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T7 表达 lysY E. coli 感受态细胞 ( 高效级 ) 货 号 #C3010I-NEB酶试剂 New England Biolabs

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#C3010I
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T7 表达 lysY E. coli 感受态细胞 ( 高效级 )

 

单独出售的组份

SOC Outgrowth 培养基
#B9020S 4 x 25 ml . . . . . . . . ¥939

优点

 BL21 源增强型菌株
 以溶菌酶进行表达控制
 克隆毒性基因
 菌落快速培养
 无动物来源产品

概述

用于 T7 表达的 BL21 源增强型菌株，本底表达水平显著降低。

基因型

MiniF lysY (CamR) / fhuA2 lacZ::T7 gene1 [lon] ompT gal sulA11 R(mcr-73::miniTn10–TetS)2 [dcm] R(zgb-210::Tn10–TetS) endA1 D(mcrC-mrr)114::IS10

特性

• 在 lac 操纵子上有 T7 RNA 聚合酶，无 λ 前噬菌体
• 通过溶菌酶对 T7 RNA 聚合酶进行调控，从而允许克隆潜在的毒性基因
• LysY 作为特殊的 T7 溶菌酶，因缺少酰胺酶活性，从而降低细胞在诱导过程中的溶菌现象
• Lon 和 OmpT 蛋白酶缺失
• 不受限于 DNA 是否甲基化
• 无需氯霉素

转化效率

高效级： 0.6–1 x 109 cfu/μg pUC19 DNA

抗性

T1 噬菌体（fhuA2）、氯霉素、呋喃妥因

敏感性

氨苄青霉素、卡那霉素、壮观霉素、链霉素、四环素

SHuffle T7 E. coli 感受态细胞 货 号 #C3026J-NEB酶试剂 New England Biolabs

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#C3026J
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优点

 有助于细胞质中蛋白质二硫键的折叠
 T7 表达
 K12 菌株
 无动物来源产品

概述

T7 表达菌株，在细胞质中正确折叠含有多个二硫键重组蛋白的能力更强。

基因型

F´ lac, pro, lacIq / Δ(ara-leu)7697 araD13fhuA2 lacZ::T7 gene1 Δ(phoA)Pvull phoR ahpC* galE(or U) galKλatt::pNEB3-r1-cDsbC (SpecR, laclq) ΔtrxBrpsL150(StrR)Δgor Δ(malF)3

转化效率

1 x 106 cfu/μg pUC19 DNA

抗性

T1 噬菌体（fhuA2）、呋喃妥因、壮观霉素、链霉素

敏感性

氨苄青霉素、氯霉素、卡那霉素、四环素
* 可能观察到对低水平的链霉素存在抗性。

相关产品

SHuffle T7 E. coli 感受态细胞

Lemo21(DE3) E. coli 感受态细胞 货 号 #C2528J-NEB酶试剂 New England Biolabs

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Lemo21(DE3) E. coli 感受态细胞                              收藏

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#C2528J
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优点

 表达问题蛋白
 表达膜蛋白
 细胞周质表达的理想选择
 表达毒性蛋白
 表达存在可溶性问题的蛋白

概述

Lemo21（DE3）E. coli 感受态细胞为 T7 可控表达菌株，专为表达具有挑战性的重组蛋白而设计。它作为 BL21（DE3）的衍生菌株，不仅继承了其特点，还能够通过改变 T7 溶菌酶（lysY）的水平以控制表达水平，T7 溶菌酶为 T7 RNA 聚合酶的天然抑制剂。对蛋白表达的精准控制使得 Lemo21（DE3）成为表达膜蛋白、毒性蛋白、分泌蛋白以及存在可溶性问题蛋白的理想选择。

基因型

fhuA2 [lon] ompT gal (λ DE3) [dcm]ΔhsdS/ pLemo(CamR) λ DE3 = λ sBamHIo ΔEcoRI-Bint::(lacI::PlacUV5::T7 gene1) i21 Δnin 5pLemo = pACYC184-PrhaBAD-lysY

特性

• BL21（DE3）源增强型菌株
• 精准的表达调控
• 在 T7 菌株中表达范围最宽（0-2,000 μM 鼠李糖）
• 消除了形成包涵体的潜在可能

转化效率

高效级：1–3 x 107 cfu/μg pUC19 DNA

抗性

T1 噬菌体（fhuA2），氯霉素

敏感性

 氨苄青霉素、卡那霉素、呋喃妥因、壮观霉素、链霉素、四环素

相关产品

 

