T3 DNA 连接酶 货 号 #M0317L-NEB酶试剂 New England Biolabs

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产品资料 – DNA修饰酶与克隆技术 – DNA 连接酶

T3 DNA 连接酶                              收藏

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#M0317L
750,000 units
3,469.00
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#M0317S
100,000 units
859.00
有
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特性

 连接粘性末端或平末端
 高盐耐受力
 dsDNA 切刻修复 

概述

T3 DNA 连接酶来源于 T3 噬菌体，是 ATP 依赖型双链 DNA 连接酶，可以有效催化粘性末端、平齐末端和切刻的连接。加入 PEG 6000 可提高平齐末端连接效率。T3 DNA 连接酶在反应中对 NaCl 的耐受性是 T4 DNA 连接酶的 2 倍，因此，当体外分子生物学实验中需要考虑实验离子浓度下 DNA 连接酶活性时，就多了一个选择。 

来源

重组 E. coli 质粒，含有 T3 DNA 连接酶编码基因。 

反应条件

1X T3 DNA 连接酶反应缓冲液
[66 mM Tris-HCl，1 mM ATP，10 mM MgCl2，1 mM DTT，7.5% PEG 6000（pH 7.6 @ 25℃）]，25℃ 温育。 

质保声明

T3 DNA 连接酶经过严格的质量控制检测，以确保最高的纯度和反应效率。详情请登陆www.neb.com 或 www.neb-china.com。 

单位定义

1 单位是指在 20 μl 总反应体系中，1X T3 DNA 连接酶反应缓冲液条件下，25℃ 温育 1 分钟，能使 50% 的 100 ng 经 HindIII 消化的 λDNA 连接所需的酶量。 

浓度

3,000,000 units/ml。 

注意事项

ATP 是必需的辅因子。
当某些实验不能用 PEG 6000 时，可使用 T4 DNA 连接酶缓冲液，但活性会降低 10 倍。切记反应时体系内一定要有终浓度为 1 mM 的 ATP。需要维持高 NaCl 浓度的实验，建议使用不含 PEG 6000 的缓冲液。
65℃ 加热 10 分钟可使 T3 DNA 连接酶失活。如果反应缓冲液中含有 PEG，该酶不能加热失活，否则会抑制后续转化实验。 

参考文献