脂肪酶的作用及应用行业

脂肪酶又称甘油酯水解酶，是一种糖蛋白，由2%-15%的糖基组成，基本组成单位为甘露糖。脂肪酶存在于含有脂肪的动、植物和微生物（如霉菌、细菌等）组织中，包括磷酸酯酶、固醇酶和羧酸酯酶、脂肪酸广泛的应用于食品、药品、皮革、日用化工等方面。

脂肪酶的作用：

脂肪酶是一种具有界面活化性质的酶，即只在油水交界面上作用，因其具有独特的受质特异性而用途甚广。当界面上的脂肪处于完全溶解状态时，脂肪酶几乎不具有活性，只有当脂肪含量超出溶解度时脂肪酶才具有明显的活性。脂肪酶的活性中心是丝氨酸残基，在正常情况下，该残基受一个α-螺旋盖的保护，只有当脂肪酶存在于油/水交界面时，在有油脂作用时，此盖打开，露出疏水残基团，隐藏亲水残基团，在丝氨酸残基周围形成亲电子域，诱发脂肪酶改变构象，增加了对脂类的亲和性。因此脂肪酶对底物催化显著的前提是底物必须以微粒、小聚合分散状态或呈乳化颗粒状态存在。脂肪酶对底物具有相对特异性，不仅能够催化脂肪水解，也能在有机溶剂中也促进酯的合成反应（反应方式见下图）。脂肪酶是一类单纯酶，它的催化活性内部仅取决于它的蛋白质结构，外部取决于交界面的油脂含量。

脂肪酶的应用：

1、脂肪酶在食品工业上的应用

脂肪酶在食品工业中用于改善甘油三酯的结构，从而使其物理性质发生变化，用于开发一系列的功能性和营养性油脂食品。

⑴三酰甘油的水解

脂肪酶酶促水解三酰甘油法可为食品工业提供优质的原料，短链脂肪酸还可以改善食品的风味和香味。

⑵三酰甘油的改性（酯交换反应）

脂肪酶催化油脂改性，由一种甘油酯生成另一种甘油酯。

作用：改善食用油的质量；

           开发食品油的品种；

           提高食用油的营养价值；

此外，脂肪酶还可以在食品烘焙中起到对二次增白的作用，同时会增大面包和馒头的体积，细化和软化组织。

2、脂肪酶在造纸行业的应用

树脂中的甘油三酯（简称TG）是产生树脂屏障的成分之一，在浆料中加入脂肪酶可将甘油三酯水解成脂肪酸和甘油，从而降低树脂沉积，达到控制树脂屏障的目的。此外，脂肪酶还可直接分解油墨、涂料等达到脱墨的目的，也可去除造纸桶白水及冷却水中的粘泥。

3、脂肪酶在医药工业的应用

脂肪酶可以与淀粉酶等一起作用于胃肠道，起到消化的作用，用于血液中脂质分析，还可以利用脂肪酶独特的立体镜像选择性合成多种药物，如抗癌药物，抗病毒药物等。

4、脂肪酶化妆品及清洁剂上的应用

在家庭清洁领域，脂肪酶可以用于隐形眼睛的清洁，也可去除衣物上的污垢，一般在洗脸或者洗发剂里也会添加脂肪酶，脂肪酶可以催化曲酸酯的合成，曲酸酯可以抑制皮肤黑变，利用这个特点，可以将脂肪酶添加到美白产品里，此外，肪肪酶还是化妆品与香水的主要成分。在工业领域，脂肪酶可以用于废水处理和污水管道清理，还可以用于废油的处理，例如油料在精炼及装配过程中的溢油污染和脂质加工厂的废弃物等。

脂肪酶的来源：

1、动物性来源：高等动物的胰脏和脂肪组织中含有较多的脂肪酶，动物的小肠液中也含有一定量的脂肪酶，用于补充胰脂肪酶对脂肪消化的不足。各类脂肪酶功能主要是控制脂肪的消化、吸收、脂肪重建和脂蛋白代谢等过程；

2、植物性来源：脂肪酶广泛存在于油料作物的种子，为种子生根发芽提供所必须的养料和能量；

3、微生物来源：产脂肪酶的微生物在自然界中广泛分布，主要来自霉菌和细菌。由于微生物种类多、生长周期短、繁殖快、易诱变，具有良好的作用pH和温度范围以及底物专一性。

