）技术。这种独特的核酸适配体通过非共价键作用与聚合酶结合，从而抑制聚合酶在非许可温度下的聚合反应。这种新方法不需要激活步骤，减少样品降解的可能性、缩短整个反应时间。

其它剂型

为了加样方便，Taq 与 Taq 热启动 DNA 聚合酶均有预混液剂型可供选择。Taq 2X 预混液还有 Quick-Load 的形式，可用于直接凝胶上样。Taq PCR 试剂盒包含 Taq DNA 聚合酶、dNTP 混合液、缓冲液、MgCl2 和紫色 Quick-Load 2-Log DNA Ladder。
 
多重 PCR 5X 预混液配方经过专门优化可以提高多重 PCR 反应的表现。

浓度

5,000 units/ml。

Taq 缓冲液选择表

热启动 Taq DNA 聚合酶 货 号 #M0495L

OneTaq® 热启动 Quick-Load® 2X 预混液（提供 GC 缓冲液） 货 号 #M0489L-NEB酶试剂 New England Biolabs

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500 次反应（50 μl 反应体系）
3,249.00
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100 次反应（50 μl 反应体系）
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OneTaq 聚合酶信息

OneTaq® 热启动 Quick-Load® 2X 预混液（提供 GC 缓冲液） 货 号 #M0489L

概述

合酶与 Deep Vent DNA 聚合酶的混合物，可用于常规与复杂的 PCR 实验。Deep Vent DNA 聚合酶的 3´→5´ 外切酶活性提升了 Taq DNA 聚合酶的保真性和聚合能力。OneTaq 反应缓冲液与 High GC Enhancer的组合使得无论模板的 GC 含量高低，都只需最小的优化即能获得最高的产量。

OneTaq热启动 DNA 聚合酶

OneTaq 热启动 DNA 聚合酶利用核酸适配体（aptamer）作为抑制剂，不仅使用方便，而且减少了引物二聚体和其他次级产物对反应的干扰。

这种核酸适配体抑制剂能够与聚合酶发生可逆结合，当温度低于 45℃ 时抑制聚合酶活性，因而能够在室温下建立反应。在正常的热循环条件下 OneTaq 热启动 DNA 聚合酶即能被激活，无需额外的高温启动步骤。因此 OneTaq 热启动 DNA 聚合酶能够替换常规的或现有的基于 Taq DNA 聚合酶的 PCR 反应。

与 OneTaq 热启动 DNA 聚合酶一同提供的有标准反应缓冲液、GC 反应缓冲液和 High GC Enhancer。根据模板的 GC 含量选择缓冲液的建议见下文。

其它剂型

OneTaq 热启动 DNA 聚合酶均有预混液剂型。预混液有标准或 GC 缓冲液可供选择，High GC Enhancer 随 GC 缓冲液一同提供。此外这些预混液还有Quick-Load 的形式，可用于直接凝胶上样。关于OneTaqRT-PCR 试剂盒或 OneTaq 一步法 RT-PCR 试剂盒的详细信息见 93 页。

浓度

5,000 units/ml。

OneTaq 缓冲液选择指南

OneTaq® 热启动 Quick-Load® 2X 预混液（提供 GC 缓冲液） 货 号 #M0489L

Q5U™ 热启动超保真 DNA 聚合酶 货 号 #M0515L-NEB酶试剂 New England Biolabs

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#M0515L
500 units
7,989.00
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#M0515S
100 units
2,069.00
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特性

  •  实现重亚硫酸氢盐转化、脱氨基、或受损 DNA（例如 FFPE）的优异扩增
  • 与 dUTP 和 UDG 联合使用，可防止交叉污染
  • 提高 USER® 克隆的组装效率和准确性
  • 基于适配体的热启动型可在室温建立扩增体系
  • 针对推荐应用优化的实验方案

概述

 Q5U 热启动超保真 DNA 聚合酶是 Q5® 超保真 DNA 聚合酶的改造版本，是一种新型热稳定 DNA 聚合酶，具有 3’至 5’核酸外切酶活性，并融合增强延伸性能的 Sso7d 结构域。Q5U 在尿嘧啶结合域中含有突变，能够读取和扩增含有尿嘧啶和次黄嘌呤的模板。

产品描述

 许多有校对功能的聚合酶来自古细菌家族 B型 DNA 聚合酶，在遇到 DNA 模板中的尿嘧啶碱基时停止复制(Wardle, J. et al. (2008) Nucleic Acids Res. 36 (3), 705-711)。Q5U 在尿嘧啶结合域含有突变，能够读取和扩增含有尿嘧啶和次黄嘌呤的模板。该特征可用于扩增重亚硫酸氢盐转化、脱氨基、或受损 DNA，用于防止 PCR 体系中携带污染（与 dUTP 和 UDG 一起使用），以及用于 USER 克隆方法。


