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磷酸肽离心柱
品牌	Code No.	产品名称	包装量	价格（元）	说明书	数量
Clontech	635635	Phosphopeptide Enrichment Buffer Kit	Each	￥1,834

■ 产品描述

我们的Phosphopeptide Enrichment Spin Columns 和 Phosphopeptide Enrichment Buffer Kit能够增强对一些很难检测的磷酸化肽段的检测能力。简单的实验操作可以帮助实验人员在做质谱或HPLC检测之前富集蛋白质消化片段。

离心柱使用的是能够结合磷酸肽的特别的IMAC树脂，可以从哺乳动物细胞和组织中分离磷酸肽，最高可结合250 μg的磷酸肽并且可以容纳高达850 μl的样品量。离心柱与大多数离心机都可以良好匹配，使用时无需预平衡，直接离心去除储存buffer即可。

试剂盒中提供优化的上样buffer和洗脱buffer，可以得到理想结果，buffer的量足够与25个离心柱配套使用，无需费时自行配制。

■ 产品特点

· 可有效、特异性地富集所有种类的磷酸肽——磷酸化酪氨酸，磷酸化丝氨酸，磷酸化苏氨酸 · 使用方便的预装柱 · 在质谱分析中获得更高的灵敏度

■ 应用

富集磷酸肽

■ 实验例

上图为使用本制品离心柱纯化β-酪蛋白磷酸肽的结果。首先使用trypsin（测序级别）消化β-酪蛋白，消化产物以1:1的比例用Loading Buffer稀释，然后使用本离心柱进行纯化，后用Elution Buffer进行洗脱，产物冻干后溶解在0.1% TFA水溶液中（v/v）。图A是反相HPLC（RP-HPLC）检测粗品蛋白质消化液的结果，图B是对洗脱液（纯化出了磷酸肽）的检测，图C是对去磷酸化样品洗脱液的检测。洗脱的组分使用XTerra RP18 柱 (5 μm，4.6 x 150 mm) 经RP-HPLC进行分离， 在215 nm进行紫外检测 (溶剂A: 0.1% TFA 水溶液[v/v]，溶液B: 0.1% TFA乙腈溶液 [v/v]). 对图B中收集到的两个磷酸肽组分进行 MALDI分析。

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