脂肪酶是上海金畔生物科技有限公司常备货产品，货号为L8620.上海金畔生物科技有限公司公司所售脂肪酶是一类具有多种催化能力的酶，可以催化三酰甘油酯及其他一些水不溶性酯类的水解、醇解、酯化、转酯化及酯类的逆向合成反应，除此之外还表现出其他一些酶的活性，如磷脂酶、溶血磷脂酶、胆固醇酯酶、酰肽水解酶活性等。脂肪酶不同活性的发挥依赖于反应体系的特点，如在油水界面促进酯水解，而在有机相中可以酶促合成和酯交换。

番红染色液的原理是什么

番红染色液是个用在组织学和细胞学的生物染色剂。番红染色液在一些染色的实验计划表中用作复染剂，将所有的细胞核染成红色。

番红染色液的原理

番红染色液是个在一分子中含有两个氮原子的化合物，其为对称的2,8-二甲基-3,7-二氨基吩嗪。可以借由连接一分子氧化的对位-二氨和两分子的一级氨取得；这是透过对位-氨基偶氮与一级氨的浓缩以及对位-亚硝基二烷基苯胺和二级碱基，例如二苯基间苯二胺，之间的反应。它们为呈现出特有绿色金属光泽的结晶固体；在水中立即被溶解并能染成蓝色或紫色。同时也是可形成稳定的一元酸盐类的强碱。它们的酒精溶液会显现出红黄色的荧光。酚藏红在自由态时十分不稳定；它的氯化物会形成绿色的板块。其很容易就重氮化，而重氮化的盐类与酒精煮沸后会产生阿朴藏红或引杜林染料，C18H12N3。F.凯尔曼表明阿朴藏红可以在有冷藏浓缩的硫酸存在的情况下重氮化，而重氮化合物的盐类与酒精加热沸腾后会产生二甲基苯基吡唑酮盐类。阿朴藏红酮，C18H12N2O，是将阿朴藏红与浓缩盐酸加热而得。这三个化合物大概可被表示为邻-或对-醌。商业用的番红是邻-亮藏红。第一个以工业制造规格来制备的苯胺染色材料是苯胺紫，苯胺紫由威廉·珀金加热天然的苯胺与络酸钾和硫酸而得。苯胺紫是1878年由珀金在对-番红(1,8-二甲基番红)的氧化还原反应中失去7-N-对-甲苯基而来。

番红染色液在革兰氏染色和内孢子染色都是典型的复染剂。它也可以被用来检测软骨、黏蛋白和肥大细胞的颗粒。

绿原酸的性质及应用

绿原酸亦称“绿吉酸”、“咖啡单宁酸”、“咖啡鞣酸”，是由咖啡酸与奎尼酸组成的缩酚酸，是植物体在有氧呼吸过程中经过莽草酸途径产生的一种苯类化合物。

绿原酸的性质：

它广泛存在于含量较多的金银花植物中。由水中得针状结晶，为半水合物，110℃变为无水合物。熔点208℃，[α]D25-33.5°(水，C=1)，K=2.2×10-3(27℃)。有弱酸味并具收敛性。25℃时在水中溶解度为4%，较易溶于热水，溶于乙醇、丙酮，微溶于乙酸乙酯，不溶于氯仿、乙醚和二硫化碳。与浓盐酸共沸得蓝色染料。能使溴水褪色，与浓碘化氢共沸得苯甲酸，与水在230℃共热分解为苯酚，与稀盐酸共热分解为咖啡酸和金鸡纳酸等，室温与稀碱作用只得咖啡酸和金鸡纳酸。绿原酸为咖啡酸与奎宁酸的缩合物，遇铁呈蓝色，与鞣质相似，但不沉淀蛋白质，故无收敛作用。

绿原酸的应用：

绿原酸是一种重要的生物活性物质，具有抗菌、抗病毒、增高白血球、保肝利胆、抗肿瘤、降血压、降血脂、清除自由基和兴奋中枢神经系统等作用。

1.抗菌、抗病毒

杜仲绿原酸有较强的抗菌消炎作用，桃叶珊瑚苷及其多聚体有明显的抑菌作用，桃叶珊瑚苷元对革兰氏阴性、阳性菌都有抑制作用。桃叶珊瑚苷有抑菌、利尿作用，并能促进伤口愈合；桃叶珊瑚苷与葡萄糖苷一起预培养后还会产生明显的抗病毒作用，但其本身开不具有抗病毒功能。日本爱知医科大学加龄医科学研究所经研究确认，从杜仲中提取的碱性物质有抗破坏人体免疫系统病毒的功能，这种物质有可能用于预防和治疗艾滋病。

