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同仁化学Cellstain- AO solution试剂货号：A430 3,6-Bis(dimethylamino)acridine, hydrochloride, solution CAS号：65-61-2(AO)| 日本DOJINDO

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Cellstain- AO solution试剂货号：A430
3,6-Bis(dimethylamino)acridine, hydrochloride, solution
CAS号：65-61-2(AO)
商品信息
储存条件：-20度保存，避光
运输条件：室温
分子式：

C17H20ClN3

分子量：

301.81

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期货

细胞染色检测方案

Cellstain- AO solution试剂货号：A430 3,6-Bis(dimethylamino)acridine, hydrochloride, solution CAS号：65-61-2(AO)

Cellstain- AO solution试剂货号：A430 3,6-Bis(dimethylamino)acridine, hydrochloride, solution CAS号：65-61-2(AO)

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Cellstain- AO solution试剂货号：A430 3,6-Bis(dimethylamino)acridine, hydrochloride, solution CAS号：65-61-2(AO)
Calcein-AM/PI细胞双染试剂盒
活死细胞双染试剂盒

Cellstain- AO solution试剂货号：A430 3,6-Bis(dimethylamino)acridine, hydrochloride, solution CAS号：65-61-2(AO)
活细胞质染色-绿色——Calcein-AM
3′,6′-Di(O-acetyl)-4′,5′-bis[N,N-bis(carboxymethyl)aminomethyl]fluorescein, tetraacetoxymethyl ester

Cellstain- AO solution试剂货号：A430 3,6-Bis(dimethylamino)acridine, hydrochloride, solution CAS号：65-61-2(AO)
Cellstain- Hoechst 33342 solution试剂
2′-(4-Ethoxyphenyl)-5-(4-methyl-1-piperazinyl)-2,5′-bi-1H-benzimidazole, trihydrochloride

Cellstain- AO solution试剂货号：A430 3,6-Bis(dimethylamino)acridine, hydrochloride, solution CAS号：65-61-2(AO)
PlasMem Bright Green细胞膜染色试剂
细胞膜染色试剂—绿色

Cellstain- AO solution试剂货号：A430 3,6-Bis(dimethylamino)acridine, hydrochloride, solution CAS号：65-61-2(AO)
Cellstain- CFSE试剂
5- or 6-(N-Succinimidyloxycarbonyl)fluorescein 3′,6′-diacetate

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同仁化学Cellstain- Hoechst 33258 solution细胞核染色试剂货号：H341| 日本DOJINDO

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Cellstain- Hoechst 33258 solution细胞核染色试剂货号：H341
2′-(4-Hydroxyphenyl)-5-(4-methyl-1-piperazinyl)-2,5′-bi-1H-benzimidazole, trihydrochloride
CAS号：23491-45-4
商品信息
储存条件：0-5度保存，避光
运输条件：室温
分子式：

C25H27Cl3N6O

分子量：

533.88

特点：

 

● 可用于活/死细胞DNA检测

● 蓝色荧光，毒性低

● 试剂盒稳定性高。

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1ml

现货

 
细胞染色

规格性状
产品概述
荧光特性
原理
操作说明
文献
常见问题Q&A

规格性状

规格

特性：该产品为黄色液体。

内容：试验成功

产品概述

荧光染料Hoechst 33258是一种可对DNA染色的细胞核染色试剂，也称bisBenzimide H 33258或HOE 33258,常用于细胞凋亡检测。

Hoechst 33258是一种可以穿透细胞膜的蓝色荧光染料，对细胞的毒性较低。

Hoechst染料可透过细胞膜并对DNA染色而发出强烈的蓝色荧光。它们在聚AT序列的富集区域的小沟处与DNA结合。Hoechst 33258和Hoechst 33342均可溶于水并在水溶液中保持稳定。Hoechst-DNA的激发和发射波长分别为350 nm和460 nm。

Cellstain- Hoechst 33258 solution细胞核染色试剂货号：H341

荧光特性

λex=350nm, λem=461nm

原理

Cellstain- Hoechst 33258 solution细胞核染色试剂货号：H341

操作说明

染色步骤

1.用PBS或适当的缓冲液制备10-50μMHoechst染料溶液。a）

2.在细胞培养基中加入体积为细胞培养基1/10的Hoechst染料溶液。b）

3.将细胞在37ºC下孵育10-20分钟。

4.用PBS或适当的缓冲液清洗细胞两次。

5.在带有350 nm激发和460 nm发射滤光片的荧光显微镜下观察细胞。

a）由于赫斯特染料可能具有致癌性，因此在处理过程中必须格外小心。

b）或者您可以用1/10浓度的Hoechst染料缓冲溶液代替培养基。

文献

1) M.   J. Lydon, K. D. Keeler and D. B. Thomas, “Vital   DNA Staining and Cell Sorting by Flow Microfluorometry”, J. Cell Physiol., 1980, 102(2), 175.

