1X RNAPol 反应缓冲液。反应时需加入各 0.5 mM 的 ATP、UTP、GTP、CTP（不随酶提供）和带有启动子的模板 DNA。于 37℃（ T3、T7 和 SP6 ）或 50℃（Hi-T7）条件下温育。

 T3、T7 和 SP6 RNA 聚合酶分别对 T3、T7 和 SP6 噬菌体启动子具有高度的特异性。现已开发出多种载体，可将目的基因序列克隆到T3、 T7 和 SP6 启动子下游的多克隆位点中，以克隆的 DNA 为模板体外合成相应的 RNA。

 1 单位指在 37℃或 50℃（Hi-T7）条件下，1 小时内将 1 nmol 的 ATP 掺入酸不溶物所需要的酶量。单位活性检测条件请登陆 www.neb-china.com 或www.neb.com。

 T3 RNA 聚合酶：50,000 units/ml；T7 RNA 聚合酶：50,000 units/ml；SP6 RNA 聚合酶：20,000 units/ml； Hi-T7 耐热 RNA 聚合酶：50,000 units/ml。

 Hi-T7 耐热 RNA 聚合酶适合在较高温度下进行体外转录，在 37-56℃ 有活性

Ÿ   使用 T7 噬菌体启动子进行体外转录

Ÿ   该产品为高浓度版本的 Hi-T7 耐热 RNA 聚合酶（NEB＃M0658）

Ÿ   使用帽类似物时，提高共转录的加帽效率

Ÿ   由于减少了 dsRNA 副产物的形成，从而使高温合成 RNA 的免疫原性降低

Ÿ   适用于有经验的体外转录用户

Ÿ   随产品带有 Hi-T7 耐热 RNA 聚合酶反应缓冲液和氯化镁

 Hi-T7 耐热 RNA 聚合酶（高浓度）的浓度为标准 Hi-T7 耐热 RNA 聚合酶（NEB＃M0658）的 20 倍，是希望自己建立和优化体外转录反应体系的有经验用户的理想选择。该酶配有 Hi-T7 耐热 RNA 聚合酶反应缓冲液和氯化镁溶液，可进一步调试不同条件，例如核苷酸浓度。

体外转录除了 RNA 聚合酶外还涉及多种成分，包括核糖核苷酸、无机焦磷酸酶和 RNase 抑制剂，这些均可单独购买。详细信息请参考“相关产品”部分。

Hi-T7 耐热 RNA 聚合酶是一种经基因工程改造的 DNA 依赖性 RNA 聚合酶，对 T7 噬菌体启动子具有高度特异性，跟野生型噬菌体 T7 RNA 聚合酶相比，它可在更高的温度下进行反应。Hi-T7 耐热 RNA 聚合酶的最佳温度为 50-52°C。 

在更高的体外转录反应温度下，Hi-T7 耐热 RNA 聚合酶（高浓度）减少了 dsRNA 副产物

使用 dsRNA 抗体（J2）进行免疫印记实验显示：在 37℃ 进行体外转录实验时，T7 和 Hi-T7 的转录产物均含有 dsRNA 副产物，HPLC 纯化可消除体外转录 RNA 中的 dsRNA 副产物。在 50℃ 条件下使用 Hi-T7 进行体外转录实验时，dsRNA 副产物明显减少。

产品来源

来源于 E.coli 菌株，携带经基因工程改造的 T7 RNA 聚合酶基因。

 Ÿ   mRNA 用于体外翻译、显微注射以及转染

Ÿ   放射标记的 RNA 探针

Ÿ   非同位素 RNA 标记

Ÿ   靶基因的向导 RNA

Ÿ   RNA 的结构、加工以及催化作用的研究

Ÿ   基因表达实验中的反义 RNA

Ÿ   RNA 扩增

Ÿ   等温扩增