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同仁化学细胞凋亡检测试剂盒——Annexin V, 633 Apoptosis Detection Kit货号：AD11| 日本DOJINDO

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细胞凋亡检测试剂盒——Annexin V, 633 Apoptosis Detection Kit货号：AD11
Annexin V, 633/PI凋亡检测试剂盒
Annexin V, 633 Apoptosis Detection Kit
商品信息
储存条件：0-5度保存，避光
运输条件：室温

特点：

· 灵敏度&稳定性高

· 性价比之选。

· 无需荧光补偿调节

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细胞凋亡检测

细胞凋亡检测试剂盒——Annexin V, 633 Apoptosis Detection Kit货号：AD11

细胞凋亡检测试剂盒——Annexin V, 633 Apoptosis Detection Kit货号：AD11

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原理
荧光参数
注意事项
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凑单关联产品TOP5

NO.1.    Cell Counting Kit-8    细胞增殖毒性检测

NO.2.    Annexin V, FITC Apoptosis Detection Kit    细胞凋亡检测

NO.3.    Cell Cycle Assay Kit    细胞周期检测

NO.4.    Caspase-3 Assay Kit-Colorimetric-    细胞凋亡检测

NO.5.    DAPGreen – Autophagy Detection   细胞自噬检测

试剂盒内含

细胞凋亡检测试剂盒——Annexin V, 633 Apoptosis Detection Kit货号：AD11

产品概述

细胞凋亡是指为维持有机体内环境稳定，由基因控制的细胞自主的有序的死亡。正常情况下任何细胞在形成过程中发生的异常都会通过凋亡消除。例如体内的癌细胞增长为肿瘤的过程会受细胞凋亡的引导而被抑制。然而在抑癌基因p53出现问题时，凋亡就不会诱导发生，从而导致癌细胞的不断增长。细胞凋亡可以通过细胞形态的变化或生物化学的变化来检测。目前常用的指标有caspase活性变化、DNA碎片、磷脂酰丝氨酸的外翻等。

原理

Annexin V染色的细胞可以用于检测细胞凋亡早期的细胞膜变化。在细胞凋亡早期，膜磷脂酰丝氨酸由脂膜内侧翻向外侧。Annexin V是一种分子量为35-36kD的Ca2+依赖性磷脂结合蛋白，与磷脂酰丝氨酸有高度亲和力，可通过细胞外侧暴露的磷脂酰丝氨酸与凋亡早期细胞的胞膜特异性结合，因此Annexin V 被作为检测细胞早期凋亡的灵敏指标之一。用红色荧光633标记的Annexin V通过流式细胞仪或荧光显微镜可以检测到细胞凋亡的发生。碘化丙啶 (Propidium Iodide, PI) 是一种核酸染料，PI只能透过凋亡晚期和死细胞的细胞膜，因此Annexin V和PI结合使用，可以区分凋亡早晚期的细胞及死细胞。

荧光参数

流式细胞仪检测

1. 加样到流式细胞仪检测，

633：激发波长Ex: 633 nm；

发射波长Em: 650-670 nm。

PI：激发波长Ex: 488 nm；

发射波长Em: 564-606 nm。

2. 633的红色荧光通过633通道(FL4)检测;

PI的红色荧光通过PI通道 (FL2或FL3)检测 (建议使用FL3)。

设定对照

1. 未染色细胞。

2. Annexin V, 633染色细胞 (没有PI)。

3. PI染色细胞 (没有Annexin V, 633)。

荧光显微镜检测

将细胞悬液滴到玻片上，置于显微镜上使用合适的滤光片检测。

* 由于EDTA会对细胞膜的特定部位有损伤，建议使用不含EDTA的胰酶消化贴壁细胞

注意事项

1. Annexin V, 633和PI均对光敏感。所有染色过程和培养过程均需避光。

2. 若细胞收集过程中使用胰酶，需设法去除残留的胰酶，这些胰酶会消化并降解Annexin V, 633，最终导致染色失败。

3. 用 APC和PE通道检测基本不用调节荧光补偿，但是如果细胞中还有其它荧光，例如细胞中有GFP，GFP荧光会影响PI通道的信息采集，需要调节荧光补偿。

参考文献

1. Deregulated lncRNA expression profile in the mouse lung adenocarcinomas with KRAS-G12D mutation and P53 knockout,Journal of Cellular and Molecular Medicine, 2019, 00:1-11

