上海金畔生物科技有限公司代理Takara Clontech酶试剂盒全线产品，欢迎访问官网了解更多产品信息和订购。
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| ■ 制品内容 (Code No.: RR390L: 50 μl反应×200次) |
| Premix Ex Taq (2X) (Probe qPCR)，Bulk*1 |
5 ml |
| ROX Reference Dye (50X)*2 |
200 μl |
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*1 内含TaKaRa Ex Taq HS，dNTP Mixture，Mg2+，Tli RNaseH等。
*2 使用在Applied Biosystems等Real Time PCR扩增仪上，用以校正孔与孔之间产生的荧光信号误差。ROX Reference Dye 的用量取决于所用仪器，请遵循如下原则：
◆ 使用下述仪器时，ROX Reference Dye (50X) 添加量为PCR反应体系的1/50：
StepOnePlus Real-Time PCR System (Thermo Fisher Scientific)
◆ 使用下述仪器时，ROX Reference Dye (50X) 添加量为PCR反应体系的1/500：
Applied Biosystems 7500/7500 Fast Real Time PCR System (Thermo Fisher Scientific)
◆ 使用下述仪器时，不必添加ROX Reference Dye (50X)：
Thermal Cycler Dice Real Time System series (Code No. TP950/TP970/TP980/TP990、TP900/TP960：终卖、TP700/TP760：终卖)
Smart Cycler II System (Cepheid))
LightCycler 480 System (Roche Diagnostics)
CFX96 Real-Time PCR Detection System (Bio-Rad)
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| ■ 制品说明 |
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本制品是采用探针法进行Real Time PCR (qPCR) 反应的专用试剂，可用于快速PCR。Premix Ex Taq是一种2X 浓度的Premix Type试剂，进行实验时，PCR反应液的配制十分方便简单。Mix中添加了Tli RNaseH (耐热性RNaseH)，以cDNA作为模板进行PCR反应时，可以很好地抑制由于cDNA中残存mRNA对PCR反应造成的阻害作用。制品中使用了添加了抗体的Hot Start PCR酶TaKaRa Ex Taq HS，与Takara精心研制的Real Time PCR用Buffer组合使用，可以有效抑制非特异性的PCR扩增，大大提高PCR的扩增效率，进行高灵敏度的Real Time PCR扩增反应。
本制品可以在宽广的定量区域内得到良好的标准曲线，对靶基因进行准确定量、检测，重复性好，可信度高。
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| ■ 保存 |
4℃保存 (稳定性高达6个月)。
注意避光保存，防止污染。
1. 使用前轻轻颠倒以确保试剂完全溶解并充分混匀。
2. 可在-20℃长期保存，一旦融解请于4℃保存并在6个月之内使用完。
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| ■ 使用注意 |
1. 使用前，请上下颠倒轻轻均匀混合，避免起泡，并经轻微离心后使用。如果试剂没有混匀，其反应性能会有所下降，不能使用振荡器混匀。Premix Ex Taq（Probe qPCR）（2X Conc.）于-20℃保存时容易形成沉淀，此时，室温（约30℃以下）短时间放置后，颠倒混匀可以完全溶解。确保试剂混合均匀后再使用。
2. 溶解后的试剂请于冰上放置。
3. 本制品中不含有探针。
4. 反应液的配制、分装请一定使用新的 (无污染的) 枪头、Microtube等，尽量避免污染。
5. 本制品中使用的TaKaRa Ex Taq HS是利用抗Taq抗体的Hot Start用DNA聚合酶，与其他公司的化学修饰型Hot Start用DNA聚合酶相比，不需要PCR反应前的95℃、5～15分钟的酶的活性化反应。如果高温处理时间过长，会使酶的活性下降，其PCR的扩增效率、定量准确度等都会受到影响。如果在PCR反应前进行模板的预变性，通常设定为95℃、30秒。 |
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