溴代十六烷基三甲胺(CTAB)的使用方法-技术文章

溴代十六烷基三甲胺(CTAB)的使用方法

溴代十六烷基三甲胺简称: CTAB,英文名称Cetyltrimethylammonium bromide, 又称鲸蜡烷三甲基溴化铵,十六烷基三甲基溴化铵,白色粉末状,是一种季铵盐溶于水,在酸性溶液中保持稳定。是一种阳离子去垢剂,用于从大量产生粘多糖的有机体如植物以及某些革兰氏阴性菌(包括E.coli的某些株)中制备纯化DNA 。

CTAB结构式

原理:CTAB是一种阳离子去污剂,具有从低离子强度的溶液中沉淀核酸和酸性多聚糖的特性,在这种条件下,蛋白质和中性多聚糖仍留在溶液里,在高离子强度的溶液里,能够与蛋白质和大多数酸性多聚糖以外的多聚糖形成复合物,只是不能沉淀核酸,从而将核酸分离出来。

使用方法:

1.提取DNA配方:

CTAB 4g

NaCl 16.364 g

1M Tris-HCl 20 mL( PH8.0)

冷却后0.2-1%2-巯基乙醇(400ul)氯仿-异戊醇(24:1):先加96ml氯仿,再加4ml异戊醇,摇匀即可。

2.提取RNA配方

2% CTAB(W/V)

2%聚乙烯吡咯烷酮PVP(W/V)

100 mM Tris-HCl(pH8.0,DEPC处理的水配制)

25mM EDTA

由于在高温灭菌条件下,Tris-HCl要和DEPC发生反应,所以配RNA提取缓冲液时直接用DEPC 处理的水

使用注意事项:CTAB有毒,半数致死量(大鼠,静脉)44mg/kg。具有刺激性,若吸入、摄入或皮肤吸收,会对人体有害。使用时要戴合适的手套和防护眼镜(或在通风橱操作),避免吸入其粉尘。

nunc