2. Curcumin Inhibits Growth of Human NCI-H292 Lung Squamous Cell Carcinoma Cells by Increasing FOXA2 Expression,Front. Pharmacol., 2018, doi: 10.3389/fphar.2018.00060

3. UCP2 ameliorates mitochondrial dysfunction, inflammation, and oxidative stress in lipopolysaccharide-induced acute kidney injury,International Immunopharmacology, 2019, 71, 336-349

4. γ-Glutamyl cyclotransferase contributes to endometrial carcinoma malignant progression and upregulation of PD-L1 expressionduring activation of epithelial-mesenchymal transition,International Immunopharmacology, 2019, 106039, doi:10.1016/j.intimp.2019.106039

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细胞凋亡检测试剂盒——Annexin V, FITC Apoptosis Detection Kit
Annexin V-FITC/PI凋亡检测试剂盒

细胞凋亡检测试剂盒——Annexin V, 633 Apoptosis Detection Kit货号：AD11
Caspase-3 Assay Kit -Colorimetric-试剂盒
Caspase-3检测试剂盒-比色法

同仁化学细胞凋亡检测试剂盒——Annexin V, FITC Apoptosis Detection Kit货号：AD10| 日本DOJINDO

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细胞凋亡检测试剂盒——Annexin V, FITC Apoptosis Detection Kit货号：AD10
Annexin V-FITC/PI凋亡检测试剂盒
Annexin V, FITC Apoptosis Detection Kit
商品信息
储存条件：0-5度保存，避光
运输条件：室温

特点：

· 灵敏度&稳定性高

· 性价比高

· 荧光显微镜和流式检测双重方法检测

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价格：

细胞凋亡检测

细胞凋亡检测试剂盒——Annexin V, FITC Apoptosis Detection Kit货号：AD10

细胞凋亡检测试剂盒——Annexin V, FITC Apoptosis Detection Kit货号：AD10

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试剂盒内含
产品概述
原理
荧光参数
相关资料
常见问题Q&A
参考文献

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凑单关联产品TOP5

NO.1.    Cell Counting Kit-8     细胞增殖毒性检测   

NO.2.    PI/RNase Staining    细胞周期检测   

NO.3.    Caspase-3 Assay Kit -Colorimetric    细胞凋亡检测  

NO.4.    ROS Assay Kit    活性氧检测

NO.5.    Calcein-AM/PI细胞双染试剂盒    活死细胞双染 

试剂盒内含

细胞凋亡检测试剂盒——Annexin V, FITC Apoptosis Detection Kit货号：AD10

产品概述

细胞凋亡是指为维持有机体内环境稳定，由基因控制的细胞自主的有序的死亡。正常情况下任何细胞在形成过程中发生的异常都会通过凋亡消除。例如体内的癌细胞增长为肿瘤的过程会受细胞凋亡的引导而被抑制。然而在抑癌基因p53出现问题时，凋亡就不会诱导发生，从而导致癌细胞的不断增长。细胞凋亡可以通过细胞形态的变化或生物化学的变化来检测。目前常用的指标有caspase活性变化、DNA碎片、磷脂酰丝氨酸的外翻等。

原理

Annexin V染色的细胞可以用于检测细胞凋亡早期的细胞膜变化。在细胞凋亡早期，膜磷脂酰丝氨酸由脂膜内侧翻向外侧。Annexin V是一种分子量为35-36kD的Ca2+依赖性磷脂结合蛋白，与磷脂酰丝氨酸有高度亲和力，可通过细胞外侧暴露的磷脂酰丝氨酸与凋亡早期细胞的胞膜特异性结合，因此Annexin V 被作为检测细胞早期凋亡的灵敏指标之一。用绿色荧光FITC标记的Annexin V通过流式细胞仪或荧光显微镜可以检测到细胞凋亡的发生。碘化丙啶 (Propidium Iodide, PI) 是一种核酸染料，PI只能透过凋亡晚期和死细胞的细胞膜，因此Annexin V和PI结合使用，可以区分凋亡早晚期的细胞及死细胞。

细胞凋亡检测试剂盒——Annexin V, FITC Apoptosis Detection Kit货号：AD10

Normal Cell                         Early stages of apoptosis                   Late stages of apoptosis

