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固定化 T4 DNA 连接酶 收藏
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产品特点
· 固定化 T4 DNA 连接酶（IM T4 DNA Ligase）由 T4 DNA 连接酶和磁珠组成，两者由共价键连接。
产品说明
T4 DNA 连接酶催化双链 DNA 或 RNA 上相邻的 5´-磷酸基末端和 3´-羟基末端形成磷酸二酯键。该酶不仅能够催化平末端或粘性末端之间的连接，还可以修复双链 DNA、RNA 或 DNA/RNA 杂交双链中的单链切刻（1）。
固定化 T4 DNA 连接酶（IM T4 DNA Ligase）是包被有 T4 DNA 连接酶的磁珠悬浮液，以 10 mg/ml 的溶液（50% 甘油）提供，每微升溶液的有效浓度为 60 粘性末端单位（CEU）。反应完成后，体系中的酶可使用磁力去除，然后可重复使用。
固定化 T4 DNA 连接酶在不同温度下的相对活性
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Temperature |
% Activity |
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16ºC |
100% |
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25ºC |
100% |
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37ºC |
50% |
固定化 T4 DNA 连接酶在不同 NEB 缓冲液中的活性
图 1：固定化 T4 DNA 连接酶成功连接 Lambda DNA-HindIII 消化产物
根据产品说明书推荐步骤，分别使用无连接酶、可溶性 T4 DNA 连接酶（NEB #M0202）、固定化 T4 DNA 连接酶（NEB #M0569）对 Lambda DNA- HindIII 消化产物（NEB #N3012）进行连接。结果显示，可溶性酶和固定化酶的连接效果一致。
图 2：固定化 T4 DNA 连接酶可重复使用
将固定化 T4 DNA 连接酶（NEB #M0569）置于快连缓冲液中，对 Nanopore 接头进行连续夹板连接，数据显示：经过 20 次连续连接反应后，酶活仍不受影响。