HE染色法的基本步骤详情

HE染色法是苏木精（hematoxylin）和伊红（eosin）的首个字母缩写。苏木精是碱性染料，使细胞核染色质和胞质内的核糖体呈紫蓝色。伊红是酸性染料，使细胞质和细胞外基质中带较强碱基的蛋白质成份着红色。

常规he染色步骤：

(1)二甲苯（Ⅰ） 15min

(2) 二甲苯（Ⅱ） 15 min

(3)二甲苯：无水乙醇=1:1 2min

(4)100%乙醇（Ⅰ） 5min

(5)100%乙醇（Ⅱ） 5 min

(6)80%乙醇 5min

(7)蒸馏水 5 min

(8)苏木精液染色 5 min

(9) 流水稍洗去苏木精液 1-3 s

(10) 1%盐酸乙醇 1-3 s

(11) 稍水洗 10-30 s

(12)蒸馏水过洗 1-2 s

(13) 0.5%伊红液染色 1-3 min

(14) 蒸馏水稍洗 1-2 s

(15) 80%乙醇稍洗 1-2 s

(16) 95%乙醇（Ⅰ） 2-3 s

(17) 95%乙醇（Ⅱ） 3-5 s

(18) 无水乙醇 5-10 min

(19) 石炭酸二甲苯 5-10 min

(20) 二甲苯（Ⅰ） 2 min(21) 二甲苯（Ⅱ） 2 min

(22) 二甲苯（Ⅲ） 2 min

(23) 中性树胶封固注：

①第（11）、（12）步可省去，（13）步冲水时间需延长至20-30min。

②第（21）步如果不用石炭酸二甲苯，可改用无水乙醇。

冷冻切片HE染色步骤：

（1）冰冻切片固定 10～30 s

（2）稍水洗 1～2 s

（3）苏木精液染色（60℃） 30～60 s

（4）流水洗去苏木精液 5～10 s（5）1%盐酸乙醇 1～3 s

（6）稍水洗 1～2 s

（7）促蓝液返蓝 5～10 s

（8）流水冲洗 15～30 s

（9）0.5%曙红液染色 30～60 s

（10）蒸馏水稍洗 1～2 s

（11）80%乙醇 1～2 s

（12）95%乙醇 1～2 s（13）无水乙醇 1～2 s

（14）石炭酸二甲苯 2～3 s（15）二甲苯（Ⅰ） 2～3 s

（16）二甲苯（Ⅱ） 2～3 s

（17）中性树胶封固。

注：第（14）步如果不用石炭酸二甲苯，可改用无水乙醇。

染色结果：

细胞核蓝色，胞质、肌纤维、胶原纤维和红细胞呈深浅不一的红色。

上海金畔生物科技有限公司是一家集产品研发、生产、销售、服务于一体的高科技生物企业。产品主要涵盖生化试剂、分子生物学试剂、细胞培养、免疫学产品及实验耗材等。HE染色试剂盒为上海金畔生物科技有限公司自产产品，其货号为G1120，HE染色试剂盒染色结果是细胞核与细胞浆呈蓝红相映，色泽比较鲜艳。改良Harris法染色效果最好，染色效果受组织病理变化情况影响，有个体差异。