荧光参数

-流式细胞仪检测

1. 加样到流式细胞仪检测，激发波长Ex = 488 nm；发射波长Em = 530 nm。

2. Annexin V-FITC的绿色荧光通过FITC通道 (FL1) 检测；PI的红色荧光通过PI 通道 (FL2或FL3) 检测 (建议使用FL3)。

-荧光显微镜检测

将细胞悬液滴到玻片上，置于显微镜上使用合适的滤光片检测。* 由于EDTA会对细胞膜的特定部位有损伤，建议使用不含EDTA的胰酶消化贴壁细胞。

相关资料

所需的设备和材料

– 样品和诱导剂

– PBS、超纯水

– 合适量程的移液器

– 细胞培养用6，12，24，96孔板

– 流式细胞仪或荧光显微镜。

* 最大激发/发射波长  Annexin V, FITC: 494 nm/518 nm；PI: 535 nm/617 nm

溶液制备

1×Annexin V Binding solution：将10×Annexin V Binding Buffer用超纯水稀释10倍。

稳定性

试剂盒在0-5℃下可以保存6个月，请避光保存Annexin V, FITC结合物。

＊实验实例及操作步骤请参考中文说明书

常见问题Q&A

Q1:贴壁细胞凋亡实验是否能够不消化？
A1：不选择消化的原因是什么？    =>主要是担心胰酶对细胞膜损伤而影响结果判断。

贴壁细胞在检测凋亡之前，如果没有出现团聚的情况，那么是可以尝试不消化直接镜检。理由是基于Annexin V- FITC与细胞反应的一个机理，凋亡早期的膜磷脂酰丝氨酸由膜内外翻，与Annexin V特异性结合，那么FITC标记的Annexin V呈现一个绿色荧光，所以我们保证足够的细胞膜暴露在工作液中，那即使没有经过胰酶消化，最终也是能够用荧光显微镜观察凋亡的情况。

 

不消化有几点好的地方：

1.避免一个对细胞膜的损伤，那结果能够很好的反应促凋亡的结果

2.操作简便，避免消化以及清洗过程中出现的操作失误

 

不消化有几点担心的地方：

1.无法制成细胞悬液，染色可能出现不充分

2.可能无法观察凋亡晚期PI和FITC双染的细胞
Q2:目前用Tunel的检测试剂盒做凋亡实验。和Tunel比较，用Annexin V-FITC的优点是什么？
A2: TUNEL这种方法灵敏度很高，但是特异性比较低，只能标记出凋亡中期和凋亡晚期的细胞，而且细胞坏死也会发生DNA断裂，不能算是真正的凋亡细胞，造成假阳性的现象。    建议老师两种方法都进行，以Tunel方法为主，Annexin V的方法为辅，这样两种方法都进行，互相也可以验证结果是否准确，互作参考。

参考文献

1. A Novel Allosteric Inhibitor of Phosphoglycerate Mutase 1 Suppresses Growth and Metastasis of Non-Small-Cell Lung Cancer,

Cell Metabolism, 2019, 30, 1-13

2. Tumor Microenvironment Activable Self-Assembled DNA Hybrids for pH and Redox Dual-Responsive Chemotherapy/PDT

Treatment of Hepatocellular Carcinoma, Advanced Science, 2017, 4(4), 1600460

3. Biogenic (R)-(+)-Lipoic Acid Only Constructed Cross-LinkedVesicles with Synergistic Anticancer Potency，

Advanced Functional Materials, 2018, 1806567

4. Anti-mitotic chemotherapeutics promote apoptosis through TL1A-activated death receptor 3 in cancer cells,

Cell Research, 2018, 28, 544-555

5. Bacteria-Driven Hypoxia Targeting for Combined Biotherapy and Photothermal Therapy, ACS Nano, 2018, 12(6), 5995-6005

6. Nanoenzyme-Augmented Cancer Sonodynamic Therapy by Catalytic Tumor Oxygenation, ACS Nano, 2018, 12, 3780-3795

7. Tumor-Specific Multiple Stimuli-Activated Dendrimeric Nanoassemblies with Metabolic Blockade Surmount Chemotherapy

Resistance, ACS Nano, 2017, 11(1), 416-429

8. Near Infrared-Guided Smart Nanocarriers for MicroRNA-Controlled Release of Doxorubicin/siRNA with Intracellular ATP as Fuel,