2) M. Sriram, van der G. A. Marel, H.   L. Roelen, van J. H. Boo and A. H. Wang,   “Structural Consequences of a Carcinogenic Alkylation Lesion on DNA:   Effect of O6-ethylguanine on the Molecular Structure of the d(CGC[e6G]AATTCGCG)-netropsin   Complex”, Biochemistry, 1992, 31(47), 11823.

3) T. Ohara and T. Tsuge, “FoSTUA, Encoding a Basic Helix-Loop-Helix Protein, Differentially   Regulates Development of Three Kinds of Asexual Spores, Macroconidia,   Microconidia, and Chlamydospores, in the Fungal Plant Pathogen Fusarium oxysporum”, Eukaryot. Cell, 2004, 3, 1412.

常见问题Q&A

Q1:如何使用Hoechst 33258。

 
 

 

 

 

 

A1：有多种使用方法，但以形态观察为例。

它用作观察凋亡细胞中核变化（染色质浓缩，断裂）的简便方法。

<试剂>

・细胞固定液：1％戊二醛/ PBS（-）

・荧光染色：1 mM Hoechst33258 / PBS（-）

•Dojindo的产物为[1 mg / mL]（约1.87 mmol / L）

<操作方法>

1. 将含有约1 x 106个细胞的细胞培养基以400 Xg离心5分钟，并弃去上清液。

2.加入100μL细胞固定溶液，并通过移液或类似方法混合。

3.在室温下静置30分钟。

4.离心400Xg，5分钟，弃去上清液。

加入1 mL PBS（-），用移液器等混合，以400Xg离心5分钟，弃去上清液。

（*此时，戊二醛经常被洗涤和去除。可能会导致变色）

5.添加20μLPBS（-）并混合，然后添加4μL荧光染料并混合。

6.将1滴（5）的细胞溶液滴在载玻片上，盖上玻璃盖，然后按边缘。

7.在荧光显微镜下观察。

*由田沼靖（Yasushi Tanuma）指导的细胞工程独立体积实验规程系列“细胞凋亡实验规程”

 
 

Q2：细胞染料的激发波长和发射波长是多少。
A2：

Cellstain- Hoechst 33258 solution细胞核染色试剂货号：H341

Q3：Hoechst 33258和Hoechst 33342解决方案的激发波长和发射波长及其区别。

 
 

 

 

 

 

 

A3:波长如下。
Hoechst33342 Ex：350 nm Em：461 nm
Hoechst33258 Ex：352 nm Em：461 nm

两者的基本用法是相同的。
我们的产品是水溶液，所以稀释至所需浓度并添加。

两者之间的区别在于，它基本上是一种特异性结合腺嘌呤-胸苷部分的药物。
它也穿过活细胞的膜并与活细胞的DNA结合。
Hoechst 33342的膜渗透性略高。
Hoechst 33258似乎是dsDNA的选择性抗体。

同仁化学Cellstain- Hoechst 33342 solution试剂货号：H342| 日本DOJINDO

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Cellstain- Hoechst 33342 solution试剂货号：H342
2′-(4-Ethoxyphenyl)-5-(4-methyl-1-piperazinyl)-2,5′-bi-1H-benzimidazole, trihydrochloride
CAS号：23491-52-3
商品信息
储存条件：0-5度保存，避光
运输条件：室温
分子式：

C27H31Cl3N6O

分子量：

 561.93

特点：

 

● 结合活细胞DNA

● 试剂盒稳定性高。

● 激发和发射波长分别为350 nm和460 nm

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1 ml

现货

 
细胞染色

Cellstain- Hoechst 33342 solution试剂货号：H342

Cellstain- Hoechst 33342 solution试剂货号：H342

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产品概述
荧光特性
文献
常见问题Q&A

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NO.1.    Cell Counting Kit-8    细胞增殖毒性检测

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NO.5.    Caspase-3 Assay Kit-Colorimetric-    细胞凋亡检测

 

规格性状

规格

特性：该产品为黄色液体

含量：试验成功

产品概述

荧光染料Hoechst 33342是一种可对DNA染色的细胞核染色试剂，也称bisBenzimide H33342或HOE33342常用于细胞凋亡检测。

Hoechst 33342是一种可以穿透细胞膜的蓝色荧光染料，对细胞的毒性较低。

Hoechst染料可透过细胞膜并对DNA染色而发出强烈的蓝色荧光。它们在聚AT序列的富集区域的小沟处与DNA结合。Hoechst 33258和Hoechst 33342均可溶于水并在水溶液中保持稳定。Hoechst-DNA的激发和发射波长分别为350 nm和460 nm。

Cellstain- Hoechst 33342 solution试剂货号：H342

荧光特性

λex=352 nm, λem=461 nm

文献

1) M. J. Lydon, K. D. Keeler and   D. B. Thomas, “Vital DNA Staining and Cell Sorting by Flow   Microfluorometry”, J. Cell Physiol., 1980, 102(2), 175.