Q5U 是一种热启动聚合酶，含有在室温下抑制聚合酶活性的独特适配体，可在经典 PCR 条件下达到最佳扩增。
 
 图 1：Q5U 热启动超保真 DNA 聚合酶的常见应用
 
Q5U™ 热启动超保真 DNA 聚合酶 货 号 #M0515L
古细菌家族 B 型聚合酶可以掺入/耐受多种修饰的核苷酸，但在遇到尿嘧啶和次黄嘌呤时会停止扩增。Q5U 热启动超保真 DNA 聚合酶是一种经过改造的 Q5 超保真 DNA 聚合酶，可有效地整合 dUTP 并扩增含尿嘧啶的模板。由 Q5U 热启动超保真 DNA 聚合酶的常见应用如上图所示。
 
图 2：Q5U 热启动超保真 DNA 聚合酶实现重亚硫酸氢盐转化 DNA 的优异扩增
 
Q5U™ 热启动超保真 DNA 聚合酶 货 号 #M0515L
使用 Q5U 热启动超保真 DNA 聚合酶（Q5U）、Phusion U 热启动 DNA 聚合酶（P）和 KAPA Hifi HotStart Uracil + ReadyMix PCR 试剂盒（K）扩增重亚硫酸氢盐转化的人基因组 DNA 靶标。扩增子名称和片段长度标注在电泳胶上方。每 25 μl 反应物含有 12 ng 重亚硫酸氢盐转化的 DNA（Qiagen）。所有反应均根据制造商的推荐使用 35 个循环进行，通过微流体芯片 LabChip 分析展现。
 
图 3：Q5U 热启动超保真 DNA 聚合酶能够高效扩增石蜡包埋正常肺样品 DNA
 
Q5U™ 热启动超保真 DNA 聚合酶 货 号 #M0515L
石蜡包埋正常肺样品 DNA（Biochain）。扩增片段长度标注在电泳胶上方，每个 25 μl 反应物含有 18 ng FFPE DNA（Biochain），循环条件与该样品类型的推荐一致，通过微流体芯片 LabChip 分析展现。
 
图 4：Q5U 热启动超保真 DNA 聚合酶能够高效扩增酶促脱氨的 DNA
 
Q5U™ 热启动超保真 DNA 聚合酶 货 号 #M0515L
 
使用 Q5U 热启动超保真 DNA 聚合酶（Q5U）、Phusion U 热启动 DNA 聚合酶（P）和 KAPA Hifi HotStart Uracil + ReadyMix PCR 试剂盒（K）扩增酶促脱氨（APOBEC）的基因组 DNA 靶标。扩增子名称和片段长度标注在电泳胶上方。 每个 50μl 反应物含有 12 ng 酶促脱氨基的 DNA。 所有反应均根据制造商的推荐使用 35 个循环进行，并通过微流体芯片 LabChip 分析展现。
 
图 5: USER® 克隆流程
 
Q5U™ 热启动超保真 DNA 聚合酶 货 号 #M0515L
在 USER 克隆中，通过 PCR 扩增出 DNA 靶分子和克隆载体，两个片段的同源序列设计为 8-12 个碱基。PCR 引物以 5’A 起始，并在同源区 3’端含有一个脱氧尿嘧啶（dU），可以设计为多片段组装，核苷酸替换，插入和/或缺失。我们建议使用 GeneDesign（http://genedesign. thruhere.net/gd/）软件为 USER 连接点设计引物。建议每种引物终浓度为 0.5 μM 即可得到最佳结果。
 
图 6：Q5U 热启动超保真 DNA 聚合酶与 Taq 热启动 DNA 聚合酶相比，可更高效准确的用于USER克隆
Q5U™ 热启动超保真 DNA 聚合酶 货 号 #M0515L
使用 Q5U 热启动超保真 DNA 聚合酶和热启动 Taq DNA 聚合酶做 USER 克隆，将 3 kb lacZ 基因连接到 pET21a 载体骨架中。菌落总数（A）和蓝色菌落的百分比（B）证明：有 Q5U 的反应展现了更高的组装效率和更高的准确度。使用 Sanger 测序进一步验证组装准确性，结果显示：普通 Taq 酶组装的 4 个蓝色克隆中有许多点突变，但使用 Q5U 的 4 个蓝色克隆中没有突变（C）。“X”表示用普通 Taq 酶产生的克隆中发现的点突变数量，与以前的研究结果同样证明了 lacZ 的高突变耐受性。(Barnes, W. M. (1992) Gene, 112, 29-35.)
 
随酶提供的试剂
如下试剂随该产品提供
 

储存温度(℃)

浓度

Q5U™ 反应缓冲液

-20

 

 

 

 

 

 

热启动 Taq 2X 预混液 货 号 #M0496L-NEB酶试剂 New England Biolabs

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#M0496L
500次反应 (50 μl 反应体系)
2,779.00
无
无
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#M0496S
100 次反应 (50 μl 反应体系)
699.00
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其它剂型

为了加样方便，Taq 与 Taq 热启动 DNA 聚合酶均有预混液剂型可供选择。Taq 2X 预混液还有 Quick-Load 的形式，可用于直接凝胶上样。Taq PCR 试剂盒包含 Taq DNA 聚合酶、dNTP 混合液、缓冲液、MgCl2 和紫色 Quick-Load 2-Log DNA Ladder。

 

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广州库存
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苏州库存

#M0485L
500 次反应（50 μl 反应体系）
3,249.00
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100 次反应（50 μl 反应体系）
719.00
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