2.抗氧化作用

绿原酸是一种有效的酚型抗氧化剂，其抗氧化能力要强于咖啡酸、对羟苯酸、阿魏酸、丁香酸、丁基羟基茴香醚（BHA）和生育酚。绿原酸之所以有抗氧化作用，是因为它含有一定量的R-OH基，能形成具有抗氧化作用的氢自由基，以消除羟基自由基和超氧阴离子等自由基的活性，从而保护组织免受氧化作用的损害。

3.清除自由基、抗衰老、抗肌肉骨骼老化

绿原酸及其衍生物具有比抗坏血酸、咖啡酸和生育酚 （维生素E） 更强的自由基清除效果，可有效清除DPPH自由基、羟基自由基和超氧阴离子自由基，还可抑制低密度脂蛋白的氧化。绿原酸对有效地清除体内自由基、维持机体细胞正常的结构和功能、防止和延缓肿瘤突变和衰老等现象的发生具有重要作用。杜仲绿原酸含有一种可促进人体的皮肤、骨骼、肌肉中胶蛋白的合成与分解的特殊成分，具有促进代谢、防止衰退的功能，可用来预防宇航员因太空失重而引起的骨骼和肌肉衰退，同时发现杜仲绿原酸无论在体内还是体外，均有明显抗自由基作用。

4.抑制突变和抗肿瘤

现代药理实验证明杜仲绿原酸有抗癌和抑癌之功效，日本学者研究了杜仲绿原酸的变异原性抑制作用(antimutagenicity)，发现该作用与绿原酸等抗变异原性成分有关，揭示了绿原酸对肿瘤预防的重要意义。

蔬菜、水果中的多酚类如绿原酸、咖啡酸等可通过抑制活化酶来抑制致癌物黄曲霉毒素B1和苯并[a]-芘的变异原性；绿原酸还可通过降低致癌物的利用率及其在肝脏中的运输来达到防癌、抗癌的效果。绿原酸对大肠癌、肝癌和喉癌具有显著的抑制作用，被认为是癌症的有效化学防护剂。

5.对心血管保护作用

绿原酸作为一种自由基清除剂及抗氧化剂已被大量的试验证明，绿原酸的这种生物活性，对心血管系统能产生保护作用。异绿原酸B对大鼠具有较强促进前异绿原酸B对大鼠具有较强促进前列腺环素（PGI2）的释放和抗血小板凝集作用；对豚鼠肺碎片感应的抗体诱导SRS-A释放抑制率达62.3%。异绿原酸C也有促进PGI2释放作用。另外，异绿原酸B对血小板学栓素的生物合成和氢过氧化无诱发的内皮素损伤有极强的抑制作用。

6.降压作用

经多年临床试验证实的，杜仲绿原酸有明显的降压作用，而且疗效平稳，无毒、无副作用。研究发现杜仲绿降血压的有效成分是松酯醇二葡萄糖苷，桃叶珊瑚甙，绿原酸，和杜仲绿原酸多糖类。

7.其它生物活性

由于绿原酸对透明质酸（HAase）及葡萄糖-6-磷酸酶（Gl-6-Pase）有特殊的抑制作用，所以绿原酸对于创伤的治愈、皮肤健康湿润、润滑关节、防止炎症以及体内血糖的平衡调控等都有一定得疗效。绿原酸对多种疾病和病毒还有较强的抑制和杀灭作用。绿原酸有降血压、抗菌、抗病毒、消炎、增高白血球、预防糖尿病、显著增加胃肠蠕动和促进胃液分泌等药理作用，对急性咽喉炎症有明显的疗效。研究表明，口服绿原酸能够显著的刺激胆汁的分泌，具有利胆保肝的功效；它还可有效抑制H2O2引起的大鼠红细胞溶血作用。

RNAwait(非冻型组织RNA保存液)的作用

   RNAwait是一种无毒的可直接使用的样品储存液，能使细胞内的RNA与RNA酶分离，可以快速可靠地保存动物组织、细胞内的RNA。组织获取后立即浸入RNAwait保存液中，在室温可以保存7天，4℃可以保存4周，-20℃、-80℃标本可以长期保存，RNA稳定存在不降解，取出后用各类方法抽提可以获得高质量的RNA。