2) M. Sriram, van der G. A. Marel, H. L. Roelen, van J. H. Boo   and A. H. Wang, “Structural Consequences of a Carcinogenic Alkylation   Lesion on DNA: Effect of O6-ethylguanine on the Molecular Structure of the   d(CGC[e6G]AATTCGCG)-netropsin Complex”, Biochemistry, 1992, 31(47), 11823.

3) Y. Tadokoro, K. Yomogida, Y. Yagura, S. Yamada, M. Okabe   and Y. Nishimune, “Characterization of Histone H2A.X Expression in   Testis and Specific Labeling of Germ Cells at the Commitment Stage of Meiosis   with Histone H2A.X Promoter-Enhanced Green Fluorescent Protein   Transgene”, Biol. Reprod., 2003, 69,   1325.

4) F. Wada, A. Ogawa, Y. Hanai, A. Nakamura, M. Maki and K.   Hitomi, “Analyses of Expression and Localization of Two Mammalian-Type   Transglutaminases in Physarum polycephalum, an Acellular Slime   Mold”, J. Biochem.(Tokyo), 2004, 136, 665.

5) M.   Oka, N. Kobayashi, K. Matsumura, M. Nishio and K. Saeki, “Exogenous Cytokine-Free Differentiation of Human   Pluripotent Stem Cells into Classical Brown   Adipocytes”, Cells., 2019, 8, (4), 373

6)   T. Yamazaki, H. Suzuki, S. Yamada, K. Ohshio, M. Sugamata, T. Yamada and Y.   Morita, “Lactobacillus paracasei KW3110   Suppresses Inflammatory Stress-Induced Premature Cellular Senescence of Human   Retinal Pigment Epithelium Cells and Reduces Ocular Disorders in Healthy   Humans”, Int J Mol Sci, 2020, 21(14), 5091

常见问题Q&A

Q1:如何使用Hoechst 33258。

 
 

 

 

 

 

A1：有多种使用方法，但以形态观察为例。

它用作观察凋亡细胞中核变化（染色质浓缩，断裂）的简便方法。

<试剂>

・细胞固定液：1％戊二醛/ PBS（-）

・荧光染色：1 mM Hoechst33258 / PBS（-）

•Dojindo的产物为[1 mg / mL]（约1.87 mmol / L）

<操作方法>

1. 将含有约1 x 106个细胞的细胞培养基以400 Xg离心5分钟，并弃去上清液。

2.加入100μL细胞固定溶液，并通过移液或类似方法混合。

3.在室温下静置30分钟。

4.离心400Xg，5分钟，弃去上清液。

加入1 mL PBS（-），用移液器等混合，以400Xg离心5分钟，弃去上清液。

（*此时，戊二醛经常被洗涤和去除。可能会导致变色）

5.添加20μLPBS（-）并混合，然后添加4μL荧光染料并混合。

6.将1滴（5）的细胞溶液滴在载玻片上，盖上玻璃盖，然后按边缘。

7.在荧光显微镜下观察。

*由田沼靖（Yasushi Tanuma）指导的细胞工程独立体积实验规程系列“细胞凋亡实验规程”

 
 

Q2：细胞染料的激发波长和发射波长是多少。
A2：

Cellstain- Hoechst 33342 solution试剂货号：H342

Q3：Hoechst 33258和Hoechst 33342解决方案的激发波长和发射波长及其区别。

 
 

 

 

 

 

 

A3:波长如下。
Hoechst33342 Ex：350 nm Em：461 nm
Hoechst33258 Ex：352 nm Em：461 nm

两者的基本用法是相同的。
我们的产品是水溶液，所以稀释至所需浓度并添加。

两者之间的区别在于，它基本上是一种特异性结合腺嘌呤-胸苷部分的药物。
它也穿过活细胞的膜并与活细胞的DNA结合。
Hoechst 33342的膜渗透性略高。
Hoechst 33258似乎是dsDNA的选择性抗体。

同仁化学Cellstain- DAPI solution试剂货号：D523 4’6-二脒-2-苯胺，二盐酸盐 水溶液 Cellstain- DAPI solution| 日本DOJINDO

