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BcaBEST™ RNA PCR Kit Ver.1.1
品牌	Code No.	产品名称	包装量	价格（元）	说明书	数量
Takara	RR023A	BcaBEST™ RNA PCR Kit Ver.1.1	100 Rxns	￥1,200
Takara	RR023B (A × 2)	BcaBEST™ RNA PCR Kit Ver.1.1	100 Rxns × 2	￥2,300

■ 制品内容 (Code No.: RR023A : 100次量*1)

BcaBEST Polymerase (22 U/μl) 50 μl RNase Inhibitor (40 U/μl) 25 μl Random 9 mers (50 μM) 50 μl Oligo dT Primer (50 μM) 50 μl RNase Free dH2O 1 ml Bca-Optimized Taq (5 U/μl) 25 μl 2 × Bca lst Buffer 1.25 ml × 2 支 5 × Bca 2nd Buffer 800 μl dNTP Mixture (各10 mM) 50 μl MgSO4 (25 mM) 500 μl Control F-1 Primer*2 (20 μM) 25 μl Control R-1 Primer*3 (20 μM) 25 μl Positive Control RNA (2 × 105 copies/μl) 25 μl     *1 反转录反应10 μl，PCR反应体系50 μl，可使用100次。 *2 Positive Control RNA用上游引物。 *3 Positive Control RNA用下游引物。

■ 制品说明

PCR（Polymerase Chain Reaction；聚合酶链式反应）是一种体外扩增DNA的简单而有效的方法。虽然原理上PCR法是扩增DNA，RNA不能直接被扩增，但是经过反转录酶的作用把RNA反转录成cDNA后，PCR法便可应用于RNA的解析了。目前，此方法已广泛应用于RNA的构造解析、cDNA的克隆及RNA水平上的表达解析等多种领域。 本试剂盒含有从RNA反转录到cDNA以及扩增此cDNA所必需的全部试剂，即用Bacillus caldotenax来源的BcaBEST Polymerase从RNA合成cDNA，然后在同一试管内加入应用LA PCR技术研制的Bca-Optimized Taq扩增此cDNA。此外，使用BcaBEST Polymerase进行反转录反应的最适温度是65℃，所以对具有复杂二级结构的RNA特别适合。

■ 各种引物的序列

引物名称 各引物序列 Random 9 mers   5′-NNNNNNNNN-3′ Oligo dT Primer   包含Takara特别设计的dT区域。本序列与TaKaRa RNA PCR Kit（AMV）Ver.3.0（Code No. RR019A/B）及TaKaRa RNA LA PCR Kit（AMV）Ver.1.1（Code No. RR012A）中的Oligo dT-Adaptor Primer的序列不同，没有M13 Primer M4区域。 Control F-1 Primer   5′-CTGCTCGCTTCGCTACTTGGA-3′ Control R-1 Primer   5′-CGGCACCTGTCCTACGAGTTG-3′

■ 试剂盒的原理

BcaBEST RNA PCR的原理图

■ 试剂盒特点

RNA模板   适用于所有RNA (对富含GC的mRNA及具有复杂二级结构的mRNA特别有效) 扩增片段大小    5 kb以下 反转录酶    BcaBEST Polymerase (最适温度65℃) DNA聚合酶    Bca-Optimized Taq RNase Inhibitor    必须使用 (试剂盒中含有) 合成cDNA第一条链的引物   Random 9 mers、Oligo dT-Adaptor Primer或 特异性下游PCR Primer 可供选择 操 作    在同一反应管中进行 (反转录酶在进行PCR反应前须进行高温失活)