   操作流程：

1. 根据要保存的各样本的体积，计算出所需RNAwait用量。RNAwait的用量应当是组织体积的10倍（如100mg组织约用1ml RNAwait）。

2. 将RNAwait按需要量分装入自备保存管中；

3. 快速将较大的组织切成厚度<0.5 cm的任意片状，立即完全浸入RNAwait中。组织的厚度一定要<0.5 cm。

4. 保存时先将样本浸入RNAwait后置4℃冰箱过夜（4℃过夜是必需的，这样可使RNAwait完全渗入到组织中），然后转移到-20℃冰箱（RNAwait在-20℃时仍为液态，有结晶析出，是正常情况）；或者在4℃冰箱过夜后，从RNAwait中取出组织块，转移到-80℃冰箱。在RNAwait中保存的标本，反复冻融至室温20次不影响RNA的质量。

  注意事项：

1. 组织和细胞取材速度要快，在获取后应当尽快浸入RNAwait，以防止RNA降解。

2. 冰冻组织不能用RNAwait保存，因为RNAwait不能有效渗入冰冻组织。

3. 保存样品的RNA提取：样本从-20℃或-80℃冰箱取出后，复苏到室温后，取出组织块，再用于提取RNA。细胞样本则复温后低速离心收集细胞，去除RNAwait，再用于提取RNA。后继的处理（如组织匀浆）可以在室温下进行，不必在液氮中操作，RNA仍能有效得到保护。残留少量RNAwait保存液不影响后继提取RNA的质量。

    北京上海金畔生物科技有限公司科技有限公司自产产品RNAwait(非冻型组织RNA保存液)，货号为SR0020,此产品操作简单，方便运输，兼容性广。处理过的样品可以提取RNA，而不影响RNA提取的质量。也可直接用于组织切片、免疫学和流式细胞分析。

革兰氏染色的原理及染色液的配制

 革兰氏染色法是细菌学中广泛使用的一种鉴别染色法，经过染色后细菌与环境形成鲜明对比，可以清楚地观察到细菌的形态、排列及某些结构特征，而用以分类鉴定。革兰氏染色属复染法。

革兰氏染色的原理介绍：

通过结晶紫初染和碘液媒染后，在细胞壁内形成了不溶于水的结晶紫与碘的复合物，革兰氏阳性菌由于其细胞壁较厚、肽聚糖网层次较多且交联致密，故遇乙醇或丙酮脱色处理时，因失水反而使网孔缩小，再加上它不含类脂，故乙醇处理不会出现缝隙，，因此能把结晶紫与碘复合物牢牢留在壁内，使其仍呈紫色；而革兰氏阴性菌因其细胞壁薄、外膜层类脂含量高、肽聚糖层薄且交联度差，在遇脱色剂后，以类脂为主的外膜迅速溶解，薄而松散的肽聚糖网不能阻挡结晶紫与碘复合物的溶出，因此通过乙醇脱色后仍呈无色，再经沙黄等红色染料复染，就使革兰氏阴性菌呈红色。

革兰氏染色液的配制

(1)结晶紫(crystal violet)液：结晶紫乙醇饱和液(结晶紫2g溶于20mL95%乙醇中)20mL，1%草酸铵水溶液80mL 将两液混匀置24h后过滤即成。此液不易保存，如有沉淀出现，需重新配制。

(2)卢戈(Lugol)氏碘液：碘1g，碘化钾2g，蒸馏水300mL。先将碘化钾溶于少量蒸馏水中，然后加入碘使之完全溶解，再加蒸馏水至300mL即成。配成后贮于棕色瓶内备用，如变为浅黄色即不能使用。

(3)95%乙醇：用于脱色，脱色后可选用以下(4)或(5)的其中一项复染即可。

(4)稀释石炭酸复红溶液：碱性复红乙醇饱和液(碱性复红1g, 95%乙醇l0mL, 5%石炭酸90mL混合溶解即成碱性复红乙醇饱和液)，取石炭酸复红饱和液l0mL加蒸馏水90mL即成。

(5)番红溶液：番红O(safranine，又称沙黄O)2.5g, 95%乙醇100mL，溶解后可贮存于密闭的棕色瓶中，用时取20mL与80mL蒸馏水混匀即可。

以上染液配合使用，可区分出革兰氏染色阳性(G+)或阴性(G-)细菌，G-被染成蓝紫色，G+被染成淡红色。

上海金畔生物科技有限公司科技公司提供革兰氏染色液现货销售，质量稳定，欢迎选购。