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Cellstain- DAPI solution试剂货号：D523
4’6-二脒-2-苯胺，二盐酸盐 水溶液
Cellstain- DAPI solution
商品信息
储存条件：0-5度保存，避光
运输条件：室温
分子式：

C16H17Cl2N5

分子量：

350.25

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1ml

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细胞染色

关联产品

Cellstain- DAPI solution试剂货号：D523 4&#8217;6-二脒-2-苯胺，二盐酸盐 水溶液 Cellstain- DAPI solution
Calcein-AM/PI细胞双染试剂盒
活死细胞双染试剂盒

Cellstain- DAPI solution试剂货号：D523 4&#8217;6-二脒-2-苯胺，二盐酸盐 水溶液 Cellstain- DAPI solution
活细胞质染色-绿色——Calcein-AM
3′,6′-Di(O-acetyl)-4′,5′-bis[N,N-bis(carboxymethyl)aminomethyl]fluorescein, tetraacetoxymethyl ester

Cellstain- DAPI solution试剂货号：D523 4&#8217;6-二脒-2-苯胺，二盐酸盐 水溶液 Cellstain- DAPI solution
Cellstain- Hoechst 33342 solution试剂
2′-(4-Ethoxyphenyl)-5-(4-methyl-1-piperazinyl)-2,5′-bi-1H-benzimidazole, trihydrochloride

Cellstain- DAPI solution试剂货号：D523 4&#8217;6-二脒-2-苯胺，二盐酸盐 水溶液 Cellstain- DAPI solution
PlasMem Bright Green细胞膜染色试剂
细胞膜染色试剂—绿色

Cellstain- DAPI solution试剂货号：D523 4&#8217;6-二脒-2-苯胺，二盐酸盐 水溶液 Cellstain- DAPI solution
Cellstain- CFSE试剂
5- or 6-(N-Succinimidyloxycarbonyl)fluorescein 3′,6′-diacetate

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同仁化学Cellstain- DAPI试剂货号：D212 4’6-二脒-2-苯胺，二盐酸盐 Cellstain- DAPI| 日本DOJINDO

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Cellstain- DAPI试剂货号：D212
4’6-二脒-2-苯胺，二盐酸盐
Cellstain- DAPI
商品信息
储存条件：-20度保存，避光
运输条件：室温
分子式：

C16H17Cl2N5

分子量：

350.25

特点：

 

● 可用于流式细胞仪

● 活细胞核染色试剂

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1 mg

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细胞染色

Cellstain- DAPI试剂货号：D212 4&#8217;6-二脒-2-苯胺，二盐酸盐 Cellstain- DAPI

Cellstain- DAPI试剂货号：D212 4&#8217;6-二脒-2-苯胺，二盐酸盐 Cellstain- DAPI

规格性状
产品概述
荧光特性
操作说明
文献
常见问题Q&A

规格性状

规格

 

特性：该产物为黄色至微黄色的绿棕色粉末或固体，可溶于水和稀盐酸。

水溶性：试验成功

NMR光谱：试验成功

产品概述

荧光染料DAPI是一种可对DNA 染色的细胞核染色试剂，常用于细胞凋亡检测。DAPI是含有特定AT序列DNA的一种嵌入剂，它能像Hoechst染料一样粘附在DNA双螺旋的小沟区。尽管DAPI不能通过活细胞膜，但却能穿透扰乱的细胞膜而对细胞核染色。DAPI具有很高的光漂白承受水平，能用来检测酵母线粒体DNA，叶绿体DNA，病毒DNA，microplasm  DNA以及染色体DNA。DAPI-DNA复合物的激发和发射波长分别为360 nm和460 nm。

Cellstain- DAPI试剂货号：D212 4&#8217;6-二脒-2-苯胺，二盐酸盐 Cellstain- DAPI

荧光特性

λex=360 nm, λem=460 nm

操作说明

产品使用步骤 

1.用PBS或适当的缓冲液制备10-50μMDAPI溶液。a）

2.在细胞培养基中加入体积为细胞培养基1/10的DAPI溶液。b）

3.将细胞在37℃下孵育10-20分钟。

4.用PBS或适当的缓冲液清洗细胞两次。

5.使用带有360 nm激发光和460 nm发射滤光片的荧光显微镜观察细胞。

a）由于DAPI可能致癌，因此在处理过程中必须格外小心。

b）或者您可以用1/10浓度的DAPI缓冲溶液代替培养基。

注意事项

制备DAPI储备溶液时要用水（难溶于PBS）。

但是，那些溶解在水中的物质不适合长期储存。

考虑长期存储时，请使用解决方案类型产品-Cellstain®-DAPI解决方案（代码：D523），以提高解决方案的稳定性。

文献

1) W.Schnedl,A.V.Mikelsaar,M.Breitenbach and O.Dann,”DIPI and DAPI: Fluorescence Banding with Only Negligible Fading”,Hum. Genet.,1977,36,167.