 

Lemo21(DE3) E. coli 感受态细胞

随产品提供

 L-鼠李糖溶液

pUC19 对照 DNA

NiCo21(DE3) E. coli 感受态细胞 货 号 #C2529H-NEB酶试剂 New England Biolabs

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#C2529H
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相关产品

Lemo21(DE3) E. coli 感受态细胞

优点

 常规表达时 BL21（DE3）的卓越替代品
 通过 IMAC 分离的目的蛋白纯度更佳
 无动物来源产品

概述

利用固相金属离子亲和层析（IMAC）分离含多聚赖氨酸标签的重组蛋白时，目的蛋白经常被大量的 E. coli 内源金属结合蛋白所污染。蛋白表达菌 NiCo21（DE3）通过改造，使 IMAC 组分中的 E. coli 蛋白污染减少到最低：GlmS 在突变后消除了与 IMAC 树脂结合的能力，另外 3 种蛋白（SlyD、ArnA 与 Can）在加上重组标签后，能够通过几丁质亲和层析快速去除。

基因型

can::CBD fhuA2 [lon] ompT gal (λ DE3)[dcm] arnA::CBD slyD::CBD glmS6Ala ΔhsdS λ DE3= λ sBamHIo ΔEcoRI-B int::(lacI::PlacUV5::T7 gene1)i21 Δnin5

特性

• 与 BL21（DE3）的生长特点一致
• Lon 和 OmpT 蛋白酶缺失

转化效率

1–5 x 107 cfu/µg pUC19 DNA

抗性

T1 噬菌体（fhuA2）

敏感性

氨苄青霉素、氯霉素、卡那霉素、呋喃妥因、壮观霉素、链霉素、四环素

随产品提供

SOC Outgrowth 培养基
pUC19 对照 DNA

NEB® PCR 克隆试剂盒（含感受态细胞） 货 号 #E1203S-NEB酶试剂 New England Biolabs

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产品资料 – DNA修饰酶与克隆技术 – 克隆 & 合成生物学

NEB® PCR 克隆试剂盒（含感受态细胞）                              收藏

NEB® PCR 克隆试剂盒（含感受态细胞） 货 号 #E1203S

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#E1203S
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相关产品

NEB PCR 克隆试剂盒

特性

 含 SP6 和 T7 启动子，便于体外转录
 克隆所有类型的 PCR 产物更为简单，包括平末端和 TA 末端
 克隆速度快，连接仅需 5 分钟
 筛选简单，几乎没有克隆背景，不需要蓝白斑筛选
 无需纯化步骤，节约时间
 两侧的限制性内切酶酶切位点方便亚克隆，包含两种单酶切选择
 BsaI 位点的除去以便 Golden Gate 克隆

概述

NEB PCR 试剂盒提供：优化的 2X 克隆预混液（其中配有独特的连接增强剂）和线性载体。该线性载体利用最新技术抑制背景菌落生长，使背景值降为最低。本试剂盒能简单、快速克隆各种 PCR 产物。具有校读功能的聚合酶产生平末端扩增子（如：Q5 或者 Phusion），无校对功能的聚合酶产生单碱基突出末端的扩增子（如 Taq、OneTaq、LongAmp Taq)。2X 克隆预混液中包含有末端修复成份，可在连接反应步骤前进行末端平齐化，因此，无论扩增子是何种末端都能完成有效连接。此外，使用本试剂盒，PCR 产物无需纯化，PCR 引物也无需经过 5´ -磷酸基修饰。 

• 提供下游菌落 PCR 或测序引物
• 试剂盒包含 1 kb 扩增子对照和线性载体及一次用量的大肠杆菌感受态细胞
• 比其它商业化产品保质期长（12 个月） 

PCR 克隆试剂盒包含

– 克隆预混液
– 线性化 pMiniT™ 载体
– 对照扩增子
– 克隆检测正向引物
– 克隆检测反向引物
– NEB 10-beta E. coli 感受态细胞（克隆级）(仅在 NEB #E1202 提供)  

质保声明

NEB PCR 克隆试剂盒经过严格的质控检测，确保该产品具有最高的活性和纯度。详情请登陆 www.neb.com，www.neb-china.com。