HE染色法的基本步骤详情
HE染色法是苏木精(hematoxylin)和伊红(eosin)的首个字母缩写。苏木精是碱性染料,使细胞核染色质和胞质内的核糖体呈紫蓝色。伊红是酸性染料,使细胞质和细胞外基质中带较强碱基的蛋白质成份着红色。
常规he染色步骤:
(1)二甲苯(Ⅰ) 15min
(2) 二甲苯(Ⅱ) 15 min
(3)二甲苯:无水乙醇=1:1 2min
(4)100%乙醇(Ⅰ) 5min
(5)100%乙醇(Ⅱ) 5 min
(6)80%乙醇 5min
(7)蒸馏水 5 min
(8)苏木精液染色 5 min
(9) 流水稍洗去苏木精液 1-3 s
(10) 1%盐酸乙醇 1-3 s
(11) 稍水洗 10-30 s
(12)蒸馏水过洗 1-2 s
(13) 0.5%伊红液染色 1-3 min
(14) 蒸馏水稍洗 1-2 s
(15) 80%乙醇稍洗 1-2 s
(16) 95%乙醇(Ⅰ) 2-3 s
(17) 95%乙醇(Ⅱ) 3-5 s
(18) 无水乙醇 5-10 min
(19) 石炭酸二甲苯 5-10 min
(20) 二甲苯(Ⅰ) 2 min(21) 二甲苯(Ⅱ) 2 min
(22) 二甲苯(Ⅲ) 2 min
(23) 中性树胶封固注:
①第(11)、(12)步可省去,(13)步冲水时间需延长至20-30min。
②第(21)步如果不用石炭酸二甲苯,可改用无水乙醇。
冷冻切片HE染色步骤:
(1)冰冻切片固定 10~30 s
(2)稍水洗 1~2 s
(3)苏木精液染色(60℃) 30~60 s
(4)流水洗去苏木精液 5~10 s(5)1%盐酸乙醇 1~3 s
(6)稍水洗 1~2 s
(7)促蓝液返蓝 5~10 s
(8)流水冲洗 15~30 s
(9)0.5%曙红液染色 30~60 s
(10)蒸馏水稍洗 1~2 s
(11)80%乙醇 1~2 s
(12)95%乙醇 1~2 s(13)无水乙醇 1~2 s
(14)石炭酸二甲苯 2~3 s(15)二甲苯(Ⅰ) 2~3 s
(16)二甲苯(Ⅱ) 2~3 s
(17)中性树胶封固。
注:第(14)步如果不用石炭酸二甲苯,可改用无水乙醇。
染色结果:
细胞核蓝色,胞质、肌纤维、胶原纤维和红细胞呈深浅不一的红色。
上海金畔生物科技有限公司是一家集产品研发、生产、销售、服务于一体的高科技生物企业。产品主要涵盖生化试剂、分子生物学试剂、细胞培养、免疫学产品及实验耗材等。HE染色试剂盒为上海金畔生物科技有限公司自产产品,其货号为G1120,HE染色试剂盒染色结果是细胞核与细胞浆呈蓝红相映,色泽比较鲜艳。改良Harris法染色效果最好,染色效果受组织病理变化情况影响,有个体差异。