2) I.W.Taylor and B.K.Milthorpe,”An Evaluation of DNA Fluochromes, Staining Techniques, and  Analysis for Flow Cytometry. I. Unperturebed Cellpopulations”,J.Histochem. Cytochem., 1980, 28(11), 1224.

3) F.Otto and K.G.Tsou,”A Comparative Study of DAPI,DIPI,and Hoechst 33258 and 33342 as  Chromosomal DNA Stains”, Stain Technol.,1985, 60, 7.

4) N.Poulin, A.Harrison and B.Palcic,”Quantitative Precision of an Automated Image Cytometric  System for the Measurement of DNA Content and Distribution in Cells Labeled  with Fluorescent Nucleic Acid Stains”, Cytometry, 1994,16,227.

5)M.Kawai,N.Yamaguchi and M.Nasu,”Rapid Enumeration of Physiologically Active Bacteria in  Purified Water Used in the Pharmaceutical Manufacturing Process”, J.Appl. Microbiol.,1999, 86 (3),496.

常见问题Q&A

Q1 核染色中所用染料的特征和区别是什么？ 
 

 

 

A1:这里引入的染料具有通过与核酸相互作用而发出荧光或增加荧光强度的特性。

除荧光波长以外的差异如下。

[EB]

它没有碱基特异性，可与所有DNA和RNA结合。

它没有活细胞的膜通透性，并且可以染色死细胞。

[PI]

像EB一样，它没有基础特异性。它是一种更广泛使用的染料，因为插入时它的荧光强度比EB高。

它没有活细胞的膜通透性，并且可以染色死细胞。

[DAPI]

与双链小槽结合。它与腺嘌呤-胸苷簇具有高度结合。

它没有活细胞的膜通透性，并且可以染色死细胞。

[AO]

通过利用插入双链时和与单链磷酸结合时荧光波长不同的事实，可以在双链和单链之间进行区分。

它渗透到活细胞的细胞膜上。

[Hoechst33342，33258]

它与DNA的腺嘌呤胸苷部分特异性结合。

它是一种颜料，可以渗透到活细胞的细胞膜上并染色活细胞的DNA。
 

Q2：细胞染料的激发波长和发射波长是多少。
A2：

Cellstain- DAPI试剂货号：D212 4&#8217;6-二脒-2-苯胺，二盐酸盐 Cellstain- DAPI

 

 

Q3 如何使用DAPI进行核染色？
 

 

A3:有以下使用情况报告示例。制备DAPI储备溶液时要用水（难溶于PBS）。

但是，那些溶解在水中的物质不适合长期储存。

对于长期存储，请使用解决方案类型产品-Cellstain®-DAPI解决方案（货号：D523），具有更高的解决方案稳定性。使用时，用缓冲液或有机溶剂将储备溶液稀释至所需浓度。

[使用DAPI进行细胞染色的示例]

包含实体瘤或簇的样品的DAPI染色示例（参考文献3）

1）用0.02％胰蛋白酶-EDTA处理，在37°C下孵育30分钟，以1,500 rpm离心5分钟，然后冲洗上清液。

2）在-20°C下用50％甲醇（也可以使用乙醇）固定后，以1,500 rpm离心5分钟以除去上清液。

3）在-20℃下用30％甲醇洗涤后，以1,500rpm离心5分钟以除去上清液。

4）用0.2 M磷酸盐缓冲液（pH 7.2）洗涤后，以1,500 rpm离心5分钟以除去上清液。

5）每106个细胞添加0.2 mL的RNase的0.2 M磷酸盐缓冲液（pH 7.2）（pH 7.2）（1 mg / mL），并在37°C下孵育30分钟。

6）用0.2 M磷酸盐缓冲液（pH 7.2）洗涤后，以1,500 rpm离心5分钟以除去上清液。

7）加入10 mL 1μg/ mL DAPI溶液，并在黑暗中于4°C染色2小时。

[使用DAPI进行细胞染色的例子] Vollenweider等人在磷酸化因子激活的杀伤（LAK）细胞的细胞增殖试验中。

使用荧光打印机执行DAPI染色并进行测量（参考2）。

那时，请使用0.1 mg / mL的水溶液和1μg/ mL的甲醇溶液。

使用每孔100μL进行荧光染色。