ACS Nano, 2016, 10(3), 3637-47

9. Noninvasive small-animal imaging of galectin-1 upregulation for predicting tumor resistance to radiotherapy,

Biomaterials, 2018, 158, 1-9

10. Cytotoxicity of guanine-based degradation products contributes to the antiproliferative activity of guanine-rich oligonucleotides,Chemical Science, 2015, 6, 3834-3836

11. A Novel Strategy through Combining iRGD Peptide with Tumor-icroenvironment-Responsive and Multistage Nanoparticles

for Deep Tumor Penetration, ACS Appl.Mater.Interfaces, 2015, 7(49), 27458-27466

12. JOSD1 inhibits mitochondrial apoptotic signalling to drive acquired chemoresistance in gynaecological cancer by stabilizing MCL1,Cell Death & Differentiation, 2020, 27, 55-70

13. The influence of printing parameters on cell survival rate and printability in microextrusion-based 3D cell printing technology,Biofabrication, 2015, 7(4), 045002

14. Downregulation of MCL-1 and upregulation of PUMA using mTOR inhibitors enhance antitumor efficacy of BH3 mimetics in triple-negative breast cancer, Cell Death & Disease, 2018, 9, 137

15. Mutations in the P10 region of procaspase-8 lead to chemotherapy resistance in acute myeloid leukemia by impairing procaspase-8 dimerization, Cell Death & Disease, 2018, 9(5), 516

16. Preclinical evaluation of antitumor of the proteasome inhibitor MLN2238 (ixazomib) in hepatocellular carcinoma cells,Cell Death & Disease, 2018, 9, 28

17. Long Noncoding RNA HCAL Facilitates the Growth and Metastasis of Hepatocellular Carcinoma by Acting as a ceRNA of LAPTM4B,Molecular Therapy: Nucleic Acids, 2017, 9, 440-451

18. TMEM74 promotes tumor cell survival by inducing autophagy via interactions with ATG16L1 and ATG9A,Cell Death & Disease, 2017, 8, e3031-3045

19. Nogo-C regulates cardiomyocyte apoptosis during mouse myocardial infarction, Cell Death & Disease, 2016, 7, e2432

20. TonEBP modulates the protective effect of taurine in ischemia-induced cytotoxicity in cardiomyocytes,Cell Death & Disease, 2015, 6, e2025

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Caspase-3 Assay Kit -Colorimetric-试剂盒
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细胞凋亡检测试剂盒——Annexin V, 633 Apoptosis Detection Kit
Annexin V, 633/PI凋亡检测试剂盒

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In situ Apoptosis Detection Kit酶试剂盒Takara Clontech

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In situ Apoptosis Detection Kit
品牌 Code No. 产品名称 包装量 价格（元） 说明书 数量
Takara MK500 In situ Apoptosis Kit 20 Rxns ￥1,842 In situ Apoptosis Detection Kit In situ Apoptosis Detection Kit In situ Apoptosis Detection Kit
Takara MK501 Labeling Safe Buffer 500 μl x 10 ￥4,306 In situ Apoptosis Detection Kit In situ Apoptosis Detection Kit In situ Apoptosis Detection Kit
Takara MK502 TdT Enzyme 50 μl × 10 ￥2,203 In situ Apoptosis Detection Kit In situ Apoptosis Detection Kit In situ Apoptosis Detection Kit
Takara MK503 Anti-FITC HRP Conjugate 1.5 ml × 5 ￥1,683 In situ Apoptosis Detection Kit In situ Apoptosis Detection Kit In situ Apoptosis Detection Kit
Takara MK504 Control Slide 10 Slides Inquire In situ Apoptosis Detection Kit In situ Apoptosis Detection Kit In situ Apoptosis Detection Kit
Takara MK505 Permeabilisation Buffer 1 ml x 10 Inquire In situ Apoptosis Detection Kit In situ Apoptosis Detection Kit In situ Apoptosis Detection Kit
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■ 制品内容*4 (Code No. MK500   20 次量)In situ Apoptosis Detection Kit
1. Labeling Safe Buffer 500 μl × 2
2. TdT Enzyme*1 50 μl × 2
3. Anti-FITC HRP Conjugate*2 1.5 ml × 1
4. Control Slides*3 2 slides
5. Permeabilisation Buffer 1.0 ml × 2
 
*1：TdT Enzyme是来源于E. coli的重组蛋白质。
*2：兔多克隆抗体。
*3：Control Slides是大鼠乳腺组织的石蜡包埋组织切片。作为阳性对照使用时，需要进行脱石蜡处理，请参照说明书中“操作方法，C. 石蜡包埋组织切片”的实验操作方法。在脱石蜡和Proteinase K处理后，请参考操作方法中的检测方法。
* 4 每个组份可以单独购买
（1）Labeling Safe Buffer（Code No. MK501） In situ Apoptosis Detection Kit 500 μl×10
（2）TdT Enzyme（Code No. MK502）   50 μl×10
（3）Anti-FITC HRP Conjugate （Code No. MK503）   1.5 ml×5
（4）Control Slides（Code No. MK504） In situ Apoptosis Detection Kit 2 slides×5
（5）Permeabilisation Buffer（Code No. MK505）   1.0 ml×10
 
■ 制品说明
细胞凋亡（Apoptosis）是生命个体中的调控基因，为了维持个体生命，调控细胞进行新陈代谢，促使不需要的细胞或者具有危险性的细胞自我凋亡的现象，与细胞的生长、分化、生理现象（特别在免疫方面）有着密切关系。近期研究表明，细胞凋亡在癌细胞的发生过程中，或在放射线、热能等物理因素以及药物等化学因素对癌细胞生长的抑制、癌细胞的消失、癌细胞的分化诱导过程中都起着重要作用。因此，近期在癌症控制研究方面，细胞凋亡也为科研人员所广泛关注。
发生细胞凋亡现象的特征之一，是染色体DNA以核小体为单位（185 bp）进行DNA片断化，这些DNA片段可以通过DNA的末端标记法进行组织学检定。本试剂盒使用了TUNEL（TdT-mediated dUTP nick end labeling）法，通过对in situ标记DNA片段的检测，可以有效地检定局部组织或单个细胞中的细胞凋亡现象。
 
■ 保存
1、2、5: -20℃
3: 4℃（第一次融解后请于4℃保存）
4: 室温
 
■ 试剂盒原理
TUNEL法利用TdT酶的作用，对凋亡细胞中的片断化DNA的3’-OH游离末端进行高效特异性标记fluorescein-dUTP，然后使用荧光显微镜或流式细胞仪直接进行观察。对掺入的fluorescein，同时也可以通过过氧化物酶标记的抗fluorescein抗体进行检出，与显色化学物质反应后可以使用光学显微镜进行观察。
 
■ 试剂盒特性
1. 操作简便：使用Ready-to-Use型试剂。
2. 高灵敏度：可以单一检出初期的凋亡细胞。
3. 高特异性：与坏死细胞相比，能特异性染色凋亡细胞。
4. 使用灵活：可应用于组织切片、固定细胞等。
            可使用荧光显微镜、光学显微镜等观察实验结果。
            可以单独购买组份。
5. 高正确性：配有阳性对照，可以确认试剂盒的有效性及用于熟悉实验流程。
6. 高安全性：Buffer中不含危险试剂，如二甲砷酸钠。
 
 

Apoptosis Activator 2 细胞凋亡激活子 2 品牌：Enzo

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Apoptosis Activator 2

细胞凋亡激活子 2

品牌：Enzo
CAS No.：79183-19-0
储存条件：+4℃
纯度：–
产品编号

(生产商编号)

 等级 规格 运输包装 零售价(RMB) 库存情况 参考值

ALX-420-035-M025

 – 25 mg – 2,520.00 – –


* 干冰运输、大包装及大批量的产品需酌情添加运输费用


* 零售价、促销产品折扣、运输费用、库存情况、产品及包装规格可能因各种原因有所变动，恕不另行通知，确切详情请联系上海金畔生物科技有限公司。

Annexin V-FITC apoptosis detection kit Annexin V-FITC 细胞凋亡 检测试剂盒 品牌：Enzo

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Annexin V-FITC apoptosis detection kit

Annexin V-FITC 细胞凋亡 检测试剂盒

品牌：Enzo
CAS No.：
储存条件：+4℃
纯度：–
产品编号

(生产商编号)

 等级 规格 运输包装 零售价(RMB) 库存情况 参考值

ALX-850-020-KI01

 – 300 tests – 10,630.00 – –


* 干冰运输、大包装及大批量的产品需酌情添加运输费用


* 零售价、促销产品折扣、运输费用、库存情况、产品及包装规格可能因各种原因有所变动，恕不另行通知，确切详情请联系上海金畔生物科技有限公司。